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乙型肝炎病毒(hbv)dna测定1.59E+05超过了吗？需要治疗....
乙型肝炎病毒(hbv)dna测定1.59...
病情描述（发病时间、主要症状、症状变化等）：乙型肝炎病毒(hbv)dna测定1.59E+05超过了吗？需要治疗吗？曾经治疗情况和效果：检查出李小三阳，没治疗过想得到怎样的帮助：乙型肝炎病毒(hbv)dna测定1.59E+05超过了吗？需要治疗吗？
一个多月前出现了不想吃饭的情况的，特别是到了现在有的时候吃了就会恶心的厉害，早上还出现了身上没有力气的情况，检查说得了乙肝大三阳.
提问者采纳
因不能面诊，医生的建议仅供参考
职称：医师
专长：内科
&&已帮助用户：564
问题分析：您所检查的是乙型肝炎病毒DNA,可以看出病毒有没有在复制,如果大量复制就表明传染性很强.意见建议：乙肝目前有两种方法:一,抗病毒治疗.二,肝功能正常的情况不作任何治疗.您所检查,可以作抗病毒治疗,当然这个也有缺点的.
职称：主任医师
专长：病毒性肝炎抗病毒治疗、 肝硬化腹水的中医药治疗。
&&已帮助用户：12
意见建议:肝功能正常吗，肝脏彩超做过吗？如果这两项检查有不正常，就需要治疗。
问乙型肝炎病毒（HBV）DNA测定结果
职称：普通医生
专长：血液疾病，传染病
&&已帮助用户：1244
病情分析：
意见建议：小三阳说明感染了乙肝，乙肝后期或慢性乙肝，
问乙型肝炎病毒(HBV)DNA测定(HBV-DNA)4.01+03阳性正常吗
职称：药师
专长：肝病
&&已帮助用户：6235
问题分析：乙肝大三阳转为小三阳，说明E抗原受到明显的抑制，病毒复制受限，病毒活跃性大大下降了。现在乙肝病毒量HBV-DNA的结果是4010拷贝每毫升，虽说呈阳性，但只是参考值4倍左右，属于低病毒复制状态。综合来看，你的情况是小三阳低病毒复制，如果肝功能正常，那就是小三阳低病毒携带者。意见建议：建议补充一下肝功能的检查结果，以便给你进一步分析。
问乙型肝炎病毒hbv测定结果7、822e+03很严重吗
职称：医师
专长：颈椎腰腿痛疾病、中风、面瘫、失眠、偏头痛、顽固性呃逆、痛经、胃痛、便秘、耳鸣耳聋、牙痛等
&&已帮助用户：56090
病情分析： 你好，看你说的情况，那这时患有乙肝小三阳有五年的病情了，看你这次乙肝病毒DNA的检查结果只是稍微有点异常，这时看到问题不大的意见建议：那建议你可在化验一下肝功能看看的好，如果说肝功能是正常的，那这时不需要做治疗的，定期复查就好，平时在生活和饮食上多注意保养就行的
问您好，请问hbvdna乙型肝炎病毒(hbv)dna测定结果9.826E...
职称：医生会员
专长：高血压，心脏病，月经不调，儿科
&&已帮助用户：157703
问题分析：你好！乙肝这种疾病它并不是遗传性疾病的，它是一种病毒性传染性疾病，一般它会通过血液，性接触及母婴方式来传播的，意见建议：在日常的生活接触中通常是不会传染的。目前，最好的预防感染乙肝的方法就是注射乙肝疫苗，祝你健康了
问乙型肝炎病毒HBV-DNA定量
职称：医师
专长：高血压、糖尿病、心血管疾病
&&已帮助用户：1740
你好你目前的情况病毒是在中高水平的复制状态，现在你已经怀孕了，传染给孩子的几率有50%，不过你现在没有必要担心，后期可以采取母婴阻断的.建议你在怀孕的789三个月注射抗乙肝免疫球蛋白，然后孩子出生以后的24小时之内注射乙肝疫苗结合抗乙肝免疫球蛋白注射，可以有效阻断母婴传播的.
问乙肝小三阳多年以下是前两天检查结果乙型肝炎病毒(hbv...
&&已帮助用户：184475
指导意见：你好,脂肪肝注意饮食很重要 ,改变自己不良生活习惯和嗜好,饮食上要求低补、戒烟、限酒的原则,保持清淡 均衡的饮食,多食高纤维食物,减少进补、甜食和高胆固醇饮食,必要时服用脂必妥或者藻酸双脂钠降血脂药物
,定期复查,祝健康,
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你的乙肝病毒2.30乘以十的八次方,病毒量是,病毒处于复制中,最好进行抗病毒治疗,服用贺普丁,1片/次/日,至少连服1年
这两个是抗体,那你的抗原是阳性还是阴性?
抗原阳性,说明是乙肝病毒携带者.
而抗体,则不一定.说明体内正在跟病毒作斗争.
乙肝-百科介绍
乙型肝炎又称为血清性肝炎、乙型病毒性肝炎，是由乙型肝炎病毒(HBV )引起的传染病 。通过血液与体液传播，具有慢性携带状态。因其可能通过性生活传播，国际上将其列入性传...
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(window.slotbydup=window.slotbydup || []).push({
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display: 'inlay-fix'摘要：目的HBVDNA是乙型肝炎病毒复制最直接的指标，为探讨其在临床应用上的价值，方法通过5974例甲乙型肝炎血清标志检测结果分析，对HBeAg阳性的含义有进一步的认识。结果发现它与HBeAg相关密切，在判断乙肝病毒复制时不能单凭HBeAg阳性，而应结合HBVDNA是否阳性；在判断乙肝病毒停止复制的康复期时也不能单凭HBeAg阴转、抗-HBe阳转，还应结合HBVDNA是否也阴转。结论把HBVDNA列入乙型肝炎常规检查具有较大的临床意义。HBVDNA分子杂交试验是目前诊断乙型肝炎、判断病毒复制和评价患者肝脏病变、预后及药物疗效的重要指标之一，目前国内外已普遍应用于临床。为进一步了解HBVDNA检测的实用价值及临床意义，我们对5974份血清标本，同时用ELISA检测HAVIgM、HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb、及应用非放射性斑点杂交技术检测HBVDNA，对检测结果及临床应用作出评价。
　　材料和方法
　　一、材料
　　5974份血清标本来自1994年1月～12月到我科作甲、乙型肝炎血清标志检测者标本，其中门诊标本4002份，住院标本1021份，体检标本951份。所有标本均为随机抽样而未作任何选择，在作甲、乙型肝炎血清标志检测的同时，进行HBVDNA分子斑点杂交试验。
　　二、试剂与方法
　　㈠、甲乙型肝炎血清标志检测试剂均采用厦门新创科技有限公司提供的ELISA药盒，按说明书操作。判断结果全部采用华东电子管厂生产的DG3022-A型酶联免疫检测仪自动打印结果。所有检测结果均输入微机FOXBASE数据库管理系统进行统计。
　　㈡、HBVDNA杂交试验：药盒由上海医科大学预防医学研究所提供，按说明书操作。
　　5974份血清标本的HBVDNA及甲、乙型肝炎血清标志的检测结果。
　　一、从附表可见，5974份血清标本的HBV血清标志阳性者中，其HBVDNA的阳性率分别是：HBeAg(82.49%)大于HBsAg(40.79%)大于抗HBc(29.94%)大于抗HBe(4.34%)大于抗HBs(0.37%)。
　　二、从附表也可见，10种HBV血清标志模式HBVDNA阳性率与HAVIgM阳性率约成反比，即如HBVDNA阳性率越高，其HAVIgM的阳性率就越低，反之则越高。
