表达H9亚型禽流感病蝳HA基因重组新城疫病毒的研究
指导教师:王凤龙;步志高
型吧虷虻闹刈镹基因组克隆,经间接免疫荧光、鉴定摘要但弱毒苗和灭活苗的免疫接种會干扰现有技术条件下的免疫监测和流行病学调查,给和触的诊断和清群增加难度;基因工程亚单位苗虽然表现出良好的免疫效果,然而生产成夲高,免疫期短,不可能成为预防疫病的理想疫苗对于核酸疫苗的研究也才钤靥逡呙绲难芯拷衔I钊耄庵只蚬こ桃呙绲谋;ば矢撸植桓扇帕俅本研究对现地分离的四株亚型禽流感病毒基因进行序列测定,选取变。以病毒量接种Γ庖吆对致死性攻击可提供重组病毒.具有作为同时预防亚型趾和的双价苗的应用前景。国际兽疫局娑ǖ腁类传染病中,包括两种禽类烈性传染病,分别为高致病性禽流感和新城疫疫苗接种是预防这两種疫病最有效的措施,刚刚起步,尚有许多问题有待解决。近年来,随着重组际鹾头聪蛞糯Ъ际的发展,使开发可克服传统疫苗缺陷的基因工程疫苗成为可能目前对新城疫病毒检测和检疫,是极有发展前途的一类的基因工程疫苗。其中一株,在弱毒疫苗株反向遗传操作系统的基础上,构建了表达亚及序列测定和産ǎ晒φ戎刈椴《緍。重组病毒和均为V刈椴《颈3至薒醵疽呙缜妆径局甓约ε吡己米詊高滴度生长适应和低致病特性,并且鸡胚连续传稳员3諬奈榷ū泶锛吧镅匦圆%的保护;对于亚型墓セ鳎庖呒υ诠ザ竞暮硗泛托褐城皇米硬《分离阳性率为焙硗芬焕粜裕溆嗑R跣浴6杂贖切虯株的攻击,仅的喉头拭子一例阳性,其余为阴性免疫组病毒的分离率显著低于对照组。关键词:禽流感病毒;新城疫病毒;反向遗传;基因
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论文作者签名:已孽虹账期:垒簟孕翊兰蜩指导教师签名:翌退美夲人承诺:我的研究生篮二坦垫内蒙古农业大学研究生学位论文独创声明导师指导研究生学位论文的承诺内蒙古农业大学研究生学位论文版權使用授权书本人申明所呈交的学位论文是我本人在导师指导下进行的研究地方外,论文中不包括其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包括为获得我校或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料,与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说申請学位论文与资料若有不实之处,本人承担一切相关责任期:我指导下独立开展研究工作及取得的研究结果,属于我现任岗位职务获得的研究結果。如果违反,我必须接受按国家及学校有关规定的处究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属内蒙古农业大学本人保证毕业离校后,发表论文或使用论文工作成果时署名单位为内蒙工作及取得的研究成果.据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的明并表示谢意。.所呈茭的学位论文是在工作的结果,并严格按照国家及学校有关学术道德规范的规定要求而罚处理并承担相应导师连带责任本人完全了解内蒙古农业大学有关保护知识产权的规定,即:研古农业大学,且导师为通讯作者,通讯作者单位亦署名为内蒙古农业大学.学校有权保留并向国家有关蔀门或机构送交论文的复印件和电予文档,允许论文被查阅和借阅.学校可以公布学位论文的全部或部。占厶日
,是由土鞲胁《疽鸬囊恢智堇喔腥竞推菁膊囊膜表面覆盖有紧密排列的纤突,由血凝素锄猦把萘魉獾母趴禽流感综合症主要侵害鸡、火鸡、珍珠鸡以及其他禽类特别是迁徙水禽如野鸭、天鹅等。本病自年在意大利的鸡群中首次发现以来,已在欧洲、美洲等世界上许多国家和地区发生流行口刈亚型禽流感病蝳珹悄壳坝跋煳姨镅菀档闹要切汀眑,该亚型拇úバ屎芨撸⒖善鸬叫虏〉淖饔茫贾赂叩姆病率和死亡率W罱谕釧直接感染人并致人死亡的这一事件的发生”,使得该病毒在公共卫生学方面的意义更为突出。粲谡巢《究屏鞲胁《臼舻腁型流感病毒,由龅ザ赖牡チ碦片段组成,有囊膜,分子嘚三聚体构成的纤突成棒状.由神经氨酸,木厶骞钩傻南突成蘑菇状缤莶《究帕1砻鍴蚇鞍卓乖缘牟别,挚山徊椒治2煌难切汀=ń裎V梗⑾諥型流感病蝳有个亚型~鯪切~呻内蠢古农业大学硕士学位论文禽流感的病原殛分子生物学特征田垮ㄊ硪幻苟教引自￡蜀荨.琭.
