大型海藻龙须菜化学成分及其对中肋骨条藻化感作用研究--《暨南大学》2011年博士论文
大型海藻龙须菜化学成分及其对中肋骨条藻化感作用研究
【摘要】：本文提取、分离和鉴定了大型海藻龙须菜(Gracilaria lemaneiformis)的化学成分,初步阐释了龙须菜对中肋骨条藻(Skeletonema costatum)化感作用机理。主要结果如下：
利用多种吸附材料和分离方法(包括常压硅胶柱层析、反向硅胶柱层析、凝胶Sephadex LH-20柱层析、D101大孔树脂以及HPLC等),对龙须菜95%乙醇提取物进行了分离,共得到15个化合物并进行了结构鉴定。这些化合物包括3个糖脂类化合物：1-O-棕榈酸-3-O-β-D-吡半乳糖甘油酯(1-O-Palmitoyl-3-O-P-D-galactopyranosyl glycerol,1)、1-O-棕榈酸-2-O-棕榈油酸-3-O-p-D-吡喃半乳糖甘油酯(1-O-Palmitoyl-2-O-palmitoleoyl-3-O-β-D-galactopyranosyl glycerol,2)和1-O-棕榈酸-2-O-油酸-3-O-β-D-吡喃半乳糖甘油酯(1-O-Palmitoyl-2-O-oleoyl-3-O-β-D-galactopyranosyl glycerol,3);2个脂肪酸类化合物：棕榈酸(Palmitic acid,4)和亚油酸(Linoleic acid,5);2个核苷类化合物：尿嘧啶核苷(Uridine,6)和腺嘌呤核苷(Adenosine,7);3个酰胺类化合物：多鳞番荔枝酮(Squamolone,10)、2-亚乙基-3-甲基琥珀酰亚胺(2-ethylidene-3-methylsuccinimide,11)和N-苯乙基乙酰胺(N-Phenethylacetamide,12);2个酚类化合物：邻苯二甲酸丁酯异丁酯(Butylisobutyl phthalate,8)和1,4-二苄氧基苯酚(1,4-Dibenzoyloxybenzene,9);2个萜类化合物：黑麦草内酯(Loliolide,13)和3β-hydroxy-5α, 6a-epoxy-7-megastigmen-9-one (14)；1个其他类化合物：8-羟基-4E,6E-辛二烯-3-酮(8-Hydroxy-4E,6E-octadien-3-one,15)。所有化合物均首次从龙须菜中分离得到,其中,化合物8-Hydroxy-4E,6E-octadien-3-one (15)为新化合物。
赤潮藻活性筛选实验结果表明,在分离得到的12种化合物中,亚油酸的抑制效果最好,亚油酸对中肋骨条藻的IC50值为23.17μmol/L;2-亚乙基-3-甲基琥珀酰亚胺的抑制效果最差,在浓度330μmol/L时,其抑制率仅达到19.8%,无法得出其ICso值。
亚油酸对中肋骨条藻细胞增值有重要影响。高浓度组细胞的生长明显受到化感物质亚油酸的胁迫,100μmol/L浓度组在72 h时,其细胞密度仅为对照组的16%。较低浓度的亚油酸对中肋骨条藻的超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量在短时间内均有促进作用,随着亚油酸暴露时间的延长和浓度增大,中肋骨条藻超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量逐渐下降。
亚油酸对中肋骨条藻细胞亚显微结构有重要影响。亚油酸可导致中肋骨条藻细胞膜、叶绿体、线粒体、细胞核等亚显微结构受到不同程度的破坏。
【关键词】：
【学位授予单位】：暨南大学【学位级别】：博士【学位授予年份】：2011【分类号】：S917.3【目录】：
