做脾脏襄肿90*73mm需手术吗手术需全麻醉吗?


北京协和医学院中国医学科学院博士学位论文

10023 B2008153


半相合肿瘤特异性淋巴细胞过继免疫治疗肿瘤的小鼠 模型研究

the adoptive immunotherapy of cancer in

mouse model by semi--allogeneic tumor specific lymphocytes

新型溶瘤病毒oHSV2hG陋csF的构建及其抗肿瘤作用


Construction of a novel oncolytic virus oH SV2的McsF

and its anti..tumor effects

指导教师: 导师小组:

张叔囚 张友会研究员 免疫学


201 1.04.20

学科专业: 研究方向: 完成日期:

半相合肿瘤特异性淋巴细胞过继免疫治疗肿瘤的小鼠模型研究……………………………3 英文缩写注解……………………………………………………………………………….3 中文摘要…………………………………………………………………………………5 英文摘要………………………………………………………………………………..7 前 言…………………………………………………………………………………………………………………9 实验材料……………………………………………………………………………….14 实验方法………………………………………………………………………………。l 7


结 果………………………………………………………………………………………………………………..29

论………………………………………………………………………………………………………………..z16 论………………………………………………………………………………………………………………..5:!

参考文献…………………………………………………………………………………53 文献综述…………………………………………………………………………………。62 参考文献……………………………………………………………………………………70

第二部分…………………………………………………………………………………74 噺型溶瘤病毒oHSV2cM蟠F的构建及抗肿瘤作用…………………………………………74


英文缩写注解………………………………………………………………………………74 中文摘要……………………………………………………………………………….76 英文摘要………………………………………………………………………………77 前 言…………………………………………………………………………………………………………………79 实验材料………………………………………………………………………………80 实验方法………………………………………………………………………………82 结果………………………………………………………………………………………。92 讨论……………………………………………………………………………………………………………………98 结論……………………………………………………………………………………1 oo 参考文献………………………………………………………………………………….101 文献综述………………………………………………………………………………102 参考文献………………………………………………………………………………….1 06

致谢……………………………………………………………………………………………………………..1 08 资金资助……………………………………………………………………………….1 09 独创性聲明…………………………………………………………………………….110 个人简历………………………………………………………………………………..11 l

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图表索引 第一部分 半相合肿瘤特异性淋巴细胞过继免疫治疗腫瘤的小 鼠模型研究

混合白细胞培养……………………………………………………………20 混合淋巴细胞肿瘤细胞细胞培养…………………………………………2l

肿瘤细胞HLA主要表型…………………………………………………63 DC形态及MHC.II和CD80分子的流式检测………………………….30 图3 体外扩增抗原特异性T细胞活性检测………………………………….3 1 图4 灭活嘚半相合TP.DC.TC回输治疗TC.1荷瘤鼠的抗肿瘤效果………32 图7 肿瘤抗原特异性半相合小鼠脾细胞治疗实验肺图片…………………一34 图8 比较不同剂量、灭活与非灭活的肿瘤抗原特异性半相合小鼠脾过继免疫 治疗对人工肺转移荷瘤鼠的疗效影响……………………………………35 图9 比较不同剂量、灭活与非灭活的肿瘤抗原特异性半相合小鼠脾过继免疫 治疗对荷瘤鼠生存期的影响……………………………………………~36 图10 MMC灭活半相合小鼠脾细胞治疗实验…………………………………37 图1 1 MMC灭活半相合小鼠脾细胞治疗效果观察……………………………38 图13肿瘤特异性半相合脾细胞回输治疗人工肺转移小鼠外周血血浆细胞洇 子浓度检测………………………………………………………………一40 图14肿瘤特异性半相合脾细胞回输治疗人工肺转移小鼠外周血和脾细胞淋巴 细胞亚群的变化…………………………………………………………一42 图15肿瘤微环境浸润淋巴细胞检测……………………………………………43 图16小鼠淋巴细胞H.2表型检测……………………………………………一44 图17肿瘤抗原特异性半相合脾细胞回输治疗人工肺转移小鼠主要器官病理 变化观察…………………………………………………………………一45

第二部分新型溶瘤病毒oHSV2hG地c8F的构建及抗肿瘤作用


表1 PCR扩增ICP47基因上下游侧翼区域(Flanking Region,简称FLR)所 用引物序列…………………………………………………………………..86 表2 PCR扩增ICP34.5基因上丅游侧翼区域(Flanking Regiom简称FLR)所 用引物序列…………………………………………………………………86
表3 图1 图2 图3 图4 图5 图7 图8

验证新构建的oHSV2hGM.CSF

PCR引物序列……………………….86

DNA同源重组技术构建重组病毒示意图……………………………….86 I和II型溶瘤性单纯疱疹病毒示意图……………………………………87 ICP34.5和ICP47基因剔除及插入hGM.CSF基因的位置……………..87 倍比稀释病毒原液图解……………………………………………………88 ICP34.5和ICP47基因剔除及插入hGM.CSF基因的鉴定……………92 B1 6R稳定转染細胞感染oHSV2研P绿色荧光表达………………………93

hGMcsF和oHSV2删csF感染细胞24h的细胞病变……………95

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oHSVlh‘撇csF和oHSV2mM-csF感染细胞48h后的细胞病变…………~96 oHSVl砌订c8F和oHSV2hGMcsF感染细胞后合胞体的形成……………97 oHSVlhGMcsF和oHS、唿hGMcsF瘤内治疗的溶瘤效果比较……………97

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第一部分 半相合肿瘤特异性淋巴细胞过继免疫治疗肿瘤的小鼠模型研究

英文缩写注解(Alphabatic)


GVHD FBS PBS

英文全称 Major Histocompatibility Complex


Gratt Versus Host Disease
Fetal Bovine Serum

中文铨称 主要组织相容性复合体 移植物抗宿主病 胎牛血清 磷酸缓冲液 细胞毒性T淋巴细胞 白细胞介素

Phosphate Buffer Solution


Cytotoxic T Lymphocyte

Interleukine Complete Medium


FITC PE ELISA

完全培养基 异硫氰酸荧光素 藻红蛋白 酶联免疫吸附试验 丝裂霉素C

Fluorescent Isothiocyanate Phycoerythrin

Enzyme Linked Immunosorbent Assay


ELISPOT HLA Ag GVT TNF.cL Treg

Enzyme-linked Immunosorbent


Human Leukocyte Antigen

酶联免疫斑点技术 人類白细胞抗原 抗原 移植物抗肿瘤 肿瘤坏死因子.a 调节性T细胞 干扰素吖


Graft Versus Tumor Tumor Necrosis Factor-a
Regulatory T cell

Interferon-1/

Myeloid derived

suppressor cells

髓样抑制性细胞 分化群 T细胞受体 活化诱导的细胞死亡 活化的T细胞自发死亡 吲哚胺2,3双加氧酶

Cluster of Differentiation T Cell Receptor Activation

Induced Cell Death

Activated T-cell Autonomous Death


Indoleamine 23一dioxygenase

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Human Immunodeficiency Virus
Biologic Response Modifiers Human Lcukocyte Antigen

中文全称 人类免疫缺陷病毒 生物反应调节剂 人类白细胞抗原 肿瘤相关抗原 肿瘤特异抗原 血管内皮生长因子 转化生长因子B 抗体依赖的细胞介导的细 胞毒 自然杀伤细胞 抗原提呈细胞 低分子量多肽 抗原肽转运体 卡介苗 免疫受体酪氨酸抑制基序 程序性死亡.1

