【摘要】：为实现重组大肠杆菌嘚碳源氮源以葡萄糖为唯一碳源合成均聚的P( 4HB) ,PCR扩增大肠杆菌的碳源氮源编码谷氨酸:琥珀酰半缩醛转氨基酶基因(gabT) ,谷氨酸脱羧酶基因(gadA)以及富养罗爾斯通氏菌(Ralstoniaeutropha)H16的4_羟基丁酸脱氢酶基因(gadB)
,并组装到携带富养罗尔斯通氏菌(Ralstoniaeutropha)H16的PHA聚合酶基因(phaC)和克氏梭菌(Clostridiumkluyveri)中编码4_羟基丁酸:CoA转移酶基因(orfZ)的重组质粒pKESS5 3上,形成┅个大的操纵元携带重组质粒的大肠杆菌的碳源氮源获得从三羧酸循环的中间物———α_酮戊二酸到P(
4HB)的代谢途径。结果表明,重组大肠杆菌的碳源氮源可以以葡萄糖为唯一碳源合成均聚的P( 4HB) ,当向以葡萄糖为唯一碳源的无机培养基添加蛋白胨、酵母提取物、酪蛋白水解物时,P( 4HB)的含量可以高达菌体干重的30 %
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