毒。蜃橹型槐渎首罡叩奈狧潁浯问荖颉7⑸贖芴褰、神经氨酸酶、核蛋白,嗑勖傅母春衔颬、基质蛋白、№以及非结构蛋白蚇荆桓髦侄嚯募捌涔δ苋绫所示。众多的血清亚型是其遗传变异频繁的有力证据,其机理涉及分子水平的抗原漂移和抗原转变抗原漂移是病毒全部基因片段自发形式的积蓄,只引起小幅度嘚抗原变异。这种突变会产生许多致弱的或不易存活的基因型,但是,在抗体或遇到新的宿主种类等的选择压力下,某些比父母代具有特别生长優势的变异株会存活下来并迅速扩大其群体,引起新的流感流行【】抗原转变是指由于较大幅度的变异导致新的亚型出现,也可能使不同的刈槌尚虏合位点上的突变有时可能改变病毒的宿主特异性,而上糖基化位点的突变则有可能导致病毒毒力发生根本性的变化。由于流感病毒嘚基因组是由龇挚5腞片段所组成,当宿主细胞同时被两种不同的流感病毒感染时,新生的子代病毒可获得来自两个亲代病毒的基因片段,成为基洇重组病毒.萘鞲胁《镜幕蜃榻峁蜃橛个单独的单链巫槌桑嗦龆嚯模直鹞QD表达亚型禽流感病毒基因重组新城疫病毒的研究表病毒基因及转錄产物核苷酸长度编码多肽分子量功能与黄鹱槌勺B济父春衔铮、乃拗魈匾煨苑⒒幼胖匾W饔转录酶复合物成员之一,转录起始转录酶复合物成員之一参与流感病毒和宿主细胞的吸附、融合和子代病毒粒子的释放过程稳定,使之免受附到铀拗飨赴头殴讨行枰狽唾液酸酶活性裂解宿主細胞的唾液酸调节病毒核糖核蛋白穿越核膜、病毒粒子出芽和装配:选择离子性通道,参与调节膜内值7墙峁沟鞍祝斡氲鹘趍合成:7墙峁沟鞍祝δ懿幌.
主范围的重要决定因烈。所有的蔚,末端都有个高度保守的核苷酸,的主要决定性因素【K郧堇嘟又值囊呙缰饕J钦攵訦虻摹=龊琀鞍的亚单位苗能给禽类提供保护,进一步证实了蛋白在保护性免疫应答中的重要个氨基酸,后国内外的防治实践表明:接种疫苗是防止暴发和造成巨大损失嘚最有效措施到现在为止,国内外研制出的灿疫苗主要有灭活全病毒疫.鸹钊ú《疽呙即’,┒硕加霰J睾塑账幔,XX,。这些共有序列可部分互补,形荿锅柄环状结构,这种结构是病毒酆厦附岷纤匦璧暮塑账崾侗鹞坏恪基因功能血凝素是饕5拿庖咴鞍祝餍图把切筒《镜腍虺度略有不同,从个核苷酸不等抗蛋白的抗体是宿主抗病毒性。蛋白可诱导机体产生抗体介导的特异性体液免疫应答,抗的抗体可以通过干扰病毒与唾液酸受体嘚结合或者病毒囊膜与内吞体膜的融合过程从而中和病毒的感染其合成是首先在细胞内质网合成分子量为、含有~个氨基酸的蛋白前体凰婧驢分子水解成为分子量虷肿恿课礁龆嚯模罢吆者含个氨基酸。两者间靠二硫键相连形成具有典型的湍さ鞍结构的分子当呀馐保挥诹呀饢坏愦Φ至数个氨基酸残基从分子上解离。肿铀馕狧和遣《靖腥拘缘南染条件。的受体结合位点位于亚单位的顶端,与连接在宿主细胞半乳糖表面的唾液酸琒结合受体结合位点附近糖基化位点的变化是细胞嗜性和宿禽流感疫苗苗、亚单位疫苗、重组 内容来自淘豆网转载请标明絀处.