Antigen Tumor Specific Antigen


Tumor Associated Vascular Endothclial Growth Factor

Transforming Growth Factor-13

Antibody Dependent Cell―Mediated


Cytotoxicity Nature Killer

Antigen Presenting Cell


Low Molecular wcight Polypeptide Trar选porter of

Antigen P印tide

Bacille Calmette.Guerin

Immunorecepror Tyrosine-based Inhibition Motifs

Cytotoxic T-Lymphocyte Dendritic Cells

杀伤性T细胞抗原_4 树突状细胞 抗原沖击的树突细胞

Tumor-pulsed DC


Tumor-pulsed

Ag-specific T

树突细胞诱导的抗原特异 性T细胞 磷酸肌醇3激酶 混合淋巴细胞培养 混合淋巴细胞肿瘤细胞培 养 肿瘤浸润淋巴细胞

Phosphoinositide 3-ldnases

Mixed Mixed

Lymphocytes Culture

Lymphocyte-Tumor Cell Culture

Tumor Infiltrating Lymphocytes

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研究背景生物治疗已经成为继手术、放療、化疗后的第4种抗癌疗法。其中细胞 过继免疫治疗是肿瘤的生物治疗的主要手段之一治疗所采用的细胞通常来源于患 者自体细胞。甴于肿瘤患者一般处于免疫低功状态有些患者很难诱导出较强的和 足量的抗肿瘤免疫活性细胞。若采用MHC完全匹配的供者免疫细胞莋过继免疫治 疗比较理想但供者难求。如采用MHC不相合异体免疫细胞可能会产生移植物抗 宿主反应也无法诱导针对宿主肿瘤特异性的细胞毒性T细胞(CTL)。而父母和 子女之间半相合的供者较易寻找供者免疫细胞有可能通过与患者MHC相合部分 诱导产生肿瘤抗原特异性CTL;而不相合部分产生免疫佐剂效应。但应用半相合CTL 进行过继免疫治疗尚缺乏深入研究 目的研究MHC半相合腫瘤特异性CTL过继免疫治疗肿瘤的效应和机制。探索细 胞过继免疫治疗肿瘤的新途径 方法应用TC.1肿瘤细胞裂解物冲击C57BL/6与Balb/C的杂交一代(F1)小鼠骨 髓来源的树突细胞(TP-DC),再与小鼠脾细胞混合培养诱导肿瘤特异性CTL (TP.DC-TC);C57BL/6(C57)荷瘤鼠以TC.1肿瘤细胞的皮下成瘤为动物治疗模 型,当肿瘤直径约为5毫米时经尾静脉回输丝裂霉素C灭活TP.DC.TC予以治疗。 或用丝裂霉素C灭活的C57小鼠来源的TC.1肿瘤细胞直接免疫F1小鼠获得肿瘤 特异性CTL进而将CTL经丝裂霉素C灭活后经尾静脉输入C57小鼠TC.1肿瘤 细胞人工肺转移模型。两个动物模型汾别治疗3次每次间隔5"7天,观察肿瘤 大小和生存期人工肺转移模型的小鼠末次治疗后5天,眼眶采血用ELISA检测 血浆IL.2、IL.10、IFN吖、TGF.B水平;用流式细胞术检测脾细胞和外周血细胞中 CD3+CD4+T、CD3+CD8+T、Treg、MDSC、NK等免疫细胞亚群的变化和宿主免疫 效应细胞的H.2表型。组织切片检测半相合CTL治疗对心、肝、肾、脾的影响 结果ELISPOT结果显示体外或体内均可诱导半相合肿瘤特异性CTL。应用该细胞 治疗皮下荷TC.1肿瘤的C57尛鼠其肿瘤生长速度减缓,生存延长在人工肺转 移C57小鼠模型中与同系小鼠CTL过继免疫治疗相比,灭活半相合CTL免疫治療 后小鼠肺表面肿瘤结节数量明显减少小鼠的生存期显著延长。半相合CTL治疗显 著上调了Thl细胞因子IL.2和IFN吖的分泌并下调免疫抑制因子TGF.B和II_,-10 产生流式仪检测证明:半相合CTL治疗后CD4+T、CD8+T和NK细胞茬外周血 和脾细胞中的比例明显增高;并且诱导了宿主自身肿瘤特异性CTL和NK细胞。而 Treg、MDSC细胞亚群的比例显著下降:流式检测宿主免疫细胞的H.2表型结果发 现上述免疫细胞均源于宿主自身。HE染色证实接受半相合CTL治疗小鼠的心、 肝、肾、脾的无明显的病理变化。

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结论灭活半相合肿瘤特异性CTL过继免疫治疗既可特异性杀伤肿瘤, 抗肿瘤免疫起到佐剂效应该疗法不失为一种简单、安全有效的抗肿瘤疗法。 关键词MHC半相合;细胞过继免疫治疗;细胞毒性T淋巴细胞;肿瘤

the adoptive immunotherapy of cancer in mouse

model by semi--allogeneic tumor specific lymphocytes

Biotherapy of

malignant diseases has become the fourth treatment

modality besides surgerytheme-and radiotherapy and the adoptive immune

cells(AlCs)infusion


from the cancer

of the important

for biotherapy.AICs

often d耐ved

autologous immune cells which

do little in combating tumor healthy donor、Ⅳim

cells due to the defected immune function of the

CanCer patient.A

identical MHC

would be ideal but it is very difficult to find such


to be able to induce not

donor.The allologous


CTLs but strong

been demonstrated

tumor-specific

anti-host reaction(GaSR).On

been proposed

semi―allogeneic AICs may break the tumor immune

tlleir allogeneic part to function

powerful adjuvant

ignorance to some degree

t11eir autologous

induce the MHC―restricted tumor-specific

CTLs.So far,only semi―allogeneic

CTL adoptive immunotherapy for the

treatment of hematopoietic malignancies


CTL adoptive

reported.Thereforethe semi-allogeneic


and more specific tumor targeting and

immunotherapy丽m

less toxicity

be studied.

study Was aimed at investigating the

anti-tumor efficacy antigens

transfused tumor

specific T cells witll the surface semi-allogeneic

and to explore

adoptive immunotherapy of cancer.

In order to produce the tumor-antigen specific semi-allogeneic lymphocytes,

the 1St-generation hybrid mice named F1(TOSS(H.2b'd)were bred by cross.mating C57BL/6 and Balb/c mice.The F1 tumor lysate―pulsed dendritic

cells(TP―DC)and

antigen specific CTLs(TP―DC-TCs)were prepared in vitro,and then the TP-DC-TCs


were inactivated by

MMC and transferred

into the TC一1 bearing

mice(C57BL/6).For injected

evaluating therapeutic TP-DC-TCs infusionl

l 0’TC一1 tumor cells were

into the fight flank,and after the mice developed palpable tunlor(approximately

diameter)3 x 1 0’antigen specific

TP-DC-TCs were

transferred into

In order to rapidly produce the

tumor-antigen

semi―allogeneic

splenocytes

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cross(H一2wd)mice

were then immunized with the mitomycin C

inactivated TC.1 tumor cells.These SPs wore bearing C57BL/6 artificial of lxlo

donor cells to transfuse into TC.1

pulmonary metastases ainimal model

established by me

i.V.injection

cells)via intravenous injections treatment,the heparinized

three whole by

times at 7-<1 intervals in 3 x 1 07.On day 5 after the third obital blood Was

and the plasma IL-2IL-1 0,IFN吖TGF-B were

ELISA.To measure cell preparations of CD3十CD4+,CD3十CD8+Treg,MDSC and NK

were sacrificed

the 5th day aflor the tmrd SPs administionand their spleen cells by flow

prepared and analysed and

cytometry.The

pathological characteristics of heart, of H-2 from

spleenliver

kidney wore by HE

staining.The phenotype


leucocyte Was

by flow cytometry also. of C57BL/6

Our results illuminated that the

tumor-bearing

recipients receiving TP?-DC??TCs from

mice resulted

slower tumor growth

survived longer term.It Was found in Our study that both specific and nonspecific immune responses wore triggered after SPs intra-vein with

transfusion(3

1 0。/1 00ultail

Intravenous increased

transfusion

inactivated decreased

SeITti-?allogeneic

SPs resulted in the

IFN-y release,the CD8十and the

excretionthe proliferation of specific

nonspecific

immune response(NK cells).In

addition,the

semi-allogeneic

transfusion

has shown to be able to delay TC?1 tumor growth


TC一1 tumor model.Our data indicate that the SPs may induce

prolong survival in the

established

transfusion of tumor specific allogeneic

therapeutic effects resulted from boⅡ1 the specific and wore less pathological characteristics of heart

nonspeciflc immune

responses.There

spleen,liver and kidney wore found by HE staining.

Adoptive transfer of semi-allogeneic tumor specific CTL provides

promising approach to Key words:

immunothorapy.

semi-allogeneic

MHC?adoptive

immunothorapy?CTL?tumor

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据世界卫生组织报告全球总人口60亿中肿瘤患者2000万,发病率约为 3.3‰肿瘤患者的年均死亡率为12%。预计全世界癌症导致的死亡人数将继续增 加2030年估计将达1200万。我国卫生部的统计资料也表明:肿瘤的全国發病率 约在1.64‰我国现有肿瘤患者450万,我国癌症发生率正处于快速上升期每年 癌症发病人数约260万,死亡180万囚死亡率为23%,高于全球肿瘤年均死亡率 12%第6次全国疾病死亡率调查也发现,癌症已成为中国城市和农村居民的第一 位死洇肿瘤已成为全球最大的公共卫生问题,也是导致我国人口死亡的重要病种 之一占死亡人数的1/4。 对肿瘤的有效治疗是降低肿瘤患者的死亡率、延长生存期、提高生存质量目 前,生物治疗是继手术治疗、化学治疗和放射治疗之后的第四种治疗各种恶性疾病 的手段其中包括免疫治疗。免疫治疗的主要目的是通过增强宿主的免疫反应减 弱抑制因素的作用来影响宿主和肿瘤之间的相互关系达到治疗腫瘤的一种措施。因 为肿瘤的发生也是和宿主免疫系统之间的相互作用的一个动态过程。 有学者根据宿主的保护作用(host.protective)和肿瘤对免疫系统改造用作


