DNA在生物体内是以与蛋白质形成复合物的形式存在的，因此提取出脱氧核糖核酸蛋白复合物（DNP）后，必须将其中的蛋白质除去。小牛胸腺，鱼类精子和植物种子的胚等含有丰富的DNA，可作为提取DNA的良好材料。
DNA在生物体内是以与蛋白质形成复合物的形式存在的，因此提取出脱氧核糖核酸蛋白复合物（DNP）后，必须将其中的蛋白质除去。小牛胸腺，鱼类精子和植物种子的胚等含有丰富的DNA，可作为提取DNA的良好材料。动物和植物组织的脱氧核糖可溶于水或浓（如1mol/L氯化钠溶液），但在0.14mol/L中的溶解度很低，而核糖（RNP）则溶于0.14mol/L盐溶液中，利用这一性质可将脱氧核糖核蛋白与核糖核蛋白以及其他杂质分开，当核蛋白与氯仿一起振荡时，蛋白质变性而与核酸分开，核酸继续保留于水相中，再用乙醇将水相中的DNA沉淀出来。为除去DNA制品混杂的RNA，可用核糖处理。大部分多糖在用乙醇或异丙醇分级沉淀时即被除去，如需要还可以进一步通过柱层析或电泳加以纯化。
试剂和器材
0.1mol/L氯化钠-0.05mol/L，pH 7.0柠檬酸钠缓冲溶液：先配制0.05mol/L，pH=7.0柠檬酸钠缓冲溶液，然后将氯化钠溶于此缓冲溶液中，使其最终浓度达到0.1mol/L。
10%氯化钠溶液；氯仿-异戊醇混合液（体积比为9∶1）；95%乙醇；无水乙醇；
小牛胸腺。
易生物仪器库：
易生物试剂库：
组织捣碎机，，玻璃匀浆器。
1. 取新鲜（或冰冻）的小牛胸腺，除去血水和结缔组织，在冰浴上切成小块，称取20g，加入2倍体积的0.1mol/L氯化钠-0.05mol /L，pH=7.0柠檬酸钠缓冲溶液，于组织捣碎机上高速匀浆5分钟。
2. 组织糜用转速为3000r/min的离心15分钟，将沉淀用50 mL上述缓冲溶液洗涤2次，洗涤时用匀浆器研磨洗涤，每次如前离心。向最后得到的细胞核沉淀中加入6倍体积的10%氯化钠溶液，充分搅匀置冰箱中过夜，以充分提取DNP，溶液为粘稠状。将所得的半透明粘稠状液体，用滴管慢慢注入冷水中，边加边轻轻搅动（NaCl的最终浓度为0.14mol/L），这时有白色丝状物&&核蛋白析出，在冰箱中静置数小时，收集沉淀。将沉淀物再溶于4倍体积的10%氯化钠溶液中，迅速搅拌以加速溶解。加入1/2体积的氯仿- 异戊醇混合液，剧烈振荡5分钟左右，用转速为3000r/min的离心机离心15分钟，得三层：上层为含有DNA和DNA核蛋白的水层，下层为氯仿-异戊醇的有机溶剂层，变性蛋白质介于两层之间。
6. 吸出上面的水层，再用氯仿-异戊醇如前进行脱蛋白，直至界面处不再出现变性蛋白质为止。
7. 最后吸出上清液并将其注入两倍体积的95%乙醇中，用玻璃棒搅起白色纤维状DNA沉淀，沥干，用80%乙醇洗涤，最后用少量无水乙醇洗涤。尽量沥干乙醇后，铺开在表面皿上。置于真空干燥器内干燥，即得白色纤维DNA钠盐。
（1）由于DNA主要存在于细胞核中，为了便于提取DNA，应严格控制胸腺破碎的条件，既要将细胞膜破碎，又要尽可能避免细胞核被破坏，导致DNA释放而被断裂，。
（2）在用氯仿-异戊醇除去组织蛋白时，要剧烈振荡使蛋白变性。若振荡不够，蛋白质不能很好除去，则影响DNA制品的质量。
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小牛胸腺DNA的溶解
女 | 0个月
来自黑龙江
健康咨询描述：
我用灭过菌的去离子水溶解小牛胸腺DNA时,放在快速混匀机上震了几下,会不会对DNA有什么影响?谢谢另外,用去离子水溶解小牛胸腺DNA能保存多长时间呢?