Abstract6-12
1 绪论12-27
1.1 大型海藻龙须菜栽培及其环境意义13-16
1.1.1 龙须菜概述13
1.1.2 龙须菜栽培研究概况13-14
1.1.3 龙须菜对污染海域的生态修复14-15
1.1.4 龙须菜对赤潮藻化感作用研究概况15-16
1.2 化感作用及其应用研究概况16-24
1.2.1 化感作用的定义及发展概况16-17
1.2.2 化感作用研究方法17-18
1.2.3 化感物质的种类18
1.2.4 化感物质收集及分离鉴定18-20
1.2.5 化感作用的特点及作用机理20-23
1.2.6 大型海藻化感作用研究概况23-24
1.4 赤潮研究概况24-26
1.4.1 赤潮的成因24
1.4.2 赤潮的危害24-25
1.4.3 赤潮的预防与治理25-26
1.5 本研究目的与内容26-27
1.5.1 研究目的26
1.5.2 研究内容26-27
2 龙须菜化学成分分离和结构鉴定27-50
2.1 化学成分的提取与分离27-30
2.1.1 材料和试剂仪器27-28
2.1.2 化学成分提取28-29
2.1.3 化学成分分离29-30
2.2 化学成分结构鉴定30-45
2.2.1 仪器与方法30-31
2.2.2 化合物结构式31-32
2.2.3 结构解析32-38
2.2.4 化合物的物理常数和波谱数据38-45
2.3 结果与讨论45-50
2.3.1 糖脂类化合物45-46
2.3.2 脂肪酸类化合物46-47
2.3.3 核苷类化合物47
2.3.4 酰胺类化合物47-48
2.3.5 酚类化合物48
2.3.6 萜类化合物48-50
3 龙须菜化学成分对赤潮藻化感作用的活性筛选50-66
3.1 材料与方法50-52
3.1.1 实验材料、仪器及试剂50-51
3.1.2 实验方法51-52
3.2 结果与讨论52-65
3.2.1 糖脂类化合物对中肋骨条藻生长影响52-54
3.2.2 脂肪酸类化合物对中肋骨条藻生长影响54-58
3.2.3 核苷类化合物对中肋骨条藻生长影响58-59
3.2.4 酰胺类化合物对中肋骨条藻生长影响59-62
3.2.5 萜类化合物对中肋骨条藻生长影响62-64
3.2.6 新化合物对中肋骨条藻生长影响64-65
3.3 小结65-66
4 亚油酸对中肋骨条藻化感作用机理的初步研究66-79
4.1 材料与方法66-68
4.1.1 材料66
4.1.2 实验方法66-67
4.1.3 分析测定67-68
4.2 结果与讨论68-79
4.2.1 亚油酸对中肋骨条藻细胞增殖的影响68-70
4.2.2 亚油酸对中肋骨条藻叶绿素a的影响70-72
4.2.3 亚油酸对中肋骨条藻丙二醛的影响72-73
4.2.4 亚油酸对中肋骨条藻细胞超氧化物歧化酶活性的影响73-74
4.2.5 亚油酸对中肋骨条藻细胞亚显微结构的影响74-79
5 结论与展望79-81
5.1 结论79-80
5.2 展望80-81
参考文献81-96
已发表和待发表的文章96-97
附录Ⅰ 化合物结构式及名称98-100
附录Ⅱ 化合物部分波谱图100-144
1. 化合物1 部分波谱图100-104
2. 化合物2 部分波谱图104-109
3. 化合物3 部分波谱图109-112
4. 化合物4 部分波谱图112-116
5. 化合物5 部分波谱图116-119
6. 化合物6 部分波谱图119-122
7. 化合物7 部分波谱图122-124
8. 化合物8 部分波谱图124-126
9. 化合物9 部分波谱图126-128
10. 化合物10 部分波谱图128-132