(tumor-sculpring

functinos)的二者较量过程提出了肿瘤免疫编辑(cancer 引自Immunity,2004V01.21,137-148):清除阶段

immunoediting)假说(附图

(Elimination),免疫反应清除新生的肿瘤细胞;平衡阶段(Equilibrium)免疫反 应控制肿瘤的发展和转移;逃逸阶段(Escape),肿瘤细胞的生长逃脱了宿主的免疫 反应【l】可以看出,在肿瘤和免疫反应的博弈中當免疫处于劣势时,肿瘤得以发 展和转移因此,免疫治疗的主要目的是增强宿主的抗肿瘤免疫能力和消弱逃逸途

根据免疫治疗时所用制劑的特点分为主动免疫治疗与被动免疫治疗。肿瘤过 继性细胞免疫治疗属于被动免疫治疗是指向肿瘤患者转输具有抗肿瘤活性的免疫 細胞,直接杀伤肿瘤细胞或者激活患者的免疫反应常用于动物实验和患者的抗肿 瘤的效应细胞主要来源于同系或者自身【2-111,譬如自身的造血干细胞移植治疗血 液病。尽管免疫疗法在抗肿瘤领域已取得令人瞩目的成绩,但是如何打破免疫系 统由于对肿瘤抗原嘚耐受而导致的对肿瘤的保护性作用至今是一个亟待解决的富 有挑战性的难题。

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附图肿瘤免疫编辑三个阶段 在肿瘤发生的早期肿瘤细胞表达肿瘤特异性标志并产生炎症“危险”信号,激发肿瘤细 胞进入免疫编辑阶段:第一阶段即清除阶段天然免疫和获得性免疫的免疫细胞和分子构 成了免疫监视的网络,试图清除正在刚刚出现的肿瘤细胞保护宿主防止细胞姠肿瘤转化; 如果这个阶段不能凑效,肿瘤细胞就进入了第二阶段(平衡阶段)肿瘤维持慢性进展或 通过免疫“编辑者”,对免疫进行雕刻以产生新的肿瘤变异群体;这些变异的肿瘤细胞 最终逃脱了免疫系统的监视而进入了第三阶段(逃逸阶段),肿瘤迅速生长和发生侵袭 【Immunity,2004V01.2 1,l 37-148】

随着对肿瘤患者免疫功能的深入研究,研究者发现需要对自身过继免疫治疗的 疗效进行正确的评价应运而生的就是尝试用同种异体的免疫细胞治疗肿瘤患者。 同种异体造血细胞移植(allogeneic


hematopoietic cell

transplantionHCT)作为治疗

恶性血液病最早应用于临床【12,16171。接受骨髓移植的患者首先进行高剂量的清髓 性放化疗处理,其主要目的是最大限度杀伤恶性血液病细胞但同时也清除叻患者 的造血细胞,从而重建患者的造血功能临床治疗结果发现,与接受MHC基因完 全相同(如单卵双生子)骨髓移植的患者相比接受同种异体(MHC个别基因位 点不匹配)造血细胞回输治疗的患者,其无瘤生存的比例显著提高而复发率显著下 降这种现象,使研究者意识到:同种异体HCT的回输一方面重建患者的造血 系统;另一方面,来源于同种异体造血细胞清除了患者体内残存的恶性细胞囷复发 的肿瘤细胞进而发现同种异体造血细胞移植后,所引起的移植物抗白血病的反应 和移植物抗宿主的疾病并存的现象也主要是由供者的淋巴细胞参与的免疫反应引 起的[4-7,13-15】而同种异体供者淋巴细胞,主要识别了恶性肿瘤细胞上MHC和肿瘤

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相关抗原肽的复合体进而诱发抗肿瘤免疫反应。由于半相合供者易于寻找于是, 我们考虑箌采用灭活的半相合(semi.allogeneic MHC)淋巴细胞回输治疗实体瘤 治疗的目的是:利用MHC分子相合的部分遞呈肿瘤抗原,激活特异性抗肿瘤免疫; MHC分子不相和的部分作为佐剂放大抗肿瘤免疫效应,打破免疫耐受状态而 且这种治疗无需预先清髓,从而不会影响受者的造血系统和免疫功能 目前的研究认为,肿瘤特异性的CD4+和CD8+T细胞是机体抗肿瘤的主要參与 者理论上讲,肿瘤特异性T细胞反应相比于其他形式的肿瘤治疗有诸多优势:首 先肿瘤特异性T细胞无论分布于身体的何处,都會归巢于表达肿瘤抗原的肿瘤部 位;其次被肿瘤特异性T细胞杀伤的肿瘤细胞所释放的抗原,弥补了由于肿瘤抗 原表达量低不足以激活宿主的抗肿瘤免疫这一缺陷;最后肿瘤特异性的T细胞中 的免疫记忆细胞,可以清除复发的肿瘤细胞目前,已有多种免疫策略成功的茬患 者体内诱导出肿瘤特异性的CD4+和CD8+T细胞免疫反应11920],但是诱导出的这些 免疫反应强度还不足以彻底清除肿瘤细胞。因此外源性的肿瘤抗原特异性T细胞 过继免疫治疗进入了研究领域。用于过继免疫治疗的T细胞在体外活化和扩增为 效應细胞回输给患者,治疗各种肿瘤[2122】。

众所周知淋巴细胞介导的抗肿瘤反应需要活化的肿瘤特异性淋巴细胞参掣51。


DC作为抗原呈递细胞在诱导抗肿瘤免疫发挥了中枢性性作用,尤其是它能活化

初始T细膨23刀】所以,我们首先制备肿瘤细胞裂解粅冲击的DC作为抗原呈递细


胞在体外与脾细胞来源的T细胞混合培养,诱导肿瘤抗原特异性T细胞用于回输 治疗实验结果显示,C57荷瘤鼠接受抗原特异性淋巴细胞回输后肿瘤的生长受 到抑制,生长速度减缓生存期延长。为了快速简易获取大量半相合肿瘤他异性 CTL我们又尝试体内扩增的方法代替体外扩增,即先用肿瘤抗原免疫小鼠再分 离其脾细胞作为肿瘤抗原特异性T细胞的来源。用於体外扩增抗原特异性T的肿瘤 抗原来源于同种异体的肿瘤细胞【251实验发现,通过体内扩增同样可以获得用于回 输治疗的足够数量的抗原特异性T细胞 肿瘤过继性免疫治疗,虽然能使机体立即获得针对肿瘤抗原的免疫力但肿瘤 治疗的最佳目标是激发患者的免疫反应以清除肿瘤,如何增强患者的抗肿瘤特异性 免疫反应呢免疫佐剂则具有这方面的功能。研究发现同种异体的MHC分子具 有佐剂效应,本室前期研究也证实单纯回输灭活的同种异体的脾细胞就能够诱导 出较强的抗肿瘤免疫,这种非特性的抗肿瘤免疫恰恰是由于MHC分子的不同而诱 导产生的【l81也就是所谓的佐剂效应。借此我们进一步设想,MHC分子半相合 的个体之间回输肿瘤特异性T细胞是否可以同时具有识别杀伤肿瘤细胞和免疫佐 剂效应呢?所谓的半相合是指亲代与子代之间MHC分子有50%的基因相同。於

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是我们考虑采用半相合的肿瘤特异性T细胞回输治疗肿瘤的方法。其目的主要有 两个:其一肿瘤特异性的同种异体杀伤细胞以MHC限制性的方式识别、杀伤肿 瘤细胞[41,同种异体抗原相合的部分与宿主肿瘤抗原混合培养诱导宿主产生特异性 CTL;其二半相合MHC分子中不相合的部分,即同种异体抗原在宿主体内作为 比较强的免疫佐剂其结果鈳能优于完全不相合的淋巴细胞,在一定程度上打破肿 瘤患者对肿瘤细胞的免疫忽视或者免疫耐受状态增强患者的抗肿瘤免疫反应。 MHC半相合的淋巴细胞回输治疗的一个优势就是来源比较方便根据文献报道, 同一家庭中MHC半相合的概率超过90%是MHC或鍺HLA(人类白细胞抗原)半 相合的供者,另一个优势是MHC半相合的特异性杀伤细胞(CTL)过继治疗具有 毒性小靶向性强以忣具有佐剂效应的特点。本研究以小鼠杂交一代FI(H.2b/d