sdyzmrh2008
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擅长: 内科慢性病,特别是慢性乙肝
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&&&&&&你好,应该是有影响的,如果有什么不清楚地欢迎您继续提问,
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白叶藤碱类似物的合成以及与小牛胸腺DNA的相互作用
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3秒自动关闭窗口小牛胸腺DNA溶液品牌
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小牛胸腺DNA溶液品牌
产品价格：
产品型号：
品&牌：百奥莱博
公司名称：北京百奥莱博科技有限公司
所&在&地：北京海淀
发布时间：
浏览次数：189
百奥莱博专业生产供应小牛胸腺DNA溶液品牌，我公司销售全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购小牛胸腺DNA溶液品牌。
产品详细信息
名称：小牛胸腺DNA溶液品牌
英文名：Calf Thymus DNA Solution
编号：BTN131207
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
提示：本品仅用于科研实验，不能用作医疗及临床诊断。
本产品是浓度为10 mg/mL的、经过热变性处理的单链小牛胸腺DNA溶液,可以用于Southern、Northern预杂交,还可以用于酵母化学转化和电转化。本产品即开即用,非常方便。
运输及保存:
低温运输和-20℃保存、有效期一年。
除小牛胸腺DNA溶液品牌外，我公司正在打折促销以下产品：
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小牛胸腺DNA溶液品牌关键词：小牛胸腺DNA溶液,BTN131207,百奥莱博
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小牛胸腺DNA溶液品牌关键词：小牛胸腺DNA溶液,BTN131207,百奥莱博
·溶菌酶溶液
编号：BTN100815
英文名称：Lysozyme Solution
规格：1.5mL
本产品是浓度分别为10 mg/mL的蛋清型溶菌酶溶液,可以用于下列分子生物学实验。
1.核酸纯化
2.包涵体蛋白纯化
3.质粒DNA纯化
4.几丁质的水解
5.细胞壁的水解
溶菌酶(Lysozyme,EC 3.2.1.17),即N-乙酰胞壁质酶(N-acetylmuramidase),广泛分布于自然界各种生物体中。它最早由法国科学家Nicolle在1907年报道(被称为枯草芽孢杆菌溶解因子),1909年Laschtschenko报道鸡蛋清的强抑菌作用跟酶有关,1922年,英国科学家Fleming发现,人的鼻涕、唾液、眼泪等也有强的溶菌活性并将该溶菌作用因子命名为溶菌酶(lysozyme)。年,Salton发现溶菌酶作用于N-乙酰壁酸和N-乙酰氨基葡萄糖之间β-1,4糖苷键。1967年,结构生物学奠基人、英国科学家David Phillips通过X-射线衍射研究解析了其三级结构,成为近代酶化学研究中重大的成果之一。
鸡蛋清溶菌酶是动物源溶菌酶的典型代表,也是目前研究得最透的一类溶菌酶。它在鸡蛋清中的含量占2%～4%,等电点在pH 10.8左右,由129个氨基酸组成,分子量为14000,能溶解溶壁小球菌、巨大芽孢杆菌、黄色八叠球菌等革兰氏阳性细菌,对革兰氏阴性细菌无分解作用。溶菌机理相当复杂,其最适作用温度为50℃,化学性质很稳定,pH在1.2～11.3之间变化不会影响酶结构太大的改变,遇热该酶也很稳定。pH4～7的范围内,酶在100℃处理1分钟仍有近100%的活力,但在碱性环境条件下,酶稳定性较差。维持其稳定性的结构主要由4个二硫键、氢键及疏水键等。
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,有效期一年。
·端粒酶重复片段扩增试剂盒
编号：BTN111009
英文名称：TRAP Kit
规格：50次
端粒酶存在于85-90%的肿瘤组织中,因此通过检测端粒酶活性就能早期诊断大多数肿瘤。目前最常用的检测端粒酶活性的方法就是TRAP(telomeric repeatamplification protocol,端粒重复片段扩增),它利用端粒酶能在底物DNA末端添加不同数量的TTAGGG序列这一特点,通过PCR检测延伸产物而高效检测端粒酶活性。