11. 化合物11 部分波谱图132-134
12. 化合物12 部分波谱图134-137
13. 化合物13 部分波谱图137-139
14. 化合物14 部分波谱图139-143
15. 化合物15 部分波谱图143-144
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京公网安备75号鲜切苹果酶促褐变及品质控制技术研究--《西北农林科技大学》2011年硕士论文
鲜切苹果酶促褐变及品质控制技术研究
【摘要】：本论文以富士、嘎啦、乔纳金和秦冠四个品种为试验材料,研究了褐变底物、贮藏温度、包装方式对鲜切苹果贮藏品质的影响,并且探讨了不同抑制剂对鲜切苹果酶促褐变的抑制效果,目的在于探索鲜切苹果酶促褐变的主要原因及防治方法。试验结果表明:
1、鲜切富士、嘎啦、乔纳金和秦冠苹果在贮藏过程中色泽(L*值)和硬度值均呈下降趋势,其中富士苹果的色泽和硬度下降最慢,贮藏14d,L*值和硬度分别下降9.6%、34.56%,而鲜切秦冠的色泽下降幅度最大,贮藏14d后,色泽由77.66下降到67.09,降幅达到13.61%。富士经鲜切处理后其色泽保持较好,硬度也较高,比较适合做鲜切苹果加工材料;
2、鲜切苹果在贮藏过程中,酚类物质含量和多酚氧化酶活性均呈现先上升后下降趋势,其中鲜切秦冠和乔纳金的酚类物质含量较高且变幅大,而富士和嘎啦的总酚含量较低,变化较为平缓;鲜切秦冠的PPO活性最高,变化幅度最大,而鲜切富士、嘎啦和乔纳金苹果的PPO活性均小于秦冠且变化平缓;
3、不同品种鲜切苹果酶促褐变底物不同,其中嘎啦、富士和秦冠在贮藏期内的酶促褐变是以绿原酸和表儿茶素为底物,而乔纳金在贮藏期内的酶促褐变是以绿原酸为底物;
4、鲜切富士、嘎啦、乔纳金和秦冠苹果在不同温度(常温、2℃、6℃和10℃)下贮藏,各品种的色泽和硬度呈不同程度的下降趋势,而总酚含量和PPO活性呈先升高后下降的趋势,各品种的鲜切苹果在6℃下贮藏可较好的保持其色泽和硬度,并且有效的抑制了总酚含量和PPO活性的上升;
5、不同包装处理鲜切苹果后品质变化各异,其中真空包装效果最佳,较好的保持了鲜切苹果的色泽和硬度,有效抑制了PPO、POD和PAL活性的上升。
6、单一使用0.3%柠檬酸、0.5%草酸、0.7%抗坏血酸、0.7%L-半胱氨酸和0.007%4-己基间苯二酚处理均能有效的抑制鲜切苹果褐变。其中4-己基间苯二酚、抗坏血酸和草酸抑制效果优于柠檬酸和L-半胱氨酸。
7、鲜切苹果的最佳护色保鲜液组合为:0.009%4-己基间苯二酚+0.8%抗坏血酸+0.5%草酸,浸渍8min,并结合6℃贮藏,可有效抑制褐变,保持鲜切苹果的品质。其中对鲜切苹果抑制褐变起主导作用的抑制剂是4-己基间苯二酚。
【关键词】：
【学位授予单位】：西北农林科技大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2011【分类号】：S661.1【目录】：
摘要5-6ABSTRACT6-11第一章 文献综述11-19 1.1 鲜切果蔬研究进展12 1.2 鲜切果蔬褐变及其抑制方法12-18
1.2.1 与鲜切果蔬褐变相关的因素12-14
1.2.1.1 酚类物质13
1.2.1.2 酶促褐变的酶类13-14
1.2.1.3 氧气14
1.2.2 抑制褐变的方法14-18
1.2.2.1 物理方法15-16
1.2.2.2 化学方法16-17
1.2.2.3 辐照处理17
1.2.2.4 高压处理技术17
1.2.2.5 生物技术17-18 1.3 本研究的意义、内容和目标18-19
1.3.1 研究意义18