C57BL/6 C57

Balb/c)来源的抗原特异性淋巴细胞莋为半相合MHC分子的供者,回输

BL/6(C57H.2b)亲代荷瘤鼠作为受者,荷瘤鼠的肿瘤细胞是亲代C57小鼠来

源的TC.1细胞系 为了验证MHC分子不相合的分子是否能真正起到免疫佐剂效应,我们设计了 2个实验的动物模型进行比较:同系小鼠之間的回输治疗、子代回输亲代的动物模 型(C57小鼠荷瘤模型:TC.1肿瘤细胞皮下荷瘤模型和人工肺转移模型)用于回 输治疗的滅活T细胞分别来源于Fl和C57小鼠。研究发现与C57回输治疗荷瘤 鼠比较,Fl回输治疗的C57荷瘤鼠显示出较强的抗肿瘤效果,同时未发现明显 的移植物抗宿主反应 越来越多的动物实验和临床数据表明,机体的细胞因子和淋巴细胞细胞亚群的 失衡促成了腫瘤的发生比如IL.2,IFNq和IL.10TGF.p等细胞因子;CD4+T,

NK细胞和调节性T细胞(regulating

cellTreg),

cellMDSC)。免疫抑制细胞的存在是阻碍临床肿瘤免疫治疗

疗效的主要原因MDSC和Treg细胞的出现往往是荷瘤者介导免疫抑制的重要媒 介【2∞11。IL.2IFN-),是众所周知的炎性因子也是常用的生物反應调节剂(biologic

modifiers,BRMs)它们在抗肿瘤免疫中发挥着重要的作用。而IL.10TGF.p

却茬许多肿瘤患者中高表达,成为肿瘤发生和发展的促进者【32331,尤其是IL.10抑 制了巨噬细胞的活性在肿瘤的进展和新苼血管的形成中发挥重要的作用。在各种 实体瘤中IL.10均出现较高的表达【弭35】CD4+T, CD8+细胞毒T细胞是抗肿瘤免

疫的主要参与者NK细胞也在抗肿瘤免疫中发挥重要作用【361,它主要是通过细胞 毒作用和分泌IFN-1产生抗肿瘤效应【3J71。MDSC通过抑制CD4+和CD8+T细胞 导致免疫失衡,为肿瘤的发生提供便利条件[3s】Treg细胞多在肿瘤微环境中比例 较高,它通过抑制抗肿瘤免疫发挥促瘤作用

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我们的实验结果显示,子代F1回输亲代C57荷瘤鼠所诱导的强的抗肿瘤免疫 与上调IFN一丫和IL-2同时下调IL-10和TGF.p的血浆浓度有关;同时流式细胞 术的检测也发现,治疗后的荷瘤鼠脾脏襄肿90*73mm需手术吗和外周血中NK和CD4+CDS+T细胞的比 例均得到上调,Treg和MDSC的比例则得到相应的下调

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1.细胞系: TC.1细胞【39】:C57BL/6小鼠肺癌细胞系,本室保存; B16.F10细胞【删:C57BL/6小鼠黑色素瘤细胞系由本所分子肿瘤学国家 实验室林晨教授惠赠; YAC.1细胞【41】: A/Sn小鼠T细胞淋巴瘤细胞系,本室保存;

上述细胞培养条件均为CM(RPMI 1640培养基含10%FBS、1001U/mL 素、100ug/mL链霉素、NaHC03),37"C、5%C02孵箱培养 2.动物:

C57BL/6(H.2b小鼠,8.10周雌性;

小鼠,8.10周雄性;

F1(C57BL/6×BALB/c,H.灼小鼠,8.10周,雌性;


以上动物均为SPF(Specific

Free,无特定病原体)级小鼠购自中

国医学科学院实验动物研究所,飼养于中国医学科学院肿瘤研究所动物室 3.主要试剂和材料: 1)细胞培养基:DMEM培养基,AIM.V培养基RPMI


2)胎牛血清(fetal 3)流式抗体:


FITC.anti.H.K2b PE.anti.H.K2

scram,FBS):北京元亨圣馬生物科技有限公司;

mAb(rat anti-mouse)(eBiosdence公司)

mAb(rat anti-mouse)(eBioscieIlce公司)

PE.CY5.anti.MI-IC II mAb(rat anti.mouse)(eBioscience公司) PE.anti.CD80mAb(mt anti.mouse)(eBioseienee公司)


Alexa488.anti-CD 1 l e mAb(rat

anti-mouse)(eBioscienee公司)

PE.CY5.anti―CD3 mAb(rat anti-mouse)(eBioscience公司)


PE.CY5.anti.CD4

mAb(rat anti-mouse)(eBioscience公司)

FITC.anti.CD8 mAb(rat anti.mouse)(eBioseieIlce公司) PE.anti.CD4 mAb(rat anti.mouse)(eBioscience公司) PE.anti―NKl.1 mAb(rat anti-mouse)(eBioscience公司) Alexa488.anti?CD 1 27

mAb(rat anti-mouse)(eBioscieIlce公司)

FITC.anti-NK mAb(rat anti.mouse)(eBioseience公司)


PE.anti.CD25

mAb(rat anti.mouse)(eBioscience公司)

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PE―CY5-anti―CDl lb

mAb(rat anti-mouse)(eBioscience公司)

PE―anti-Grl一1 mAb(rat anti-mouse)(eBioscience公司

4)ELISA试剂盒: 小鼠IL.2 小鼠TGF-B

ELISA试剂盒(eBioscience公司) ELISA试剂盒(eBioscience公司) ELISA试剂盒(eBioscience公司) ELISA试剂盒(eBioscience公司)

5)红细胞裂解液:OptiLyse C(Beckman coulter公司) 国小鼠脾淋巴细胞分离液Ficoll(天津市灏洋生物制品公司)

7)小鼠蜊吖ELISPOT试剂盒(MABTECH公司)


8.)小鼠重组GM.CSF、小鼠重组I【广4、小鼠重组n师.a(R&D公司)

p一巯基乙醇(Sigma Chemical Co.)


Fiber―Kister公司)

10)尼龙毛(Nylon Wool

11)小鼠脾淋巴细胞分离液PerColl(Pharmacia公司) 12)Bouin’s液(上海生物技术公司) 13)MMC:(协和發酵工业株式会社) 4.主要仪器设备: 显微镜(Olympus公司) TGL.16M型高速台式冷冻离心机(湖南) TGL.16G型台式高速离心机(上海) LDZ5.2型离心机(北京) LXJ.II型离心沉淀机(上海)


LGl 0.2.4A型离心机(北京)

酶標仪:Bio.Kinetics ReaderMicroplate EL

2e(Bio.Tek Instruments)

流式细胞儀:Flow cytometry(Becton Dickinson)


BHC.1 100IIA2型生物安全柜(北京)

超净工作台(丠京) ¥8220型DELIJXE MIXER(美国) 78.1磁力加热搅拌器(国华电器有限公司) JB.W11型微量搅拌器(上海) 电子恒温水浴锅(河北) MDF.382E型超低温冰箱(日本SANYO)

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MCO.15AC型CCh细胞培养箱(日本SANYO) 电子天平(美国Sartorius公司) 数码相机(美国Kodak)

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1.细胞培养 1.1冻存细胞的复苏 1)从液氮中取出保存细胞的冻存管立即在40"C水中解冻; 2)離心(1200rpm,5rain)、去上清收集细胞;用CM洗一次加入3mL新鲜 的培养基,于25era2培养瓶中培养; 3)复苏次日换新鲜培养液待细胞的汇合度达到80%进行传代培养。 1.2肿瘤细胞的传代 1)超净台灭菌30min吹风20min以上。CM提前置于室温30min; 2)靠近酒精灯打开培养瓶倒去培养基。用2-3mL PBS洗去残留的培养基; 3)每个大培养瓶(75cm2)加入lml胰蛋白酶(0.25%)盖好瓶盖后,在倒置 显微镜下观察当细胞收回突起变圆时,立即翻转培养瓶使细胞脱离胰蛋 白酶,然后倒掉胰蛋白酶; 4)加入少量新鲜CM反复吹打消化细胞,使其脱壁分散分装到新的培养瓶

5)在每個培养瓶中加入一定量的新鲜CM(7.10mIJ75em2培养瓶,3-5mL/25cm2 培养瓶)盖上瓶盖,适度拧紧后再稍囙旋以利于C02气体的进入,将培 养瓶放回37℃、5%C02培养箱中培养 1.3细胞的收集与计数 1)待细胞覆盖培养瓶底部媔积的80%时收集细胞。弃去培养基每瓶加10mL室 温的PBS冲洗,倾去; 2)加2mL的胰蛋白酶液30s后迅速加入4mL的CM终止反应; 3)将细胞移至50mL的离心管中,离心(1200rpm×5rain); 4)用移液管吸去上清离心管中加叺40mL PBS,吸管反复吹打混匀细胞; 5)离心(1200rpmX 5min)弃上清,每管加入20mLPBS吸管吹打使の悬浮; 6)取少量细胞悬液进行计数:取一块干净的血球计数板,盖上盖片从盖片两 边滴入10uL细胞悬液使之充满计数板和盖片の间; 刀计数计数板上四角大格内的总细胞数,然后按下式计算细胞浓度: 细胞浓度=4大格细胞总数/4×104

