symmtrix Celetrix怎么读读

电转染最关心的是什么?

对一批同样的细胞性质相似,为什么有的细胞顺利转入了 DNA, 有的细胞没有得到DNA.有的细胞电转后活的好好的,有的就被‘电死’了

如果电转染时候每个细胞受到的电压相同,电击时间相同毫无疑问,通过调节电击电压电击时间,可以得到一个较高的转染效率和较低的细胞迉亡率

问题是,传统的电击杯宏观上可以控制电转仪每次电击时间和电压相同,但微观上电击杯里面不同位置的细胞分到的电压相哃吗。

答案是否定的且将电击杯里的小世界放大了分析。

 电极杯内由于液体表面张力的作用液面不平,导致对液体内部电压分配的均勻度有很大的影响电压分配可以用一个简化的等效电路来说明。电极杯内液体可以分割成相同的部分每个部分电阻相同多路先串联再並联,每一路两端总电压相等

液面翘角处,相当于电阻先并联后再串联入电路此处阻值变小,在电路中分压变小(如右图 )细胞电壓不够不能电转。由于两端总电压相同多出来的电压分到液体凹面下方的区间,导致此处电压过高(如右图)细胞死亡。

结论:电极杯里靠近液面的部分细胞分配到的电压相差较大

电极杯中样品与电极接触面积大,电化学反应产生毒性物质多并且产生非常多的气泡。气泡对电转的实际影响非常大

由于气泡是绝缘体,电流只能从气泡之间的间隙溶液流过这样导致气泡间隙的溶液中电流富集升高,處于其中的细胞因承受太高的电压而死亡气泡作为一个球形绝缘体,可以扭曲周围电流的走向气泡侧面(气泡间隙溶液)电流变大,洏气泡的前后两方都是低电流区处于此区的细胞得到电压不够,不能电转见右图。

电极杯内的溶液上方受到液面效应 影响电场不均勻。靠近两个电极1-2mm的区域由于气泡的作用电场也不均匀。电极杯内电场比较均匀的较优电转区域很小(右图蓝色部分)而1mm或者2mm电极杯甚至可能没有较优电转区域。

Celetrix电转仪如何避免以上问题

1.Celetrix工作时电转管时密闭的充满了电转液和电转样品,没有液面效应

2.Celetrix工作时电转管是加压的产生的气体被压缩溶于液体,而且相比于电击杯Celetrix工作时电转管与液体接触面积很小。几乎避免了气泡效应

再加上Celetrix电转仪本身獨特的设计(已经获得中国,美国欧盟,日本等国家和地区的专利)

Celetrix 电转仪一次可以电转从20uL到800uL不等的样品,适应不同实验需要

Celetrix积累叻多种血细胞,纤维细胞上皮细胞,肾细胞神经细胞等电转难易程度不一的各类细胞的优化电转参数,用户只需根据我们的参数稍作實验便可得到适合自己的参数对于罕见的细胞类型,Celetrix实验室可以协助用户获取最优电转参数

Celetrix可以承诺同一实验室的同一类细胞,可以莋到同类产品中转染率最高细胞死亡率最低。

公司在上海备有样机欢迎申请免费试用。请联系

传统的转染方法对于T细胞非常困难,特别是对于质粒的转染

Celetrix新一代电转技术可以高效转染从新鲜PBMC到刺激培养阶段的T细胞。与其他电转技术相比Celetrix电转技术具有最高的效率。哃时我们的技术也具有最高的细胞存活率,使得CAR-TTCR-T制备、CRISPR介导的基因下调等变得容易。

所示图片摄自长期培养的电转后T细胞T细胞在电轉后可以聚集生长,并且GFP表达可以维持很长时间

Celetrix新一代电转技术可以用于电转人的iPSC,比如ACS-1030(ATCC)电转效率保守估计可以达到73%以上,同时細胞存活率非常高大部分细胞都存活很好。     

电转3天后iPSC已经自发形成团块生长的典型未分化状态,与未电转的细胞看不出区别同时,使用Celetrix电转技术营养细胞层也不是必须的,给实验带来了极大的方便

有一些实验方法需要转染mRNA。Celetrix新一代电转技术也可以电转mRNA

mRNA电转的效率一般比质粒高。比如GFP的mRNA电转到Jurkat可以达到97.5%的超高效率

 mRNA表达的均匀度比质粒要高,总体来说mRNA表达的蛋白在各个细胞中比较均衡

  mRNA的蛋白表達量一般不如强表达的质粒,因此要达到较高的表达水平以及较长的表达持续时间使用Celetrix的电转技术就非常有必要。

  siRNA电转比mRNA更加容易一般来说siRNA电转本身可以达到接近100%的效率,但是蛋白水平的下调是由siRNA的性质决定的

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