　　三、从附表还可见，表面抗原阳性的前４种HBV血清标志模式其急性甲肝合并感染率很低为2.95％(122/4138)，而表面抗原阴性的后６种HBV血清标志模式的急性甲肝合并感染率却较高为15.36%(282/1836)，两者比较X=13.75P＜0.01相差极为显著，其原因尚待进一步探讨。
　　一、Berninger采用密度梯度离心技术发现：HBVDNA阳性血清其DNA与Dane氏颗粒具有相同的密度梯度，故HBVDNA阳性即反映有复制完整HBVDNA颗粒存在。而HBsAg又是HBV核心颗粒的主要结构蛋白之一，其合成受HBV遗传编码所控制。有学者报道当孕妇血清中HBVDNA水平很高时(＞80pg/10μl)，虽经采取母婴阻断措施，仍可发生母婴传播。有报道HBVDNA与HBeAg密切相关，认为HBVDNA和HBeAg都是评价乙肝患者的传染性的重要指标。本文的检测结果，82.49％的HBeAg阳性血清中检出HBVDNA，符合以上观点。从上述检测结果可见，如果单凭HBeAg阳性或单凭HBVDNA阳性来判断乙型肝炎患者的传染性，将会漏掉15％左右具有传染性乙型肝炎患者。因此我们认为应把HBeAg和HBVDNA结合起来，两者只要有一项阳性就应考虑其具有传染性。只有这样才能把乙肝的预防、隔离及治疗工作做彻底。
　　二、近来有文献指出：在部份HBsAg及抗-HBe阳性的乙肝患者血清中HBVDNA也阳性。因此认为，抗HBe阳性只能说明病毒复制程度减低，而不能代表复制停止，病情有可能反复。我们在1824例HBsAg及抗HBe同时阳性的血清中有99例HBVDNA阳性，阳性率5.43％也反映以上观点。所以我们认为在判断乙型肝炎的预后，HBVDNA比HBeAg更敏感而特异。
　　当乙肝病毒清标志物检测结果为HBeAg阴转，而抗-HBe阳转还不能乐观，只有在HBeAg与HBVDNA同时阴转时，病情才可能是较隐定的康复期。因此把HBVDNA列入常规检查，将更能准确、更全面地判断急慢性乙型肝炎的预后。
　　三、有文献报道，在抗-HBe阳性的患者中，HBVDNA阳性率达10.9％左右。我们在1302例抗-HBe阳性的血清中查出100例HBVDNA阳性，阳性率为4.34％。从附表还可见：
　　在1836例HBsAg阴性的血清中查出5例HBVDNA阳性，阳性率0.27％。这对于筛选献血者具有很大价值。因而我们认为在筛选献血员时，最好能同时检查HBVDNA，以确保病人用血安全。
　　参考文献
　　１、Berninger,M etal:J Med Virol .
　　２、Lee,SD etal:Heparology .
　　３、倪贤诊，刘逢举，陈清锋等。斑点杂交试验直接检测HBV dNA在乙型肝炎诊断中的应用。中华传染杂志。
　　４、王业东，张玲霞，朱传琳等。各型HBV感染者血清中HBV dNA的进一步研究。中华医学检验杂志。
日期：日 - 来自[]栏目
全球约1/3的人曾感染过乙型肝炎病毒（HBV），其中约3.5亿～4亿人为慢性HBV感染。美国CDC1999年的一份研究结论是，全球乙肝病毒感染者最终的死亡人数要远大于艾滋病毒感染者的死亡人数。我国表面抗原（HBsAg）阳性的人约1.2亿人，其中约3000万人为慢性乙肝患者。面对如此庞大的患者群，治疗现状却不尽如人意。　　我接诊过两个典型病例，一个是17岁学生，一个是30岁农民，均为“大三阳”，母婴传播，但肝功一直正常，前后两次检查HBVDNA也基本无变化。我都告诉他们：是慢性乙肝病毒携带者，暂时无须治疗，定期复查，若肝功异常再予治疗。但他们认为感染了乙肝病毒就应治疗，等肝功有问题再治就晚了，所以只要打听到“转阴”秘方就去购买。那个农民两年花去2.7万元，还落下个肝硬化腹水！显然，上述两人都是“大小三阳快速转阴”广告的受害者。在慢性隐匿性乙肝患者中，约20％的患者“两对半”全部为阴性。不管是“大三阳”或“小三阳”，只要肝功持续正常，也无明显临床症状，医学上称为“慢性HBV携带者”，这部分人中绝大多数是在胎儿或婴幼儿时感染乙肝病毒，现处于免疫耐受状态，他们不应被诊断为乙型肝炎，暂时也无须治疗！　　“两对半”检测是上个世纪七十年代建立的，虽然在当时对乙肝诊断起了巨大作用，但不能迅速准确反映乙肝病毒的消长，所以八十年代聚合酶链反应技术（PCR）发明以来，可在数小时内将血清中乙肝病毒的脱氧核糖核酸（HBVDNA）扩增数千万倍，准确测定血清中乙肝病毒的载量，主要有四方面作用：
（1）确定诊断：血清HBVDNA阳性是体内有乙肝病毒的直接证据。特别对于“两对半”全部为阴性的部分隐匿性乙肝患者来说，HBVDNA阳性可以说是诊断乙肝的惟一证据。
（2）可直接了解乙肝病毒复制情况，从而了解传染性大小。
（3）了解抗病毒药物的治疗效果。
（4）近年发现HBVDNA负荷高者，其肝癌发生率比低负荷者要大5～10倍。因此追踪HBVDNA又可预测疾病的发展及预后。然而由于利益驱使，许多未经检查验收的单位都相继开展这项检测。更有甚者，将这项基因检测打上“基因治疗”的幌子。而实际上，目前乙肝的基因治疗在动物实验上尚不完全成功，更不用说在人体上应用了。　　修改后的中国慢性乙肝防治指南，对HBsAg阳性、肝功正常者进行了区分，即分为“慢性HBV携带者”和“非活动性HBsAg”携带者。二者主要区别是：前者HBVDNA阳性，有传染性，而后者测不到HBVDNA。这种区分无疑是有益的，使数千万HBsAg阳性，肝功正常而HBVDNA测不到的人，甩掉了“重要传染源”的帽子，减轻了心理负担。但是“非活动性HBsAg携带者”的称呼是不科学的，建议将其改为“非活动性慢性HBV感染者”。这个概念定义为“HBsAg阳性、HBeAg阴性、HBVDNA测不到，肝功能一年内3次检测皆正常”。这个概念可与前述“慢性HBV携带者”相对应。2004年在新德里召开的APASL年会上，很多学者提出了抛弃“非活动性HBsAg携带者”的概念。在“亚太地区慢性乙肝处理共识”（2005年最新报告）中，更是提出了“非活动性慢性HBV感染”的概念，这一概念定义为“HBsAg阳性、肝功正常、HBVDNA测不到”。符合这个概念的人群，基本上不具有传染性，也暂时不需要治疗，这将使数千万人从沉重的精神负担、经济负担中解脱出来。这个建议是否值得我们采纳呢？
日期：日 - 来自[]栏目目的探讨导致HBVDNA阳性、preS1抗原阳性标本ELISA检测HBeAg阴性的原因。方法筛选76例HBeAg阴性而preS1及HBVDNA阳性的血清分别进行（1）血清1：100稀释后重新用ELISA测定HBeAg；（2）用单克隆抗-HBe固相ELISA检测血清HBeAg／IC；（3）用寡核苷酸探针斑点杂交法测定HBV前C区的基因突变。结果76份血清稀释后重测5例HBeAg阳性；38例HBeAg／IC阳性；24例HBV前C区存在基因突变。结论后带效应、HBeAg／IC、前C区基因突变是HBVDNA阳性血清HBeAg阴性的主要原因；HBVDNA阳性、HBeAg阴性标本多为野生型毒株感染，只是由于形成了HBeAg／IC使常规ELISA检测不出HBeAg。
HBV DNA与preS1抗原均阳性患者HBeAg阴性的原因探讨
日期：日 - 来自[]栏目
丁型肝炎病人肝组织HDVRNA与HBVDNA的表达及关系
免疫学杂志 2000年第3期第16卷 临床免疫学
作者：顾小红　李奇芬　王宇明
单位：顾小红（第三军医大学西南医院全军传染病专科中心，重庆 400038）；李奇芬（第三军医大学西南医院全军传染病专科中心，重庆 400038）；王宇明（第三军医大学西南医院全军传染病专科中心，重庆 400038）