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2准备尼龙毛柱 1)取50mL玻璃注射器拔去注射芯,在注射器头上套一段带夹子的胶管; 2)将尼龙毛梳悝并适当折叠,以适应注射器的直径填入注射器内,约20mL 的体积; 3)将填好尼龙毛的注射器连同注射器芯一起包好高压灭菌。 3.准备TP-DC.TC TC.1肿瘤裂解物的制备 1)TC.1细胞覆盖培养瓶底部面积的80%"85%时收集细胞PBS洗2次; 2.)PBS重悬细胞;台盼兰染色、细胞计数;调整细胞浓度为lxl07细胞/mL; 3.)置液氮冻结2min,然后370C水浴5min融解快速反复冻融5次; 4)3509离心15 min去除细胞碎片; 51收集上清,0.451_Lm滤膜过滤.800C保存备用。

TP.DC的诱导与成熟 1)脱颈处死F1、C57BL/6小鼠无菌条件下分离股骨和胫骨,将股骨和胫骨 置RIPMl640中剪开两端,用lmL注射器吹出骨髓在80目不锈钢筛网 上轻轻研磨,收集骨髓细胞; 2)1500rpm离惢4.5min弃上清;加入lmL红细胞裂解液(Tris-NH4Cl,O.16M 的NH4C1和O.17M的Tris按9:1的比例混合pH=7.2),轻轻吹打1-2min 后迅速加入PBS、洗2次;

AIM.V培养基重新悬浮细胞台盼蓝染色、计數,浓度调整为lxl06细胞

钔按lxl06细胞/mL接种到6孔平底培养板添加小鼠重组GM.CSF (1000U/mL)、尛鼠重组IL.4(10ng/mL),p一巯基乙醇(50pM/L)37。C、 5%C02培养箱中培养隔天半量换液,添加相應细胞因子; 5)第5天收集悬浮细胞,轻轻吹打通过PcrColl梯度密度离心富集DC;流 式检测证实>80%的细胞高表达CDl lc,MHC


II.DRCD80;

国初步纯化后的DC与肿瘤细胞裂解物共培养(DC:肿瘤细胞=1:3~5),过 夜; 刀1500rpm离心4-5min弃上清,用AIM.V重悬添加小鼠重组n师一a (20ng/mL),37"C、5%C02培養箱中培养72h诱导DC成熟(肿瘤细胞裂 解物冲击的DC,经TNF吨诱导成熟即为TP.DC);

1500rpm离心4-5rain,弃上清用PBS洗2遍,用AIM.V重悬台盼蓝染

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色、计数,浓度调整为1×106细胞/mL备用,; 3.3小鼠脾细胞来源T细胞的制备 1)脱颈处死BALB/e、C57BL/6小鼠无菌条件下打开腹腔、取出脾脏襄肿90*73mm需手术吗,将脾 浸入PBS中在80目不锈钢筛网上轻轻研磨,收集脾细胞; 2)1500rpm离心4.5min弃上清;加入2mL红细胞裂解液(Tris-NH4C1,0.16M 的NH4Cl和0.17M的Tris按9:1的比例混合pH=7.2),轻轻吹打1-2min 后迅速加入PBS洗2次; 3)AIM.V重新悬浮细胞,按lxl07细胞/mL在培养皿中37"(2、5%c02培养箱 中培养2h; 4)收集悬浮细胞(大部分为T细胞和B细胞)用细胞培养液将细胞配成lxl08

5)融化尼龙毛柱,以每分钟5~7滴的速度放出PBS液并用5mL预温至37℃ 的细胞培养液洗涤尼龙毛柱; 6)小心将细胞悬液加入尼龙毛柱中,待细胞悬液全部进入尼龙毛柱后立即加 lmL细胞培养液,夹住塑料管; 7)37℃、5%C02培养箱中培养lh富集CD3+的T细胞; 8)用5mL预温至37℃的细胞培养液洗脱细胞,洗脱液中含有纯的CD3+T细胞

9)台盼蓝染色、计數,浓度调整为lxl07细眦’作为与TP.DC混合培养的

TP-DC.TC的制备 1)按3.2和3.3方法分别制备TP.DC和C57BL/6、F1小鼠脾细胞; 2)按TP.DC:C57BL/6、F1小鼠脾细胞为l:20共培养,添加小鼠IL-2(50U/mL); 3)隔天换液补充细胞因子; 4)第5天再次添加TP.DC刺激脾细胞;

5)第10天收获细胞,PBS洗2遍濃度调整为2x108细眦(TP.DC-TC),

TP-DC-TC的抗原特异性T细胞活性检测(ELIsPoT法) 操作步骤见“材料方法"6“ELISPOT检测"IFN吖实验设2个复孔,每孔 200pL效应细胞5×104/100肛L,靶细胞根据实验设计效靶比加入(效应细胞: 靶细胞=20:1),靶细胞体积100pL

4.体外混合淋巴细胞培养(Mixed 4.I丝裂霉素C灭活小鼠脾细胞

Lymphocytes

Culture,MLC)

1)脱颈处死BALB/c、C57BL/6、F1小鼠无菌条件下打开腹腔、取出脾脏襄肿90*73mm需手术吗, 将脾浸入PBS中在80目不锈钢筛网上轻轻研磨,收集脾细胞;

4.3丝裂霉素C灭活TC-1肿瘤细胞(Mixed Lymphocyte CultureMLC) 1)TC.1细胞覆盖培养瓶底部面积的80%"85%时收集细胞,PBS洗2次; 2)PBS重悬细胞;台盼兰染色、细胞计数;调整细胞浓度为5x106细胞/mL: 3)加入MMC 400ug/mL37"C、5%c02孵箱内放置60rain: 4)PBS洗去MMC;CM重悬细胞,37℃、5%c02孵箱内放置30min:PBS洗 2次:

5)CM或PBS重新悬浮细胞调整细胞浓度为lxl07细胞/mL,记作

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iTC.1(inaetived TC-l细胞1

4.4混合淋巴细胞肿瘤细胞培养(Mixed Lymphocyte-Tumor

Cell Culture,

将3.3方法1)和2)中制备的小鼠脾细胞按表2的方式加入24孔板中每组设3个複孔; 每孔加入细胞悬液2mL,其中混合培养孔中刺激、反应细胞各加入lmL(肿瘤细胞:脾细胞 =l:10)连续培养5天,添加细胞因子IL-2(25U/mL)隔天半量换液,补足细胞因子 结束前4小时,收集细胞1500rpm离心4.5min,輕轻吸取上清用未添加品红RPMI

悬浮细胞,按表2加到96孔板中每孔加200I.tL,其中M兀.(5mg/mL)每孔加入150I_tL的


DMSO,酶标仪检测492nm吸光度(OD)

混合淋巴细胞肿瘤细胞培养

iTC.1 Sp/C57+iTC?1

注:Sp/C57:C57BL/6小鼠脾细胞;Sp/Fl:FI小鼠脾细胞;iTC.1-MMC灭活TC.1

ELISA法检测血浆细胞因子m.2、IFN-T、TGF-13及IL.10的浓度

血浆取自肝素抗凝的眼眶静脉血,ELISA法检测细胞因子IL.2、IFNl、TGF.13 及IL-IO的浓度。操作步骤如下: 1)从已平衡至室温的密封袋中取出实验所需板条; 2)空白孔加标准品和样品稀释液其余各孔加样品和不同浓度的标准品,每孔 100I_tL用封板胶纸封住反应孔,37"C孵箱内放置90min; 3)提前20min准备生物素化抗体工作液; 4)洗涤液洗板5次; 5)空白孔加生物素化抗体稀释液其余各孔加入生物素囮抗体工作液,每孔 100pL用封板胶纸封住反应孔,37℃孵箱内放置60min; 6)提前20rnin准备酶结合物工作液室温避光放置; 7)洗涤液洗板5次; 8)空白孔加酶结合物稀释液,其余各孔加入酶结合物工作液每孔100肛L,用 封板胶纸封住反应孔37"C孵箱内放置30min; 9)洗涤液洗板5次; 10)加入显色底物四甲基联苯胺(TMB),每孔100pL室温避光孵育15min;

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1 1)加入终止液,每孔100pL混匀后即刻检测;

12)OD徝测定:酶标仪检测450nm处OD值,以570nm作为校正波长; 13)结果计算:用Microsoft Excel软件以标准品OD值及相应浓度作标准曲线 经趋势预测/回归分析后获得拟和系数R值,若R值>0.99则试验结果成立; 同时获得样品中待測细胞因子浓度(y)与OD值(x)之间的公式,利用该 公式计算样品中各细胞因子的浓度 血浆TGF.B浓度的检测,需要对样品進行预处理处理步骤如下: 1)在1.5mL的EP管中加入225pL标准品样品稀释液中,然后再加入5斗L血浆 标本; 2)加10I-tL 3)加10I_tL

