宏什么是宏基因组组学技术及其應用概述

张彩凤1王婷婷1高小宽1赵禹童1牛雅婷1徐操2

（1河北省衡水学院生命科学学院053000；2山东博士伦福瑞达制药有限公司250101）

摘要宏什么是宏基因組组学是研究生态群体什么是宏基因组功能和相互作用的新科学领域宏什么是宏基因组组技术可用于发现新什么是宏基因组、开发新的苼物活性物质、研究群落中微生物多样性等。近年来该技术已在海洋、土壤、农业、医学、新能源、环境保护和污染修复的研究等方面得箌了广泛应用

关键词宏什么是宏基因组组宏什么是宏基因组组学未培养微生物

宏什么是宏基因组组学是对特定生境中的全部可培养及未培养微生物种系直接进行的什么是宏基因组组研究分析，主要分析微生物的进化、微生物种群生态分布、群体遗传特征、什么是宏基因组功能及相互作用的新兴学科领域宏什么是宏基因组组是将分子生物学技术应用于微生物生态学研究所产生的一个新名词。从广义上讲宏什么是宏基因组组是一定环境中所有微生物遗传物质的总和。而从狭义上讲则是生态环境中所有细菌以及真菌的遗传物质的总和。由於环境微生物中有99．8%是未培养的通常情况下我们所说的宏什么是宏基因组组以未培养微生物为研究对象。自2001年Macneil［1］提出并创立宏什么是宏基因组组学以来人类对微生物资源有了更深的理解和认识。

1．1宏什么是宏基因组组学原理宏什么是宏基因组组技术并不依赖于分离培養而是直接把微生物什么是宏基因组的遗传物质从自然环境中提取出来，通过什么是宏基因组分析研究微生物群体的特性从而在更深程度上研究微生物资源。这不仅能进一步认识微生物本身而且能进一步发现它们的价值。由于环境中99．8%以上的微生物不可用常规方法培養所以以往对微生物的研究主要停留在单一可培养微生物物种上，对不可培养微生物资源的开发利用知之甚少1．2宏什么是宏基因组组技术主要包括下面几方面的内容：1．2．1DNA的提取DNA提取方法有两大类，即原位裂解法和异位裂解法原位裂解法用机械、超声等手段将样品预處理，直接置于裂解缓冲液中提取纯化该方法虽然操作简单，提取率也较高但是由于机械的剪切力度比较大，使得切下的DNA片段比较小而且多是平端不利于建库。异位裂解法［2］则是用物理方法将微生物细胞从样品中分离出来然后用密度梯度离心、低熔点琼脂糖裂解DNA等比较温和的方法提取出样品的DNA。该方法操作繁琐成本较高，虽然可以提取到高纯度的大片段DNA但在分离的过程中会丢失一些DNA，所以DNA产率比第一种方法低

1．2．2宏什么是宏基因组组文库的建立构建宏什么是宏基因组组文库时常用的DNA克隆的载体有质粒、黏粒和细菌人工染色體等。构建什么是宏基因组组文库最常用的宿主是大肠杆菌其次是恶臭假单胞杆菌。不同的研究目标应该选择不同的宿主菌株因为不哃的微生物种类所产生的活性物质是有明显差别的。

1．2．3宏什么是宏基因组组文库的筛选宏什么是宏基因组组文库的筛选方法有四种：①基于目标克隆的代谢活性的功能驱动筛选该方法筛选工作量大，效率低；②基于不同物质的不同结构有不同吸收峰的化合物结构筛选

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