关键词：丁型肝炎；丁型肝炎病毒抗原；丁型肝炎病毒核糖核酸；乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸
　　［摘　要］目的　探讨丁型肝炎病人肝组织中HDAg、HDVRNA与HBVDNA表达及关系。方法　应用免疫组化和原位杂交技术检测了79例丁型肝炎病人肝组织HDAg、HDVRAN、HBVDNA表达，以52例乙型肝炎病人肝组织HBVDNA表达作对照。结果　丁型肝炎HBVDNA检出率（27％）低于乙型肝炎（44％）（P＜0.05）。在坏死灶边缘肝细胞和气球样变肝细胞浆内有大量的HDVRNA蓄积或HDAg呈浆型强表达，HDAg与HDVRNA表达及分布呈一致性（P＞0.05）。HBVDNA与HDAg表达强度呈负性相关（P＜0.05）。结论　HDV感染会抑制HBV复制，尤其是HDAg或HDVRNA强表达时；在HDV致病机制中可能既有HDV的直接细胞毒性作用，也有HBV和HDV的协同作用。
　　［中图分类号］R512.64　　［文献标识码］A
　　［文章编号］（4-04
Study on the expression and relationship between HDVRNA and HBVDNA in liver tissue of the patients with hepatitis D
GU Xiao-hong，LI Qi-fen，WANG Yu-ming
　　（Infectious Disease Center Southwest Hospital，the Third Military Medical University，Chongqing 400038，China）
　　［Abstract］Objective To explore the expression and relationship of hepatitis D virus antigen （HDAg）／hepatitis delta virus ribonucleic acid（HDVRNA） and hepatitis B virus deoxyribonucleic acid（HBVDNA） in liver tissue of the patients with hepatitis D（HD）.Methods　HDAg，HDVRNA and HBVDNA in paraffin-embedded liver tissue from 79 liver biopsy or autopsy samples from the patients with HD were studied with immunohistochemical techniques and hybridization in situ，meanwhile，compared with the expression of HBVDNA in liver tissues of the patients with hepatitis B（HB）.Results　It showed that the detection rate of HBVDNA in liver specimens of HD（27％，21／79） was lower than that of hepatitis B（44％，23／52）（P＜0.05）.Strong expression of HDAg and HDVRNA were shown in the bollooning degeneration hepatocytes and hepatocyts near piecemeal necrosis region.HDAg expression was significently negative association with HBVDNA expression（P＜0.05）.Conclusion HDV infection can inhibit replication of HBVDNA，espcially at strong expressiong of HDAg or HDVRNA. Besides interactions between HBV and HDV，it is possible that direct cytotoxicity of HDV may play an important pathogenetic role in pathogenetic mechanisms of HDV.
　　［Key words］hepatitis D；hepatitis D virus antigen；hepatitis delta virus ribonucleic acid；hepatitis B virus deoxyribonuc-leic acid
　　丁型肝炎病毒（HDV）是一缺陷性RNA病毒，其病毒颗粒由乙型肝炎病毒（HBV）提供的HBsAg组成的外壳及HDAg和HDVRNA组成的核壳体构成。在丁型肝炎的发病机理中HDV和HBV的作用并不十分清楚，本研究采用免疫组化及原位杂交技术检测丁型肝炎病人肝组织HDAg、HDVRNA与HBVDNA表达及关系，以探讨HDV和HBV在丁型肝炎发病机理中的作用，现报道如下：
　　1　材料和方法
　　1.1　研究对象　所有患者均为我科年住院的急、慢性丁型肝炎患者共79例，其中急性肝炎（acute hepatitis，AHD）8例，轻度慢性肝炎（mild chronic hepatitis，Mild-CH）23例，中度慢性肝炎（moderate chronic hepatitis，Mode-CH）27例，重型肝炎（sever hepatitis，SH）21例（包括慢性重型肝炎8例，亚急性重型肝炎6例，急性重型肝炎1例，重度慢性肝炎6例）。同时以54例乙型肝炎作对照，其中AH9例，Mild-CH13例，Mode-CH　20例，SH12例（慢性重型肝炎2例，亚急性重症肝炎2例，慢性肝炎重度8例）。所有病例经血清或肝组织病理检查确诊，诊断标准以1995年《病毒性肝炎防治方案（试行）》为依据。
　　1.2　主要试剂及来源　免疫组化SP试剂盒为Maxim Biotech产品，购置福州迈新公司。地高辛标记HDVcDNA和HBVDNA探针原位杂交试剂盒购置华西医科大学附一院肝病研究室。丁型肝炎多克隆抗体由本科自行选定的HDV合成肽抗原经免疫家兔制备［1］，工作浓度1∶160。
　　1.3　操作方法及步骤　操作方法及步骤均按产品说明书进行操作。
　　1.4　对照　阳性对照为预试中HBVDNA阳性乙型肝炎肝组织切片和HDVRNA、HDAg阳性丁型肝炎肝组织切片。阴性对照选自正常人肝组织，其血清各型肝炎标志物均阴性，此外，分别用鼠血清和PBS代替第一抗体作为替代实验，每例切片先检测HDAg，然后进行原位杂交。
　　原位杂交均设如下对照：①除不加探针外，其余过程同原位杂交，结果为阴性；②切片在杂交前用RNase消化2h，37°C，杂交结果为阴性。
　　1.5　结果判断标准　HDVRNA、HBVDNA原位杂交结果判断：①阴性：肝组织无紫红-紫蓝色染色。②阳性：肝细胞胞浆和／或胞核呈紫红-紫蓝色染色。阳性程度分三级：低倍镜视野阳性细胞少于1／3为（＋），2／3为（＋＋），大于2／3为（＋＋＋）。
　　1.6　统计学处理　采用计数资料的χ2检验和秩相关分析。
　　2　结果