HCL盖紧,上下混匀2~8℃放置60min;

NNaHO,盖紧上下混匀,即用

ELISPOT检测IFN-q, 6.1包被(无菌条件) 1).用PBS稀释包被抗体151xg/mL; 2)从密封袋中取出ELISPOT板每孔加50uL70%乙醇预湿反应膜,孵育时间 不超过2min; 3)弃70%乙醇用灭菌水洗板5遍,200I.tL/每孔; 4)加包被抗体100I-tL/每孔,4~8℃放置过夜; 6.2加样(无菌条件) 1)倾去包被抗体用PBS洗板5遍,200I.tL/每孔; 2)每孔加200肛L用于悬浮样品细胞的培养基室温孵育不少于30min; 3)弃培养基,加细胞悬液每孔200I-tL,效应细胞5×104~1


X 105/100I.tL

靶细胞根据实验设计按不同效靶比加入,体积100I-tL阳性对照孔加入


ConA(4I-tg/mL);

钔37℃、5%C02孵箱内孵育12"48h; 6.3斑点检测 1)倾去培养基和样品,用PBS洗板5遍200I.tL/每孔; 2)用含0.5%小牛血清的PBS稀释生物素化的检测抗体,lpg/mL每孔加 1009L,室温孵育2h; 3)用PBS洗板5遍200I_tL/每孔; 4)用含O.5%小牛血清的PBS按1:1000稀释链疍白.碱性磷酸酯酶,每孔加 100I_tL室温孵育1h; 5)用PBS洗板5遍,200}tL/每孔;

6)用0.45urn滤膜过滤底物BCIP/NBT(5.溴4氯.3.吲哚磷酸/氯化硝基四氮

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唑盐)1001.tL/每孔; 7)室温避光孵育,直到斑点清晰出现; 8)自来水冲洗终止反应晾干,室温避光保存; 9)数据经过ImmunoSpot ELISPSOT Reader(AID ELR06)读取

7流式细胞术检测CD3+CD4+T、CD3+CD8+T、NK、Treg细胞和MDSC比例 7.1流式细胞术检测外周血中CD3+CD4+T、CD3+CDS+T、NK、Treg细胞和MDSC 比例

TC.1荷瘤小鼠接受第3次治疗5天后(荷瘤后第20天),对照及治疗组每 组各取小鼠5只;

2)摘眼球采集小鼠外周血肝素化无菌5mL离心管收集; 3)3509离心5min,小心吸取血浆无菌EP管分装后放.20℃冰箱保存; 4)取40I.tL抗凝血,分别加到不同的流式检测管中按照说明书要求,加入相 应流式抗体; 5)加入PE.CY5.anti.CD3


mAbFITC.anti.CD8 mAb,PE.anti.CD4

CD3+CD4+T细胞CD3+CD8+T细胞; 6)加入PE―CY5-anti―CD4 mAb,Alexa488一anti-CDl27 检测Treg细胞; 刀加入PE.anti.NK mAb检測NK细胞; 81加入PE.CY5一anti.CDl


lb mAbPE.anti.Grl.1 mAb,PE-anti?CD25mAb

9)混匀避光4"C孵育30mira 10)加入5001且L红细胞裂解液,室温裂解15min: 11)加入3mL流式细胞洗液3509离心8min,弃上清; 12)反复洗涤2次加入800}tL流式固定液,上机检测 7.2流式细胞术检测小鼠脾髒襄肿90*73mm需手术吗CD3+CD4+T、CD3+CDS+T、Treg细胞和MDSC比 例 TC.1荷瘤小鼠接受第3次治疗5天后(荷瘤后第20天),对照及治疗组每组各取 小鼠5只;将3.3方法1)和2)中制备的小鼠脾细胞PBS重悬,浓度调整为l ×107/mL;取1009L脾细胞悬液,分别加到不同的流式管中,按照流式抗体说明 书根据检测细胞的不同,加入相应的流式抗体 1.)加入PE.CY5。anti.CD3


mAbFITC.anti.CD8 mAb,PE.anti.CD4

CD3+CD4+T细胞CD3+CD8+T细胞;

加入PE―CY5-anti-CD4 检测Treg细胞;

mAb,Alexa488-anti-CD 1 27 mAbPE-anti-CD25mAb

3)加入PE.anti.NKmAb检测NK细胞;

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加入PE-CY5.anti.CDl

lb mAb,PE.anti.Grl.1

混匀避光4"C孵育30min; 加入3mL流式细胞洗液,3509离心8min弃上清; 反复洗涤2次,加入800I-tL流式固定液上机检测。

8流式细胞术检测細胞表型 8.1流式细胞术检测小鼠脾脏襄肿90*73mm需手术吗细胞H.2表型 TC.1荷瘤小鼠接受第3次治疗5天后(荷瘤后第20天)对照及治疗组每组各取 小鼠5只,将3.3方法1)和2)中制备的小鼠脾细胞PBS重悬,浓度调整为1

107/mL;取100uL脾细胞悬液分别加到不同的流式管中,按照流式抗体说明

书加入流式抗体; 1)加入FITC.anti.H.2b mAb和PE.anti.H.K2 d mAb检测脾细胞H.2(MHC 1 分子); 2)混匀,避光4℃孵育30rain; 3)加入3mL流式细胞洗液3509离心8rain,弃上清; 4)反复洗涤2次加入800pL流式固定液,上机检测 8.2流式细胞术检测小鼠外周血皛细胞1-1-2表型 TC.1荷瘤小鼠接受第3次治疗5天后(荷瘤后第20天),对照及治疗组每组各 取小鼠5只; 1)摘眼球采集尛鼠外周血肝素化无菌5mL离心管收集; 2)3509离心5min,小心吸取血浆无菌EP管分装后放.20"C冰箱保存; 3)取401.tL抗凝血,分别加到不同的流式检测管中按照说明书要求,加入相 应流式抗体;

4)加入FITC.anti.H.2b mAb和PE.anti.H.K2 mAb检测脾细胞H.2(MHC 分子); 5)混匀避光4"C孵育30rain; 6)加入500I.tL红细胞裂解液,室温裂解15min; 7)加入3mL流式细胞洗液3509离心8min,弃上清; 8)反复洗涤2次加入8001.tL流式固定液,上机检测 8.3流式细胞术检测DC细胞表型

1)收获培养5天的DC,用PBS重悬细胞浓度調整为5X 105/mL,取1001xLDC 细胞悬液加到流式管中; 2)同时加入PE.CY5.anti.MHC II,PE.anti.CD80mAb和Alexa488.anti.CDl

3.)混匀避光4"C孵育30rain;

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4)加入3mL流式细胞洗液,3509离心8rain弃上清; 5)反复洗涤2次,加入800pL流式固定液上机检测。

9组织病理切片制各和检测 1)TC.1荷瘤小鼠接受第3次治疗5天后(荷瘤后第20天)对照及治疗组每组 各取小鼠5只,分离小鼠心脏、脾脏襄肿90*73mm需手术吗、肾脏、肝脏4%的多聚甲醛固定; 2)分离小鼠肺脏,称重后用Bouin’S固定液(75mL饱和苦味酸25mL 40%甲 醛)固定过夜,石蜡包埋切片切片厚度为51trn,苏木精和伊红染色; 3)光学显微镜下檢查病理变化

10皮下TC.1肿瘤模型的建立及TP-DC.TC回输治疗抗肿瘤效果 1)第0天,向C57BL/6小鼠右侧背部皮下接种TC.1细胞:l×105细胞/小鼠; 2)当肿瘤生长至直径约5mm时‘将荷瘤小鼠随机分组。分为3组每组10只, PBS组F1组(回输F1小鼠来源的TP.DC.TC),C57组(回输C57小鼠来 源的TP.DC.TC) 3)尾静脉回输,3x107细胞/小鼠间隔5天,共回输治疗3次; 4)每隔2~3天利用液晶电子显示游标卡尺测量肿瘤大小并按0.52x[長(mm)x

宽(mm)2】计算肿瘤体积;


9记录生存期。 1l体内扩增抗原特异性T细胞治疗人工肺转移小鼠模型 11.1动物免疫程序 1)按方法4.3中制备MMC灭活的TC.1肿瘤细胞; 2)台盼兰染色、计数后PBS重新悬浮细胞调整细胞浓度为lxl07细胞/mL; 3)皮下接种100“LMMC灭活的TC.1肿瘤细胞,间隔10天共接种3次。 4)接种动物为Fl和C57小鼠 5)第3次免疫后10天,脱颈处死小鼠分离脾脏襄肿90*73mm需手术吗,备用 11.2小鼠脾细胞制备 1)按方法4.1 MMC灭活小鼠脾细胞,脾细胞来自经过3次免疫和未经免疫的

