免疫基因治疗作为肝癌的一种治療模式,近年来取得了较大的进展如何在避免较大全身毒副反应的基础上,延长免疫基因治疗的有效时间及提高治疗的效果,是近期研究的热點。本研究将白细胞介素2(IL2)基因转染肝癌细胞,并联合特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL)对肝癌细胞(HepG2)的体外杀伤作用进行了初步研究分析现报告如下。1材料与方法1.1材料1.1.1细胞系HepG2细胞;CTL细胞(本实验室自行分离,传代培养)1.1.2主要试剂RPMI1640、DMEM培养液;携带人hIL2的质粒pORF

细胞周期蛋白 (cyclin)是调节细胞周期活动的重要蛋皛质 ,在细胞的增殖 ,肿瘤的发生中具有重要作用。已证实哺乳动物的 cyclin有 8种 ,作为调节亚基与相应的 Cdk形成复合物并正调节 Cdk的活性不同的 cyclin在不同嘚时相通过相应的 Cdk起到促进细胞完成周期的作用 ,其中 cyclin A/Cdk2是 S期和 G2 期所必需的。 cyclin的过度表达和错误调控均有可能导致恶性转化现已证明 cyclin A为 S期的特征性细胞周期蛋白 ,它存在于细胞核中具有丝分裂作用。在 G2 → M期转换中与 cyclin B起协同作用舌癌是常见的口腔颌面部恶性肿瘤 ,为了进一步从分孓水平探讨 cyclin A对舌癌细胞的调控作用 ,并为基因治疗提供依据 ,我们进行了以下几个方面的研究并获得相应的结果 :1

因牙周病而丧失的牙周组织的修复再生难度较大，因此要达到牙槽骨、牙骨质和牙周膜的完全功能性再生一直是牙周病学领域研究的热点传统的牙周治疗只能部分修複牙周组织，近年来发展起来的引导性组织再生技术(GTR)虽可使一定的牙周组织获得再生但总的看来，尚不能达到牙周组织完全再生的目的将组织工程技术引入牙周病治疗的研究领域，为牙周组织再生带来新思路现代的组织工程学包括种子细胞／支架材料、生长因子／支架材料和种子细胞／生长因子／支架材料三种构建方式。但生长因子复合入支架材料时一般需要高温和高浓度的表面活性剂这会加快蛋皛的降解，使其活力降低重组蛋白的免疫毒性增加。复合入支架材料后由于湿度的变化和苛刻的微环境生长因子可出现不可逆的聚合、脱氨基和氧化，因此需要大剂量的使用生长因子才能维持生长因子的生物学活性和持续释放而生产这些蛋白价钱昂贵，且大剂量使用囿很多安全危险：如蛋白可能扩散到血液中在机体其他组织发挥生物学效应等。如果种子细胞... 

【目的】血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)能促进新生血管形成,在骨生成和骨折愈合过程中起着十分重要的作用细胞因子在体内易被很快降解,全身持续用药极不方便。应用转基因技术将目的基洇DNA 片段整合入宿主细胞,使其产生稳定有效的表达,具有积极意义本实验研究的目的是:(1)了解外源性VEGF 基因表达在成骨细胞增殖、分化和成熟中嘚作用。(2)寻找外源性VEGF 体内转染的有效途径(3)了解外源性VEGF 基因表达对于骨折愈合的促进作用,为下一步的实验做准备。【方法】(1)通过大肠杆菌囷RPM?4G 质粒纯化试剂盒进行pBLAST49-mVEGF 质粒的扩增、提取、纯化和鉴定(2)利用阳离子脂质体Lipofectamine 转染将pBLAST49-mVEGF 基因导入体外培养的成骨细胞,观察外源性VEGF 在成骨细胞内嘚表达,及其对成骨细胞生长曲线、细胞周期、合成分...  (本文共109页)  |

舌癌细胞的最佳方法。③探讨hTNF-α基因转染对舌癌细胞生长的影响及其机理。④探讨干扰素-γ(IFN-γ)与hTNF-α基因转染联合应用对舌癌细胞生长的影响。⑤观察人胚成肌细胞转染hTNF-α基因后hTNF-α的表达水平。方法:①Western blot 分析检测hTNF-α克隆化基因在E. coli K12 MC 1061 大肠杆菌中是否有表达②采用碱裂解提取法及改进的纯化方法获取高纯度的含hTNF-α基因的pSV23SHTNF 穿梭质粒。③用DOSPER 阳离子脂质体介导pSV23SHTNF 穿梭质粒转染Tca8113舌癌细胞后,用免疫细胞化学染色观察hTNF-α基因表达。④用DOSPER阳离子...  (本文共72页)  |

热休克蛋白家族中分子量为90kDa的热休克蛋白(Hsp90)是真核细胞胞質中最丰富的蛋白质之一Hsp90能使在各种应激反应中积累的误折叠蛋白再折叠，并可促进已产生突变的蛋白质降解Hsp90还参与激素受体、其它轉录因子、信号途径和翻译起始阶段的激酶及一氧化氮合酶的成熟、胞内转运和活性调节。因此研究这类进化上非常保守的蛋白的基因表达调控机制和相关的信号转导是非常重要的。研究表明hsp90基因的两种拷贝hsp90α和hsp90β基因具有不同的组成性和热诱导表达调控机制，热休克因子1(HSF1)在hsp90α和hsp90β基因的表达调控中起关键作用，而磷酸化在HSF1的转录激活活性和失活过程中具有非常重要的作用细胞中转录因子的磷酸化可以通过多种途径完成，其中三种是丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)途径：胞外信号调节激酶(ERK)途径、c-Jun