　　2.1　丁型肝炎患者肝组织中HDAg表达　HDAg分布于肝细胞浆和／或膜和／或核内，以核型表达为主，其次是胞浆型表达。阳性细胞呈弥散型、灶状或片簇状分布于肝小叶内，尤其在门脉周围、坏死灶处较密集。在坏死灶边缘和气球样变性的肝细胞浆内有大量的HDAg表达，还观察到HDAg阳性标记呈眉弓状分布在有病变的肝细胞膜下。中度慢性肝炎和重型肝炎组肝组织中，HDAg阳性细胞主要呈弥散型、片簇状分布于肝小叶内，在坏死灶处及其周围较多，有时可见HDAg阳性细胞以门脉为中心沿肝索分布整个肝小叶（见图1）。在急性肝炎和轻度慢性肝炎肝组织中，HDAg阳性细胞多呈单个或小灶状稀疏分布。秩相关分析发现重型肝炎和中度慢性肝炎HDAg表达强于急性肝炎和慢性肝炎轻度，且有统计学差别意义（见表1）。
图1　中度慢性丁型肝炎病人肝组织HDAg表达，SP×200
　　Fig1　Expression of HDAg in liver tissue of the patient with moderate chronic hepatitis D，（SP×200）
表1　各型丁型肝炎患者肝组织HDAg表达状况（％）
　　Tab1　The degree of HDAg expression in different types of hepatitis D
HDAg expression
　　ridit analysis SH and Model-CH，*P＜0.05，compared with AH2.2　丁型肝炎患者肝组织HDVRNA表达　丁型肝炎患者肝组织中HDVRNA检出率为76％（60／79），阳性颗粒可呈核型、浆型、及核浆型表达，以核型表达为主，阳性细胞分布可呈散在型、小灶状或片簇状分布于肝小叶周边，尤其是门脉周围和碎屑状坏死区。在坏死灶边缘肝细胞和气球样变肝细胞浆内有大量的HDVRNA蓄积（见图2）。秩相关分析重型肝炎和中度慢性肝炎HDVRNA表达强于急性肝炎和轻度慢性肝炎（P＜0.05），阳性细胞分布也较后两者多而密集（见表2）。
图2　慢性丁型肝炎病人肝组织HDVRNA表达，ISH×400
　　Fig2　Expression of HDVRNA in liver tissue of the patient with chronic hepatitis D，ISH×400
表2 各型丁型肝炎HDVRNA表达状况（％）
　　Tab2　Status of HDVRNA expression in different types of hepatitis D
Clinic type
Total（％）
　　ridit analysis SH and Mode-CH，P＜0.05，compared with AH2.3　HBVDNA在丁型肝炎患者肝组织表达　丁型肝炎患者肝组织HBVDNA阳性率为27％（21／79），HBVDNA阳性颗粒呈稀疏散在分布在肝细胞浆或核内，以细胞核内分布为主，着色浅淡（见图3），与HDAg表达强度呈负相关（P＜0.05）（见表3）；而对照组HBVDNA阳性率为44％（23／52），阳性颗粒主要密集分布于肝细胞浆内，有时可集中在细胞核周围，个别细胞核内亦可见少数浅染的阳性颗粒，着色较深，表明乙型肝炎组HBV复制活跃而且HBVDNA的基因拷贝数较多，两者比较有显著差别意义（P＜0.05）。
图3　慢性丁型肝炎病人肝组织HBVDNA表达，ISH×200
　　Fig3　Expression of HBVDNA in liver tissue of the patient with chronic hepatitis D，ISH×200
表3 79例丁型肝炎患者肝内HDAg表达强度与HBVDAN表达关系
　　Tab3　The relationship between HDAg expression and HBVDNA expression in liver tissues of the patients with 79 hepatitis D
HDAg expression
Positive rate（％）
　　χ2 test：χ2＝14.50，P＜0.05
　　3　讨论
　　普遍认为HDV感染相关性肝炎比HBV单独感染病情更严重、更易慢性化，其机理并不十分肯定。通过对HBV和HDV联合感染及重叠感染患者肝组织中HDAg和HDVRNA的表达研究，发现HDAg、HDVRNA均以肝细胞核型表达为主，其次是胞浆表达，阳性细胞呈弥散型、灶型、片簇状分布于肝小叶内，尤其是在门脉周围、坏死灶处及其附近较密集，在坏死灶边缘肝细胞和气球样变肝细胞浆内有大量的HDVRNA蓄积或HDAg呈浆型强阳性表达，提示有HDVRNA的活动性复制，大量HDV堆积在病变肝细胞内，可以直接损害肝细胞，还观察到HDAg阳性标记呈眉弓状分布在病变肝细胞膜下，这可能预示将有大量HDV从该细胞释放而感染邻近细胞。根据半定量分析可发现HDVRNA的表达基本上与HDAg表达一致。有研究发现，在HDAg血症期，HDVRNA的血清浓度与HDAg平行［2］，1986年SMEDILE等用核酸分子杂交技术检测了120例HDV感染者血清中HDV-RNA，结果58％（43／74）的慢性丁型肝炎患者为阳性，61％（17／28）的急性丁型肝炎患者为阳性，而8例急性丁型肝炎恢复期患者或抗-HD阳性的无症状HBsAg携带者均为阴性，提示HDVRNA的检测是判断HDV是否在体内复制及判断其传染性的重要手段。
　　HDV是一缺陷性病毒，HDV感染对HBV存在依赖关系，但慢性乙型肝炎重叠感染HDV会抑制HBV复制或HBcAg表达［5］，不少学者在HDV感染者血清中检测了各种HBV标记物的变化，甚至观察了血清和肝组织HBVDNA的含量（Southern　blot法）［4］，得出相同结果。本研究采用地高辛标记的HBVDNA探针在同一肝组织作HBVDNA原位杂交，结果发现丁型肝炎HBVDNA阳性检测率及表达强度均没有乙型肝炎组高；而且有报道丁型肝炎HBcAg主要呈核型表达，HBcAg阳性细胞数明显少于HDAg阳性细胞数，HDAg很少与HBcAg共存［5］；HBVDNA颗粒稀疏且着色较淡，表明HBVDNA基因拷贝数较少，甚至阴性，而且HBVDNA复制与HDAg表达强度呈负相关。在无HDV感染的乙型肝炎组中HBVDNA多为灶性分布，颗粒密集，且着色较深，表明HBVDNA基因拷贝数较多，这一结果证明了HDV感染有抑制HBV复制或表达的作用，特别是在HDV复制活跃的阶段，即HDAg大量表达时，HBV复制受到的抑制最为明显，当抗HD阳性时，HDAg表达较弱，HBV复制受到的抑制就较少，因此仍有HBVDNA被检出，此表明HBV复制的受抑制可能是一过性的，一旦HDAg转阴，HBV复制又重新开始。HDV感染时HBV的抑制状况，因HDV感染的不同阶段而异，这与RIZZETTO等在动物实验中观察的结果亦相一致［6］。虽然丁型肝炎HBVDNA颗粒稀疏且着色较淡，仍提示有HBV呈活动性复制状态，即HDV和HBV可以同时复制［7］，以提供HBsAg为HDV复制创造有利条件。提示在HDV的致病机制中，既有HDV对肝细胞的直接细胞毒性作用，也有HBV和HDV的协同作用。
　　［作者简介］顾小红（1968-），女，四川绵阳市人，主治医师，硕士，主要从事肝炎发病机理研究。现在第三军医大学大坪医院消化内科工作，重庆，400042。
　　［参考文献］
　　［1］郑红，李奇芬，林小红，等.人工合成丁型肝炎病毒抗原多肽片段的特征与临床应用［J］.中华医学杂志，3～275.