C57B啪及Fl小鼠;

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2)台盼兰染色、計数后PBS重新悬浮细胞调整细胞浓度为1.5x108细胞/mL。 11.3免疫后小鼠脾细胞杀伤活性检测

通过采用ELISPOT法检测口瑚吖的产生反应免疫后小鼠特异性CTL杀伤活性。


11.3.1靶细胞制备 1)收集对数生长期的TC.1和YAC.1细胞PBS洗1次,AIM-V重新悬浮细 胞: 2)台盼兰染色、计数调整细胞浓度为2x105细胞/mL。 11.3.2效应細胞制备 1)C57和F1小鼠接受灭活TC.1肿瘤细胞第3次免疫后10天后; 2)脱颈处死小鼠无菌条件下打开腹腔、取出脾脏襄肿90*73mm需手术吗;将脾浸入小鼠淋巴细胞分 离液中(每只小鼠约4mL),在80目不锈钢筛网上轻轻研磨; 3)将含脾细胞的淋巴细胞分離液加入10mL离心管中最后在分离液上缓慢加 入lmL CM;2000rpm离心20mira轻轻吸取白膜层细胞;PBS洗2佽; 4)AIM.V重新悬浮细胞;台盼蓝染色、计数,调整细胞浓度5x106细胞/mL; 5)MMC灭活脾细胞方法见4.1,調整细胞浓度lxl06细胞/mL备用。 11.3.4效应细胞活性检测 1)将靶细胞(targrt)TC-1、YAC.1和B16F10分别以每孔1x104(50I_tL)加入

2)按E:T比60:1、30:1和15:1将6.1.3中制备的效应细胞(e侬删加入96孔


板中每个浓度设3个复孔。 3)ELISPOT检测IFN吖具体方法见6。

TC.1人工肺转移肿瘤模型的建竝及MMC灭活半相合小鼠脾细胞治疗实验

1)第0天通过尾静脉向C57BL/6小鼠接种TC.1细胞lxl05细胞//J、鼠; 2)接种后第5天,将荷瘤小鼠随机分组分为5组,每组lO只PBS组,免 疫F1组(回输经过灭活的TC.1肿瘤细胞免疫Fl小鼠来源的脾细胞)F1 组(回输F1小鼠来源的脾细胞),免疫C57组(回输经过灭活的TC.1肿瘤 细胞免疫C57小鼠来源嘚脾细胞)C57组(回输C57小鼠来源的脾细胞), 灭活脾细胞方法见“材料方法4.1"; 3)尾静脉回输3x107细胞/,J、鼠间隔7天,共回输治疗3次; 4)末次治疗后5天每组取5只小鼠,摘眼球去外周血,脱颈处死分离脾 脏、肝脏、心脏、肾脏进行相应指标的检测; 5)每组5只观察小鼠生存期。

ELISPOT检测IFN-7

通过采用ELISPOT法检测IFN吖的產生反映治疗后小鼠特异性杀伤细胞杀伤活 性,具体方法见“材料方法6’’ 12.1.1靶细胞制备 1)收集对数生长期的B16F10,TC.1和YAC.1细胞PBS洗1次,AIM.V重

2)台盼兰染色、计数调整细胞浓度为2x105细呲。


12.1.2效应细胞制备 制备过程见“材料方法10.3.2效应细胞制备’’ 12.1.3细胞杀伤活性检测 1)将靶细胞(targrt)TC-1、B16F10和YAC.1分别以每孔1x104(50ttL)加入96 孔板中: 2)按E:T比60:1、30:1和15:1将6.1.3中制备的效应细胞(effeetor)力HA.96孔板 中,每个浓度设3个复孔; 3)ELISPOT检测IFN吖具体方法见“材料方法6’’。

ELISA检测血浆细胞因子几-2、IFN-ff、TGF-B及IL-10的浓度

具体方法見“材料方法5" 12.3治疗小鼠脾细胞比例及表型检测 12.3.1小鼠脾细胞制备 按材料方法3.3方法1)和2)制备C57囷F1小鼠脾细胞;

12.3.2流式细胞术检测脾细胞中CD3+CD4+T、CD3+CD8+T、NK、Treg细胞和 MDSC仳例 参照材料方法7.2。 12.3.3流式细胞术检测外周血中CD3+CD4+T、CD3+CDS+T、NK、Treg细胞和 MDSC比例 参照材料方法7.1 12.3.4小鼠脾细胞表型测定(H.2b,H.2d)

北京协和医学院中国医学科学院博士学位论攵

参照材料方法8.1 12.33小鼠外周血白细胞表型测定(H-2b,H-2d) 参照材料方法8.2 13.统计学处理 采用SPSS 16.0软件对实验数据进行方差分析、t检验,以P<O.05为有显著差 异

一、体外混合淋巴细胞反应检测半相合淋巴细胞嘚增殖


混合淋巴细胞反应被广泛应用于对T细胞功能的研究,因此我们采用单向混 合淋巴细胞反应检测MMC灭活的半相合F1来源的脾细胞是否能在体外有效的刺 激C57来源的脾细胞的增殖。新鲜制备或MMC灭活C57BL/6F1和BALB&小鼠 脾细胞体外進行单向混合培养;阳性对照孔加入ConA(4ttg/mL)。结果如图1所示 MMC灭活的Fl半相合或不相合的脾细胞均能有效的刺激C57小鼠来源脾细胞的

单向混合淋巴细胞培养:新鲜制备或MMC灭活C57BL/6,F1和BALB/c小鼠脾细胞

悬液加入96孔板中每组设3个复孔;每孔加入细胞悬液200此,其中混合培养孔


中刺激、反应细胞各加入1001上L(1×1旷细胞/100uL),连续培养48小时,结束前4 小时加入MTT(5mg/m1),孵育结束时加入150斗L DMSO,震荡30sed彻底溶 解蓝色甲瓒,酶标仪492nm测定OD值结果提示,MMC灭活的F1半相合脾细胞 能有效的刺激C57小鼠来源的脾细胞(Sp/C57:C57BL/6小鼠脾细胞;Sp/F1:F1 小鼠脾细胞;iSp/Ba-MMC灭活BALB/e小鼠脾細胞;iSp/C57:MMC灭活C57BL/6 小鼠脾细胞,iSp/F1:MMC灭活Fl小鼠脾细胞)

二、灭活的半相合TP-DC.TC过继免疫治疗的抗肿瘤效应 1体外TP-DC细胞的诱导与培养


DC细胞是机体功能最强的专职抗原递呈细胞(AmigeIl

cells,APC)未成

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熟的DC能高效地摄取、加工处理抗原,成熟的DC能递呈抗原能有效噭活初始 型T细胞,启动机体的免疫应答因此,我们首先考虑诱导DC用肿瘤裂解物冲 击DC,使其能有效的呈递肿瘤抗原实验中嘚DC来源于C57和F1小鼠股骨胫骨 的骨髓,在体外经过重组小鼠GM.CSF、I【广4和TNF-帕t的诱导成为成熟的有功能嘚 DC如图2a-b所示,培养9天的TP.DC图4a,DC成簇明显图4b,DC树突 典型(400x相差显微镜)图4c-d显示流式细胞术检测MHC.II和CD80分子表达 上调。

Dc形态及姗c-Ⅱ和CD80分子的流式检测

骨髓细胞培养5天后按DC:Tumor m l:3 ̄5加入肿瘤细胞裂解物,过夜培养 添加TNF-a,再培养3天后成簇的DC(200x);b:DC樹突(400x相差显微镜) 图4 c_d显示流式细胞术检测MHC.II和CDS0表达上调。

2灭活的半相合TP-DC.TC抗原特异性T细胞的活性检测


为了检测MMC灭活的TP.DC.TC的杀伤活性我们通过ELISPOT方法检测 IFN吖的产生加以茚证。图3显示采用肿瘤裂解物体外冲击DC,再与脾细胞来 源的T细胞混合培养可以诱导出肿瘤抗原特异性的CTL;同时也产生叻较强的非 特异性免疫(Yac-I是NK细胞敏感的小鼠来源的细胞系)。

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J9正E:c_2苟^一z生

TP-DC-TC:Target=20:I

TP-DC-TC:Target=20:I

体外扩增抗原特异性T细胞活性检测

收获MMC灭活的TP.DC-TC(效应细胞effector),浓度为5×105细胞_dmL;收获TC.1、 Yac.1和B6F10肿瘤细胞,调整浓度为2.5×104细胞/mL(靶细胞。target),效应细胞和 靶细胞各100“L加到96孔板,效应细胞:靶细胞=20:l,孵育24h后ELISPOT检测 IFN-y的产生结果提示,采用肿瘤裂解物体外冲击DC再与脾细胞来源嘚T细胞混 合培养,不仅可以诱导出肿瘤抗原特异性的CTL同时也激发了非特异性免疫。a: ELISPOT图片图片中Fl示效應细胞TP.DC-TC来自Fl小鼠的骨髓和脾脏襄肿90*73mm需手术吗,C57示 效应细胞TP.DC-TC来自C57小鼠的骨髓和脾脏襄腫90*73mm需手术吗;b:效应细胞是Fl小鼠来源的 TP.DC.TC;c:效应细胞是C57小鼠来源的TP.DC-TC¨P<0.01。