1.3.2 研究内容和目标18-19第二章 不同品种鲜切苹果贮藏品质比较和酶促褐变底物的分析19-27 2.1 材料与方法19-20
2.1.1 实验材料与试剂19
2.1.2 处理方法19
2.1.3 测定指标19-20 2.2 结果与分析20-25
2.2.1 不同品种鲜切苹果贮藏过程中理化指标的变化20-21
2.2.1.1 不同品种鲜切苹果贮藏过程中色泽和硬度的变化20
2.2.1.2 不同品种鲜切苹果贮藏过程中总酚含量和PPO 活性的变化20-21
2.2.2 不同品种鲜切苹果褐变底物的分析21-25 2.3 小结25 2.4 讨论25-27第三章 贮藏温度对鲜切苹果品质的影响27-34 3.1 材料与方法27
3.1.1 试验材料和处理27
3.1.2 测定指标与试剂27
3.1.3 数据处理27 3.2 结果与分析27-33
3.2.1 鲜切富士苹果在不同贮藏温度下品质的变化27-29
3.2.1.1 鲜切富士苹果在不同贮藏温度下色泽和硬度的变化27-28
3.2.1.2 鲜切富士苹果在不同贮藏温度下总酚含量和PPO 活性的变化28-29
3.2.2 鲜切乔纳金苹果在不同贮藏温度下品质的变化29-30
3.2.2.1 鲜切乔纳金苹果在不同贮藏温度下色泽和硬度的变化29
3.2.2.2 鲜切乔纳金苹果在不同贮藏温度下总酚含量和PPO 活性的变化29-30
3.2.3 鲜切嘎啦苹果在不同贮藏温度下品质的变化30-31
3.2.3.1 鲜切嘎啦苹果在不同贮藏温度下色泽和硬度的变化30-31
3.2.3.2 鲜切嘎啦苹果在不同贮藏温度下总酚含量和PPO 活性的变化31
3.2.4 鲜切秦冠苹果在不同贮藏温度条件下品质的变化31-33
3.2.4.1 鲜切秦冠苹果在不同贮藏温度下色泽和硬度的变化31-32
3.2.4.2 鲜切秦冠苹果在不同贮藏温度下总酚含量和PPO 活性的变化32-33 3.3 小结33 3.4 讨论33-34第四章 不同包装方式对鲜切苹果贮藏品质的影响34-38 4.1 材料与方法34
4.1.1 实验材料与仪器34
4.1.2 处理方法34
4.1.3 测定指标34 4.2 结果与分析34-36
4.2.1 鲜切苹果在不同包装方式处理后色泽和硬度的变化34-35
4.2.2 鲜切苹果在不同包装方式处理后总酚含量和PPO 活性的变化35-36
4.2.3 鲜切苹果在不同包装方式处理后POD 活性和PAL 活性的变化36 4.3 小结36-37 4.4 讨论37-38第五章 不同抑制剂对鲜切苹果贮藏品质的影响和最佳复合抑制剂的筛选38-46 5.1 材料与方法38-39
5.1.1 试验材料与试剂38
5.1.2 处理方法38-39
5.1.2.1 单一抑制剂处理38
5.1.2.2 复合抑制剂筛选38-39
5.1.3 测定指标39 5.2 结果与分析39-44
5.2.1 单一抑制剂对鲜切苹果贮藏品质的影响39-42
5.2.1.1 柠檬酸对鲜切苹果保鲜效果的研究39-40
5.2.1.2 草酸对鲜切苹果保鲜效果的研究40-41
5.2.1.3 抗坏血酸对鲜切苹果保鲜效果的研究41
5.2.1.4 L-半胱氨酸对鲜切苹果保鲜效果的研究41-42
5.2.1.5 4-己基间苯二酚对鲜切苹果保鲜效果的研究42
5.2.2 最佳复合抑制剂的筛选42-44
5.2.2.1 复合抑制剂处理鲜切苹果后贮藏品质的变化42-43
5.2.2.2 复合抑制剂处理后对正交试验结果的分析43-44 5.3 小结44-45 5.4 讨论45-46全文结论46-47参考文献47-52附录52-53致谢53-54作者简介54
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