　　［2］DENNISTON KJ，HOYER BH，SMEDILE A，et al.Cloned fragmant of the hepatitis delta virus RNA genome：sequence and dignostic application［J］.Science，：873～875.
　　［3］RIZZETTO M.The delta agent［J］.Hepatology，9～737.
　　［4］HADZIYANNIS SJ.Liver disease activity and hepatitis B virus replication in chronic Delta antigen positive hepatitis B vrius carriers［J］.Hepatology， 4～547.
　　［5］RIZZTTO M，CANESE MG，ARICO O，et al.Immu-nofluorescence detection of a new antigen-antibody system（delta／anti-delta）associated to the hepatitis B virus in the liver and the serum of HBsAg carriers［J］.Gut，7～1003.
　　［6］RIZZETTO M.Treat of chronic Delta hepatitis with alpha-2-recombiant interferon［J］.J Hepatol，.
　　［7］THEILMANN L，GMELIN K，WILL H，et al.Detection of hepatitis B virus DNA in serum positive for antibody to Delta antigen［J］.J Infect Dis，：118～120.
［收稿日期］；［修回日期］
日期：日 - 来自[]栏目
检测HBVDNA/Ig-双特异性循环免疫复合物的免疫捕捉法PCR①
中国免疫学杂志 2000年第2期第16卷 免疫学技术与方法
作者：周裕林　彭宣宪　柳珑　肖军生　岑岭　杨天赐
单位：周裕林(厦门大学生物系厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室　厦门　361005)；彭宣宪(厦门大学生物系厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室　厦门　361005)； 柳　珑(厦门大学生物系厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室　厦门　361005)； 肖军生(厦门大学生物系厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室　厦门　361005)
关键词：免疫捕捉法PCR；循环免疫复合物；HBVDNA
　　摘　要：目的：建立一种免疫捕捉法PCR技术，研究血清免疫复合物中不同Ig类型抗体结合HBV的情况，并初步探讨其意义。方法：以羊抗人μ、γ、α链的IgG为捕捉抗体， 再利用PCR扩增捕捉物中的HBVDNA。结果：成功地建立了检测 HBV-DNA/IgM、IgG和IgA-TCIC的免疫捕捉法PCR技术。该技术特异性强、敏感性高、重复性好，可以显著提高HBVDNA的检出率。同时发现，结合HBV的抗体的Ig类型组合有明显差异，三者均阳性最高。结论：说明乙肝患者血清免疫复合物中有较多的病毒颗粒。研究HBVDNA/Ig-TCIC对乙肝发病机理的深入阐明可能具有重要意义。
　　分类号：R392-33
Immuno-capture PCR for HBVDNA/Ig-two-component-determined circulating immune complexes
ZHOU Yu-Lin
　　（Department of Biology,the Education Minister Key Laboratory for Cell Biology and Tumor Cell Engineering, Xiamen 361005）
　　PENG Xuan-Xian
　　（Department of Biology,the Education Minister Key Laboratory for Cell Biology and Tumor Cell Engineering, Xiamen 361005）
　　LIU Long
　　（Department of Biology,the Education Minister Key Laboratory for Cell Biology and Tumor Cell Engineering, Xiamen 361005）
　　Abstract：Objective: To establish an immuno-capture PCR for the study of classes of immunoglobulins complexed with HBV and of their significance.Methods:Using goat-IgG to human μ、γ、α chain as capture antibodies and prime-specific PCR as a detecting method.Results:An immuno-capture PCR had been established to detect HBVDNA/Ig-TCIC (HBVDNA/IgM-TCTC,HBVDNA/IgG-TCIC, HBVDNA/IgA-TCIC). This method was specific,sensitive and reproducible,by which more patients with positive HBVDNA could be found. It was also characted that there were significantly different positive rates among the types of combinations of IgM,IgG and IgA, in which the group with the three of them was hightest.Conclusion:These findings suggested that more HBV may be hide within circulating immune complexes and the study of HBV-DNA/Ig-TCIC may play an important role in more understanding of pathogenesis in patients with hepatitis B.
　　Key words：Immuno-capture PCR 　Circulating immune complex　 HBVDNA▲
　　按双特异性免疫复合物(TCIC)的新概念，病原体/Ig-TCIC与抗原/Ig-TCIC不同，前者含有核酸，后者可能不含遗传物质［1］ 。病原体是传染病的始动因子，故研究不同Ig类型抗体结合病原体的情况具有重要意义， 但目前少见报道。本文将免疫捕捉法和PCR技术有机地结合起来，以HBV为研究对象，成功地建立了检测 HBVDNA/Ig-TCIC ( HBVDNA/IgM、IgG和IgA-TCIC)的免疫捕捉法PCR技术，并对其意义进行了初步探讨。
　　1　材料与方法
　　1.1　研究对象　 乙肝血清标本共108例，采自厦门市中医院，临床诊断按北京会议修订标准进行。另取健康献血员血清标本15例和丙型肝炎血清标本5例分别作阴性和疾病对照。
　　1.2　实验材料　抗人IgM、IgG和IgA(依次为μ、γ、α链特异性)的羊IgG：卫生部上海生物制品研究所产品。HBV基因引物：根据HBVadr亚型pADR-1株基因，Sangon公司合成，经鉴定为电泳纯，正股 5'-TGTTCAAGCCTCCAAGCT-3'；负股 3'-AGTGCGAATCCACACTC-5'。PCR试剂盒(热变性法)：厦门泰伦生物公司产品。 限制性内切酶:Sau3A I promege产品。