本产品是我公司在经典TRAP技术基础上改良而得,专门用于快速测定人类细胞端粒酶活性。它具有以下特征:
1.一站式,提供从细胞裂解到PCR的所有试剂,但不含PAGE和银染试剂。
2.一管式操作,端粒酶延伸和PCR在同一体系中完成,方便快捷。
3.提供改进的、长为150 bp的内参和含8个端粒序列的合成端粒,可有效排除PCR假阴性。内参长度远大于TRAP产物,不会干扰结果分析。
4.改良的TS模板和PCR引物,极大降低了引物二聚体的形成。
5.既可用于培养细胞,也可用于实体组织。
6.灵敏度高,最低可以检测到10个肿瘤细胞中的端粒酶活性。
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,有效期一年。
·Glycogen 核酸助沉剂
编号：RN2601
英文名称：TRAP Kit
规格：0.35ml|0.7ml
产品介绍：
本产品为分子生物学级Glycogen(糖原)，不含DNase，不含RNase，可以用作沉淀DNA或RNA的辅助沉淀剂(used as a carrier for the precipitation of DNA or RNA)。作为DNA或RNA的辅助沉淀剂，大多数情况下glycogen比tRNA或超声处理过的DNA效果更好。由于glycogen中不含DNA和RNA，因此用glycogen作为辅助沉淀剂沉淀下来的核酸更适合于后续的PCR、RT-PCR以及内切酶等核酸酶反应。而tRNA或超声处理过的DNA作为辅助沉淀剂有时会干扰PCR、RT-PCR以及内切酶等核酸酶反应。据文献报道，连接反应产物用glycogen沉淀后对于后续的细菌转化没有干扰，0.001mg/ml glycogen不会抑制TdT，浓度不大于2mg/ml的glycogen不会影响反转录酶的活力，0.02mg/ml glycogen不会抑制T4 RNA ligase。Glycogen会干扰DNA和蛋白的相互作用。通常1微升Glycogen (20mg/ml)即可把少至皮克(pg)级的DNA或RNA从1毫升的溶液体系中沉淀出来。每个包装至少足够沉淀350个常规量的DNA或RNA样品。
储存：-20℃保存，至少一年有效。
操作步骤：
1.在待沉淀的DNA或RNA样品中加入1微升Glycogen (20mg/ml)，混匀。对于特定的实验操作，糖原的用量可以参考文献或特定的操作说明进行。
2.根据实验需要采用乙醇或其它方法沉淀DNA或RNA。
3.加入乙醇等沉淀试剂，混匀，12,000g左右离心10分钟，即可得到核酸和glycogen的共沉淀物。如果要求尽量沉淀完全，在加入乙醇等沉淀试剂并混匀后，可以-20℃或-80℃冻存数小时或过了夜后再离心。
注意事项：
1.通常每个样品加入1微升Glycogen(20mg/ml)即可，对于已知糖原可能对后续反应有干扰的情况，可以适当减少糖原用量，或使用本公司Acryl Carrier助沉剂或者tRNA等作为辅助沉淀剂。
2.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
·小鼠抗HSV标签单抗
编号：BTN130586
英文名称：Anti HSV-Tag Mouse Mab
规格：100μL
该抗体可高度特异识别重组蛋白C 末端或N 末端和内部的HSV标签(QPELAPEDPED),而不受邻近氨基酸组成的影响,可用于检测各种表达载体表达的HSV标签融合蛋白。本抗体具有下列特点:
克隆号: 2G9
抗体类型: Mouse IgG1
建议浓度:1:00
运输及保存:
常温运输, 介质需4℃ 保存, PMSF需-20℃保存,有效期一年。
·Protein G琼脂糖
编号：BTN130420
英文名称：Protein G Agarose
Protein G均能特异性地与抗体的Fc区结合,广泛应用于抗体纯化、免疫化学等领域。
本产品以琼脂糖凝胶为基质,Protein G共价交联到4% Agarose beads。本产品具有下列特点:
1.适用于用于免疫沉(Immunoprecipitation, IP)或免疫共沉淀(Co-IP),也可以用于抗体的纯化。
2.适用于免疫沉淀多数哺乳动物的IgG Fc段结合(包括:人、山羊、绵羊、兔、豚鼠、马、猪、猴、小鼠、大鼠等),不与狗IgG结合、不结合人IgM、IgD、和IgA。
3.物理化学性质稳定,配基不易脱落,使用寿命长,使用方便。
1.请勿冷冻保存本产品。
2.使用前一定要充分重悬,即充分颠倒若干次使混合均匀。
3.从蛋白样品收集开始,所有步骤中蛋白样品都必须在4℃或冰上操作。
4.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
运输及保存:
常温运输,4℃保存,有效期一年。
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