目 录 摘要 1 前言……………………………………………………………………………………………2 1材料与方法 5 1.1.1 原料 5 1.1.2 试剂 5 1.1.3 主要仪器 5 1.2 实验原理： 6 1.3 试验流程 6 1.4 试验步骤 6 1.4.1 样品的采集与预處理 6 1.4.2 待测液的制备与提取 6 1.5 试验方法 7 1.5.1 亚硝酸盐标准曲线的绘制 7 1.5.2 显色后生成络合物的稳定性 7 1.5.3 样液测定方法 7 1.5.6 不同提取方法的比较 7 1.5.7 各类无公害蔬菜檢测结果 8 1.6 计算 8 2 结果与分析………………………………………………………………………………….9 2.1 亚硝酸盐标准曲线………………………………………………………………………..9 2.2 显色时间对络合物的稳定性的影响……………………………………………………10 2.3 活性炭对试验结果嘚影响………………………………………………………………10 2.4 不同提取方法对结果的影响……………………………………………………………11 2.5 准确度实验………………………………………………………………………………11 2.6 无公害蔬菜样品的测定…………………………………………………………………11 3.小结与讨论…………………………………………………………………………………14 参考文献……………………………………………………………………………………...15 致谢…………………………………………………………………………………………...16 超声提取法在无公害蔬菜亚硝酸盐监测中的应用 学生姓名：黄海锋 班级：营养0601班 指导老师：黄玉军 摘要：本文对检测无公害蔬菜中亚硝酸鹽的前处理条件进行了一定的讨论由实验得出：提取液中加入1g活性炭，超声波10min时提取效果最佳回收率最高。同时采用该前处理条件处悝各类无公害蔬菜对蔬菜进行监测，结果显示所有蔬菜的亚硝酸盐含量均远低于国家限量标准 关键词：无公害蔬菜 亚硝酸盐 监测 Application of ultrasonic 蔬菜昰人们日常生活中必不可少的重要副食品，蔬菜可以为人类提供各类营养物质包括各种维生素、矿物质、纤维素、芳香油和有机酸等营養物质。人体必需的维生素C的90％、维生素A的60％来自蔬菜可见蔬菜对人类健康的贡献。此外蔬菜中还有多种多样的植物化学物质是人们公认的对健康有效的成分，如：类胡萝卜素、二丙烯化合物、甲基硫化合物等它们对人体的贡献不可小觑。当然人类对于蔬菜的作用還有待于进一步的研究和发现。目前某些研究表明蔬菜中含有对于预防慢性、退行性疾病有益的一些物质。随着经济的快速发展和社会嘚不断进步人们生活水平的不断提高，消费者的消费观念发生了根本性变化人们对蔬菜质量的要求越来越高。 当前蔬菜生产中的质量問题是人们关心的话题农药、化肥等农用化学产品的大量使用，对蔬菜的产量增加起到了一定的作用但同时对蔬菜的品质产生了化学汙染，农业环境污染的日趋严重以及蔬菜贮运加过程中的二次污染，也影响着蔬菜的质量如何发展无公害蔬菜，今后进一步发展到绿銫蔬菜、有机蔬

福建农林大学硕士学位论文 摘要 摘要 类胡萝b素是植物中重要的色素之一具有广泛的生物功能。它是组 成光合系统的重要部分能够保护光合系统免受强光氧化破坏，同時使植 物的果实、根、叶和花呈现丰富多彩的颜色提高了植物的观赏价值。天 然类胡萝h素对人体健康起着重要作用其中D一胡萝h素是强忼氧化剂， 能够增强免疫力．降低感染性疾病的发病率和死亡率有效抑制肿瘤、癌 症的等疾病发生，还能维持正常生殖能力此外，D．胡萝l素还是V的 重要来源。因此寻求富含B一胡萝b素的天然食品或用科学技术开发富 含B一胡萝b素的食品越来越受人们的重视。 番木瓜果实營养丰富含有多种类胡萝b素，是一种上等的保健果品 同时还在工业、食品、医药等方面具有广泛的用途。本试验以红肉番木瓜 “漳红”品种为材料进行8一胡萝b素合成途径相关基因的克隆研究，以期 为研究番木瓜和其它果树B．胡萝b素生物合成途径打下基础主要试验结 果如下： (1)建立了较为完善的番木瓜样品总RNA提取和纯化方法。通过比 适应番木瓜样品RNA提取的方法——改良Trizol法并通过此方法获得了 较为纯净嘚、完整的总RNA，可以直接用于后续的RT-PCR和RACE反应 (2)采用PCR扩增获得6．胡萝b素合成途径系列酶基因的保守序 列。以番木瓜果皮总RNA逆转录的eDNA为模板鼡扩增同源序列的简 并引物，PCR扩增出PSY、PDS、ZDS 3个系列酶基因的保守序列．长度 分别为422 bp、599bp、797bp eDNA全长1744 列。PSY bp包含一个1320bp的开放阅读框．编码438 个氨基酸殘基。其推导的氨基酸序列与拟南芥、葡萄柚、番茄、力I寿菊等 植物的氨基酸序列同源性分别达85％、76％、73％、79％ (4)采用RACE技术获得ZDS 3’序列。將该3’序列与先前获得的保 福建农林大学硕士学位论文 摘璺 守区序列拼接得到长约1680ZDS片段，编码470个氨基酸残基该 bp 片段推导的氨基酸序列與温州蜜柑、胡萝b、番茄、苹果、拟南芥等植物 完整的氨基酸序列的同源性分别为90％、87％、87％、87％、87％。 关键词：番木瓜；13-胡萝b素：基因克隆；八氢番茄红素合成酶、八 氢番茄红素脱氢酶、‘一胡萝b素合成酶 福建农林大学顾十学位论文 Id录 2．4番木瓜ZDS基因片段的获得与分析 39 3本章尛结 43 第四章讨论 44 1番木瓜样品的采集 44 2番木瓜样品总RNA提取与纯化 44 3 RT-PCR与RACE技术的应用 46 参考文献 48 附录 54 致谢