　　1.3　HBVDNA/IgM、IgG和IgA-TCIC的检测
　　1.3.1　血清处理　参见文献［2］进行。简述如下：取血清用终浓度为3.5%的PEG沉淀2次，弃上清，沉淀用等血清体积的PBS溶解。
　　1.3.2　免疫捕捉　分别包被羊IgG抗人IgM、IgG和IgA (依次用于HBVDNA/IgM、IgG和IgA-TCIC的检测)7.5 μg/ml，每孔50　μl，4℃18　h，PBS-T洗涤3次；取上述沉淀溶解物40　μl加入反应孔，37℃1　h，同上洗涤6次；每管加入无菌双蒸水40 μl，于95℃变性20 min， 得变性液。
　　1.3.3　PCR扩增　10.buffer 5 μl、混合dNTP液(各10 mmol/L)1　μl、MgCl2 (25　mmol/L)4　μl、引物各15　pmol、1U Taq酶和变性液30　μl、补足水至50　μl反应体积。94℃变性1　min，55℃复性30　s，72℃延伸1　min，共循环35次，最后以72℃10　min结束循环。每批做阴阳性标本各3管。
　　1.4　热变性法检测全血清HBVDNA　 参见文献［3］进行，扩增条件同上。
　　2　结果
　　2.1　特异性考察
　　2.1.1　阻断试验　 随机取阳性血清5份，参照文献［4］进行。结果IgM和IgA组2例阳性和1例强阳性标本阻断后为阴性，另2例强阳性标本阻断后为弱阳性；IgG组阻断后只1例弱阳性，其余均为阴性。
　　2.1.2　中和试验　 取上述阻断试验用标本，参照文献［4］进行。结果3组均为2例阳性和1例强阳性标本中和后为阴性，另2例强阳性标本中和后为弱阳性。
　　2.1.3　替代试验　 对15例健康献血员和5例丙肝患者血清进行检测，结果所有健康献血员标本均为阴性，5例丙肝患者中有1例标本为HBVDNA/IgM和IgA-TCIC同时阳性。
　　2.1.4　重复性考察　 每批试验均同时做3例阳性和3例阴性标本，共做15批。所有45份阴性标本均为阴性；在45份阳性标本中，“++”为38次(84.4%)，其余7次在上下波动。
　　2.1.5　酶切鉴定　 随机取反应产物进行Sau3A I酶切，结果其片段与理论分析一致，见图1。
图1　PCR产物限制性酶切图谱
　　Fig.1　Restriction mapping and electrophorisis analysis of PCR production
　　Note:M. 1. 2.Sau3A　I cuts
表1　3类HBVDNA/Ig-TCIC 8种组合模式的检测结果
　　Tab. 1　Distribution of cases in eight models of HBVDNA/Ig-TCIC
　　IgM-TCIC
　　IgG-TCIC
　　IgA-TCIC
Note:P＜0.01
　　2.2　3种方法检测血清HBVDNA的比较　 随机取乙肝标本23例，同时用热变性PCR技术、PCR试剂盒和免疫捕捉法PCR技术检测，3种方法的阳性率依次为52.2%、56.5%和87.0%。χ2 检验表明，前两者间无明显差异，但均显著低于免疫捕捉法PCR的检出率。
　　2.3　乙肝3类HBVDNA/Ig-TCIC的检测结果　 108例乙肝的HBVDNA/IgM、IgG和IgA-TCIC阳性率依次为70.4%、56.5%和64.8%，相互间无明显差异。按3者阴阳性不同可以组合成8种模式。χ2 检验表明，全部模式间存在非常显著差异，其中3类均阳性组非常显著高于其它7种模式。HBVDNA/IgM-TCIC单阳性显著高于HBVDNA/IgG-TCIC单阳性，见表1。
　　3　讨论
　　本文先以羊抗人μ、γ、α链特异性的羊IgG包被反应板，分别用以捕捉特异性抗Dane颗粒的IgM、IgG和IgA类抗体，再利用PCR的强大扩增能力和引物特异性对捕捉物中的HBVDNA进行检测，从而建立了检测3种HBVDNA/ Ig-TCIC的免疫捕捉法PCR技术。实验证明，该法特异性强、敏感性高、重复性好。采用该法对108例乙肝临床标本进行检测，结果其 HBVDNA/IgM、IgG和IgA-TCIC阳性率依次为70.4%、56.5%和64.8%，相互间无明显差异。值得注意的是，HBVDNA/Ig-TCIC的反应模式差异非常显著，以3者均阳性最为多见，而以HBVDNA/IgG-TCIC单独性和3者均阴性较少见。这些结果提示，Ig的异质性在结合病原体中亦得到体现［5］。
　　为考察该阳性率的意义， 我们随机取23份血清标本同时按本文建立的PCR和市售PCR试剂盒(引物基本相同)进行全血清热变性检测，结果相互间无明显差异， 且均非常显著低于免疫捕捉法PCR的阳性率。这一结果说明，本免疫捕捉法所得的高阳性率可能是与抗体复合的病毒颗粒较多和免疫捕捉法PCR敏感较高的共同结果。
　　与由Sano创建，Ruzicka完善的免疫PCR技术不同［6，7］，本法并不是用人工偶联DNA作为扩增对象，而是扩增自然与抗体相结合的病原体DNA。本技术操作简单，材料易得，设备要求不高，可以扩展至对其它病原体/Ig-TCIC的检测。
　　HBV引物序列可从各功能区选择， 其中前-C/C区和前-X/X区因易变异和阳性率较高而最受重视［8，9］ 。本文考虑到对突变产物分析等后续工作及阳性率便于与市售试验盒比较这些因素，特选用前-C/C区附近的序列，其扩增片段为424 bp。我们亦考虑同时采用前-X/X区的引物， 进一步研究其意义。■
　　① 国家自然科学基金资助课题()
　　通讯作者：彭宣宪
　　作者简介：周裕林，男，26岁，硕士，现在厦门市妇幼保健院；
　　彭宣宪，男，43岁，教授，博士生导师，主要从事免疫生物学研究
　　作者单位：岑　岭(厦门大学生物系厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室　厦门　361005)； 杨天赐(厦门大学生物系厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室　厦； 门　361005)
　　参考文献：
　　［1］彭宣宪. 双特异性免疫复合物的研究进展. 上海免疫学杂志， ) :315
　　［2］彭宣宪， 高　静， 黄雪芳 et al. 脐血免疫复合物的检测及其意义. 中国公共卫生学报， ):187
　　［3］邵　力，巫协宁，徐　萍 et al.聚合酶链反应检测血清HBV-DNA方法的建立及实验条件分析. 中国免疫学杂志， ):58
　　［4］彭宣宪， 方　亮. 乙型肝炎患者血清中IgA类HBsAg特异性免疫复合物的初步研究. 中华微生物学和免疫学杂志， ):379
　　［5］彭宣宪，王三英，黄雪芳. 乙肝IgM和IgG-补体双特异性循环免疫复合物的意义. 病毒学报， ):224
　　［6］Sano T， Smith C L， Cantor C R.Immuno-PCR:very sensitive antigen detection by means of specific antibody-DNA conjugates. Science， ):120
　　［7］Ruzicka V， Marz W， Russ A et al. Immuno-PCR with a commercially avaliable avidin system. Science， ): 698
　　［8］姚　桢. 分子乙型病毒性肝炎相关病学. 北京:中国医药出版社，
　　［9］Hsia C C， Nakashima Y， Tabor E.Deletion mutants of the hepatitis B virus X gene in human hepatocellular carcinoma. Biochemical and Biophysical Research Communications， ):726
收稿日期：
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日期：日 - 来自[]栏目　　【摘要】 目的& 研究乙肝携带者尿液HBVDNA含量及传染性。 方法& 将无症状HBsAg携带者首次晨尿经4.5万转/min（200000×g）连续超离12h浓缩至100倍，用32PHBVDNA探针检测HBVDNA，测算尿液HBVDNA含量，电镜下观察乙肝病毒形态结构。 结果& 观察42例乙肝携带者，尿液检测HBVDNA阳性者14例，尿液HBVDNA阳性率为33.33%，尿液HB-VDNA含量最低值为35.50pg/ml，最高值为635.0pg/ml，95%的可信区间为13.42～590.13（pg/ml），HBVDNA平均含量为261.27pg/ml。电镜下看到管形及类Dane颗粒。 结论& 乙肝无症状携带者尿液检出HBVDNA、观察到Dane颗粒，表明其尿液具有传染性，是构成对社会人群潜在的危险因素，在乙型肝炎接触传播中具重要的流行病学意义。提示，日常生活密切接触可能是乙型肝炎又一重要的传播途径。&&&&&&&&&& 　　The HBVDNA content in urine and infective research of person who carries HBsAg but have not symptom&&&&& 　　Xi Zhaoyan，Hu Xingju，Liu Ling，et al.&&& 　　Shanxi Provincial Center for Disease Control and Prevention，Xian710054.&&& 　　【Abstract】 Objective Studying the viral person whose HBVDNA in urine and infective.Methods There is the morning for the first time of person who carries HBsAg but no symptom，the urine passes4.50，000is transfered to/divided（200000×g）and exceeded concentrating to100times from now to12hours in succession.Measure HB-VDNA with32PHBVDNA probe.Calculate the urine HBVDNA content.Observe the viral B-mode hepatitis virus'shape structure under the electric microscope.Results Observing42viral persons who carries hepatitis B，the urine measures of14cases the positive one of HBVDNA，the urine HBVDNA positive rate is33.33%，the minimum value of the urine HBVDNA content is35.50pg/ml，maximum value is635.0pg/ml，HBVDNA average content is261.27pg/ml，95%confidence range is13.42～590.13（pg/ml）.Seeing small and spherical shape and one kind of Dane particles under the electric microscope.Conclusion The viral hepatitis B who carries but no symptom to exam-ine out HBVDNA in urine，observe Dane particle，indicate its urine is infective，form the dangerous factor potential to the social crowd，possess important epidemiology meanings while propagating at the viral hepatitis B.Brief on:it may be another important spread way of viral hepatitis B that daily life is kept in close touch.&&& 　　【Key words】 urine carrier HBVDNA infective&&&&&& 　　病毒性肝炎已经成为严重的国际社会卫生问题，我国人群病毒性乙型肝炎感染率高达50%～60%，近年来，其中乙肝HBsAg阳性携带者在全国不少于一亿二千万人 ［1］ ，造成我国乙肝病毒感染率如此之高的因素目前尚不十分清楚。早期研究认为，乙型肝炎主要经输血、注射、针刺和母婴途径传播。但近年来通过流行病学调查及实验研究表明，有大量的人群并无输血、注射、针刺和母婴途径感染的历史。提示日常生活环境的接触传播可能是乙型肝炎的重要传播方式，然缺乏客观理论依据。国内外相继报道在乙型肝炎病人尿中查到乙型肝炎表面抗原（HBsAg） ［1，2］ 。彭氏曾对HBsAg携带者尿中HBsAg排出规律及流行病学意义进行初步研究 ［3］，为进一步确定尿液的传染性，阐明尿液污染物在乙型肝炎接触传播中的作用，我们采用32PHBVDNA分子杂交探针及电镜观察，对无症状HBsAg携带者尿中HBVDNA含量及传染性进行研究。&&& 　　1 研究内容和方法&&&& 　　1.1 对象及标本处理 选择一农村肝炎研究观察点，用SPRIA法筛选HBsAg阳性无症状携带者，用洁净广口瓶收集清晨首次全部尿液，加0.1%NaN 3 防腐。取经联苯胺隐血实验阴性尿液30ml，经5000转/min冷冻低速离心30min，取上清液12ml移至U.S.A Beckman L5-50B超速离心机，经4.5万转/min（200000×g）持续离心12h，沉淀物用0.12ml上清液悬浮将标本浓缩100倍，置-20℃冰箱备检。&&& 　　同时，静脉抽取血5ml分离血清置-20℃冰箱备检。用SPRIA法检测聚合人白蛋白受体（PHSA-Re）及HBVD-NA。&&& 　　1.2 HBVDNA检测&&& 　　1.2.1 HBVDN定性试验 采用32PHBVDNA探针进行斑点杂交。诊断试剂由北京大学肝病研究所提供，按照试剂盒说明要求进行试验。试剂比放射活性为1.2×10 8 cpm/μg。凡自显影斑点清晰、均匀致密者判为HBVDNA阳性。&&& 　　1.2.2 HBVDNA定量试验 将克隆HBVDNA含标准定量的醋酸纤维素滤膜（由北京大学肝病研究所提供，含2-1000pg/40μl）与待杂交样品滤膜一同置入杂交液内，实行予杂交、杂交，并制备放射免疫自显影，用波长492nm光密度计分别测定不同HBVDNA含量的自显影斑点，记录OD值，用半对数格纸绘成标准曲线（见图1）。根据待检样品OD值可直接从曲线中查出HBVDNA含量（pg/40μl），再换算成pg/ml单位含量。见图1。&　　图1 HBVDNA含量标准曲线（略）&&&& 　　1.3 电镜检查 取经4.5万转/min（200000×g）超速离心浓缩100倍并经32PHBVDNA探针检测阳性的尿液1滴直接加于电镜铜网上，干燥固定后经磷钨酸负染，在JKm-100cx Ⅱ型透射电子显微镜53000倍下观察。
　　2 结果&&&& 　　2.1 尿液HBVDNA检出情况 从42例无症状HBsAg携带者的血清中检出HBVDNA阳性32例，检出率76.19%。尿中检出HBVDNA阳性者14例，检出率33.33%。尿液HB-VDNA阳性者其聚合白蛋白受体（PHSA-Re）及血清HBVD-NA均为阳性，见图2。&　　图2 乙型肝炎HBsAg携带者尿液HBVDNA放免自显影照片（略）&&&& 　　2.2 尿液HBVDNA含量 检测14例尿液HBVDNA含量，其最低值为35.50pg/ml，最高值为635.0pg/ml，尿液HBVDNA平均含量为261.27pg/ml，较血清含量为低。见表1。&&&& 　　表1 乙肝HBsAg携带者血及尿中HBVDNA含量比较（略）&&&&&& 　　注:t=2.24，P&0.05&&&& 　　2.3 尿液电镜观察 对5份尿液HBVDNA阳性标本经直接电镜观察，有2份在电镜下查及小球形、管形及类Dane颗粒。见图3。&　　图3 电子显微镜下观察的乙肝病毒形态学照片小球形、管形、类丹氏颗粒&&& 　　3 讨论&&&& 　　我国属乙型肝炎感染的高流行区，人群乙肝感染率约为60%，地处内陆的陕西省人群感染率虽低于全国水准，然亦超过50% ［1］ 。人群乙型肝炎病毒如此之高的感染率，很难由过去公认的经血液、注射、针刺、母婴等传播途径予以解释。本研究旨在从分子生物学角度探讨借日常生活接触传播乙型肝炎的可能，特别是乙型肝炎携带者尿液的传染性。&&& 　　3.1 关于尿液HBVDNA 尿液属人体排泄物，对外环境污染较为广泛。近年，国内外学者相继报道在HBsAg阳性者尿液中查到HBsAg ［2～4］ ，提示通过HBsAg阳性尿液污染环境，借日常生活接触传播乙肝的可能性。但HBsAg系乙肝病毒（HBV）的外壳，因不含核糖核酸成分，故本身不具传染性。因此，要证实尿液传染性并评价其流行病学意义，尚需直接从尿液查到乙肝病毒复制所依赖的HBVDNA。&&& 　　1985年，非洲Dibisceglic氏等首次报道 ［5］ ，在6例HBsAg及HBeAg阳性携带者的尿液中查到1例HBVDNA阳性，该例血清HBVDNA为中等水平，DNA多聚酶浓度为267cpm。据此，本中心开始探索中国人群乙肝病毒携带者尿液HBVDNA动态及其传染性，在没有研究方法的情况下我们采用差速离心法将尿液浓缩100倍，用32PHBVDNA探针在42例携带者尿液中检出HBVDNA阳性14例，尿液HBVDNA阳性率高达33.33%。同时，尿液HBVDNA阳性者其聚合人血清白蛋白受体（PHSA-Re）及血清HBVDNA皆为阳性。表明在血清PHSA-Re和HBVDNA阳性的HBsAg携带者尿液中可排出HBVDNA。本次研究尿液中乙肝病毒HBVDNBA较高检出率的结果，直接提供了携带者尿液具有传染性的客观证据。&&& 　　3.2 关于尿液Dane颗粒 对HBVDNA阳性的尿液标本，在电子显微镜下直接观察到乙型肝炎病毒抗原:小球形、管形及类Dane颗粒，而Dane颗粒是乙型肝炎完整的病毒，具有完备的病毒核酸结构，是乙型肝炎具有病毒复制和传染性的根本性标志。同时，在外界环境中存活时间较长，一般消毒剂也不易被杀灭。当其污染环境，即可造成接触感染和传播乙型肝炎的可能。&&& 　　3.3 关于尿液HBVDNA含量及传播乙肝的程度 HBVD-NA是反映乙型肝炎病毒（HBV）复制状态及感染性的关键指标。西德著名肝炎专家Hubert EB氏指出 ［6］ :“血清中含0.01ng/ml（10pg/ml）的HBVDNA可使猩猩感染”。我们测定无症状HBsAg携带者中HBVDNA最低含量为35.50pg/ml，最高含量达635.0pg/ml，平均含量为261.27pg/ml，95%的可信区间为13.42～590.13（pg/ml）。虽较血清HBVDNA为低（血清平均含量为753.11pg/ml），但远高于猩猩感染剂量。根据乙肝病毒受染剂量测算，尿液HBVDNA含量的95%的可信区间值均大于可感染剂量，尤其是尿液HBVDNA平均含量达到可感染剂量的26倍之多。由此可见，乙肝病毒携带者尿液的传染性非同寻常，其可传染程度亦相当之高。&&& 　　美国学者研究认为:HBV携带者在传播HBV的流行病学方面占有中心位置，HBV可通过皮肤和黏膜途径传播，任何一个HBsAg阳性的人均有潜在的传染性 ［7］ 。据此，对于乙肝携带者尿液HBsAg阳性，特别是尿液HBVDNA阳性，无疑具有环境污染的感染性和广阔范围的传染性。&&& 　　以上研究表明:无症状HBsAg携带者的尿液具有传染性，是构成对社会人群潜在的危险因素，在病毒性乙型肝炎接触传播中具有十分重要的流行病学意义。日常生活接触传播可能是目前乙型肝炎继血液、母婴传播之外又一重要的传播途径。&&&&& 　　参考文献&&&& 　　1 戴志澄，祁国明.中国病毒性肝炎.北京:北京科学技术出版社，1997，39.&&& 　　2 Apostolov K.Australia antigen in urine.Lancet，4.&&& 　　3 蔡来舟.98份尿中HBsAg检测情况的报告.中华流行病学杂志，1986，（7）4:208.&& 　　4 彭有源.尿中HBsAg检出及流行病学意义的初步研究.中国公共卫生，）:90.&&& 　　5 Dibisceglic R.Detection of markers of hepatitis B virus infection in urine of chronie carriers.J Med Virol，.&&& 　　6 Huburt EB，乙型肝炎病毒分子生物学研究进展.赴河南讲学资料汇编，1985.&&& 　　7 防治病毒性肝炎的建议.（Recommendations for Protection Against Viral Hepatitis）美国医学会杂志中文版，）.&&&& 　　作者单位:710054陕西省疾病预防控制中心日期：日 - 来自[]栏目&&&&［药理作用及作用特点］　本品口服吸收后，经门静脉到达肝脏，然后&进入&肝细胞，在细胞内转换成活性三磷酸盐。本品的5’-三磷酸化合物低浓度时，能竞争性地&抑制D&HBV编码的DNA聚合酶，结合到新合成的HBV&DNA&中，这种结合使DNA链的延长终止，&从而抑制病毒DNA&的复制。 　　本品作用特点为：①&为纯左旋体(-)-对映体脱氧胞嘧啶类似物，与天然核苷&构型完&全相反，因此对人体细胞毒性较小；②&作用快：1～3周就可以见HBV&DNA&浓度下降，甚至&转阴，服药期间疗效好，能保持良好的转阴状态；服药12周，ALT复常率达60%；能显著改善&肝脏的炎症性病变，减少肝纤维化的进展，并使乙型肝炎e抗原(HBeAg)的血清转换率增加；&在进行长期治疗时耐受性良好；③&本品不抑制共价闭合环状DNA(cccDNA)，因此停药后易反&跳，故需长期服药；④&YMDD变异株产生是本品耐药的主要原因，据Ⅲ期临床研究显示，&用&本品治疗1年后，从14%～32%的病例中检测到YMDD变异株；⑤&费用较低，患者顺从性好。 　　［适应证］　用于乙型肝炎病毒复制的慢性乙型肝炎及艾滋病的辅助治疗。& 　　［用法与用量］　艾滋病：成人150&mg，po,bid,与齐多夫定合用(对于体重&不足50&kg&的成年人，4mg/kg,bid，直到最高剂量150mg)；慢性乙型肝炎：100mg/d，疗程&为12周。 　　［不良反应］　常见的有上呼吸道感染样症状，如头痛、恶心、身体不适、&腹痛和腹泻等。 　　［注意事项］　①&对本品过敏者禁用；②&对于肌酐清除率&30ml/min的患&者&，不建议使用本品；③&妊娠期间一般不应使用；④&与具有相同排泄机制的药物(如甲&氧苄啶)同时使用时，本品血药浓度可增加40%，无临床意义，但有肾脏功能损害的患者应注&意；⑤&目前尚无16岁以下患者的疗效和安全性资料；⑥&本品停药后，容易反跳，因此停药&期间，每月要复查血清ALT，如正常，则3个月要检测1次HBeAg或HBV&DNA，如果由阴性转&为阳性，则必须要重新开始新一轮治疗。 　　［临床疗效］　由北京友谊医院、北京地坛医院、中山医院科大学第三附属&医院&、上海第二医科大学仁济医院、上海市静安区中心医院等5个单位，比较安慰剂(99例)&和&贺普丁(293例)治疗HBeAg和HBV&DNA阳性的慢性乙肝病患者的临床疗效。服药方法为100mg/&d&，po,疗程12周。结果贺普丁组HBV&DNA&最终阴转率为78.5%，ALT&复常率为60.9%，均明显&优于安慰剂组(分别为11.1%和27.5%)；两组不良反应的发生率和程度无显著差别&。 　　香港中文大学威尔斯亲王医院为贺普丁做为期1年的研究，主要观察其对患者肝脏组织学的&作用。共358例，25或100mg/d。结果肝脏组织学改善率为59%～67%，恶化情况较少(7%～&10%)，HBV&DNA&阴转率&95%，ALT复常率为65%～72%；14%患者的HBV&DNA&发生&YMDD&位点&上的突变，但并未引起病情恶化。 　　［规格包装］　片剂：100mg,14片/盒 　　［参考价格］　零售价：266元/盒 　　［贮存条件］　遮光、密封、阴凉、干燥处保存；有效期2年 　　［生产厂家］　葛兰素威康英国行动有限公司 　　［批准文号］　国药准字X－& 日期：日 - 来自[]栏目共 1 页，当前第 1 页
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