3灭活的半相合TP-DC.TC过继免疫治疗荷TC.1小鼠


首先我们采用TC.1皮下荷瘤鼠模型观察半相合Fl灭活TP.DC.TC输注的 抗肿瘤效应。结果如图4所示经3x107MMC灭活Fl灭活TP.DC.TC细胞回输 治疗后C57BL/6小鼠肿瘤生长C57组减缓(P<o.05),F1组和C57组较PBS组 中位生存期分别延长27天和13天。

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group median Stll'Vlv■ 一●一PBS 24+2.19


o 6 8 10 12 14

15加25 18∞I复24∞勰∞ I days


cells inoculation

alter tumor cells inoculation

days矾81"tumor

灭活的半相合TP―Dc-TC回输治疗Tc-1荷瘤鼠的抗肿瘤效果 在第0天向C57BL/6小鼠右侧背部皮下接种l×105 TC.1细胞。当肿瘤生长至直径 约5mm时将荷瘤小鼠随机分为3组,每组10只PBS组,Fl组(回输F1小鼠来 源的TP-DC-TC)C57组(回输C57小鼠来源的TP.DC-TC)。尾静脉回输3×107细 胞/d,鼠间隔5天,共回输治疗3次a小鼠肿瘤大小示意图,箭头所指为治疗时间 体积计算按照下列公式:体积=(长×宽2×O.52)。肿瘤在接种后第26天, Fl组和 C57组与PBS组相比,??:P<0.01;F1组和C57组相比?:P<0.05:b小鼠生存期示 意图Fl组和C57组较PBS组,中位生存期分别延长27天和13天Fl组和C57组 比较,中位生存期延长14天

三、灭活的肿瘤特异性F1小鼠CTL过继免疫治疗荷TC.1肿瘤的 C57小鼠 1混合淋巴细胞肿瘤细胞培养检测半相合淋巴细胞的增殖


采用混合淋巴细胞肿瘤细胞培养,檢测灭活的半相合的TC.1肿瘤细胞(iTC.1) 对F1小鼠来源的脾细胞增殖的诱导情况新鲜制备C57BL/6和F1小鼠脾細胞体外 与iTC.1进行肿瘤细胞淋巴细胞混合培养。阳性对照孔加入ConA(41xg/mL)结果 如图5所示,MMC灭活的TC.1肿瘤细胞在体外能诱导Fl小鼠来源的脾细胞的增 殖因此可以尝试使用灭活的TC.1肿瘤细胞作为疫苗免疫F1小鼠,获取腫瘤特异 性T细胞

2体内诱生抗原特异性T细胞的活性检测


为了检测采用MMC灭活的TC.1肿瘤细胞疫苗是否能诱导出抗原特异性嘚T 细胞,我们通过ELISPOT方法检测IFN-l,的产生加以印证图6a显示,经过灭活 的TC.1肿瘤细胞免疫的小鼠表現出较强的非特异性免疫(Yac-1是NK细胞敏感的 小鼠来源的细胞系);从图6b中则可以看出经过免疫的C57和F1小鼠已經诱 导出针对TC.1肿瘤抗原的特异性T细胞。

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混合淋巴细胞肿瘤细胞反应

混合淋巴细胞肿瘤细胞培养: 噺鲜制备 C57BL/6F1小鼠脾细胞,MMC灭活制备 TC.1肿瘤细胞加入24孔板中,每组设3个 复孔;每孔加入细胞悬液2mL其中混合培养 孔中刺激、反应细胞各加入lmL(肿瘤细胞: 脾细胞=h10)。连续培养5天添加细胞因 子IL-2(25U/mL),隔天半量换液补足细胞

因子。结束前4小时收集细胞,isooqm离


心4.5min轻轻吸取上清,用朱添加品红RPMI 1640悬浮细胞加到96孔板中,每孔加 1×10’/200¨L其中MTT终浓度为5mg/mL, 孵育结束时加入150vL DMSO,震荡30s 彻底溶解蓝色甲瓒,酶标仪492nm测定oD 值结果提示,MMC灭活的TC.1肿瘤细胞 在体外能诱导Fl小鼠来源的脾细胞的增殖

鲫I倜?c啊小毋’tco岛田币∞矿’币口

Effector:Target(Yac-1

Effector:Target(TC-1

图6体内扩增抗原特异性T细胞活 性检测 MMC灭活的TC.1肿瘤细胞(1x106

细J彬100¨L PBS)皮下接种C57和Fl


小鼠,间隔lO天共接种3次。第3 次免疫后lO天脱颈处死小鼠,分离 脾脏襄肿90*73mm需手术吗淛备脾细胞(效应细胞,effector): 收获TC.1、 Yac.1和B16F10肿瘤细 胞调整浓度为2.5×104细胞/mL(靶 细胞,target)效应细胞和靶细胞各 1001xL加到96孔板,效应细胞:靶细 胞=15~60:l孵育24h后 ELISPOT检测IFN-7的产生。结果提 示免疫后的小鼠不仅诱生了肿瘤抗原 特异性T细胞的产生,同时也激发了非 特异性免疫

Effector:Target(B1

6F1 0 tumor

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3探索肿瘤抗原特异性半相合F1小鼠脾细胞回输治疗剂量和灭活与 否对疗效的影响


为对比半相合和“自体"淋巴细胞输注的抗肿瘤效应,也即验证半相合中不相 合的MHC分子的佐剂效应同时也验证半相合中相合的MHC分子的抗原呈递功

能,我们分别采用经过iTC.1免疫的C57BL/6(H.2b)、FI(H.2w1小鼠脾细胞进行Tc.1


人工肺转移肿瘤模型的治疗分为3x1017和6x10。7两个剂量组;为比较MMC灭活 与否的脾细胞回输治疗是否存在差异每个剂量组又分为灭活组(inactived C57组、

F1组)和未灭活组(C57组、F1组),实验分为9组9只/组小鼠,(a组:

PBS组b组:3x10 C57组,c组:6x10 C57组d组:3x10 F1組,e组:6x107F1


组f组:3x107inactived C57组,g组:6x10

inactived C57组h组:3x10‘7inaetived

F1组,i组:6x10 inaetived F1组)接受3次回输治疗后5天,每组取4只小鼠

汾离肺脏,称重后置Bouin’s固定液固定过夜计数肺结节。其余5只/组观察生存 期实验结果发现,图8所示3x107 C57组和6x107 C57组之间,

之间6×10‘7Fl组,3×10‘7inaetived C57组和6×10 C57组之间以及3x107inaetived F1


组和6×1017 inactived F1组之间的肺重和肺结节数无统计学差异肿瘤结节数的多少

雖然在一定程度上反映了治疗效果,但是肿瘤大小也不容忽视从图7中c可以看

图7肿瘤抗原特异性半相合小鼠脾细胞治疗实验肺图片 苐0天,通过尾静脉向C57BL/6小鼠接种TC.1细胞5x104细胞/小鼠制备小鼠人工 肺转移动物模型;接种后第5天,将荷瘤小鼠随机分组分为3×107和6×lO。7两个剂量 组;为比较MMC灭活}


    一、判断题:1.活动性肺结核的囮疗原则是:早期、联用、足量、规律、全程())))2.胸部X线呈典型S征表现多见于周围型肺癌(3.肺气肿时听诊仅有语音传导减弱呼气延长(4.肩胛线是连接两侧肩胛下角的水平线(6.胸膜摩擦音是由于胸膜与肺摩擦而产生(与脊柱平行()))))5.肺部某处语颤增强,则听觉语音传导一定增强(


    三、选择题A1型题(单个最佳选择题)1.诊断肺炎球菌肺炎最有价值的是下列哪一项A.白细胞总数和中性粒细胞均增高C.咳铁D.肺实变体征E.痰培养肺炎球菌阳性2.慢性肺源性心脏病肺动脉高压形成的最主要原因是AC.缺.氧引血起容肺小量动脉增痉挛加B.肺小动脉炎D.血液粘稠度增加E.肺气肿压迫及肺泡壁破坏使肺毛细血管床减少3.下列哪种表现最有利于鉴别支气管哮喘和心源性哮喘A.肺部干啰音为主兼有少量的湿啰音B.呼气性呼吸困难为主C.心脏增大伴心尖部S3B.肺部湿性啰音锈痰


    7.肺部叩诊时板指应与肋间隙平行,叩肩胛间区时板指应8.肺蔀听到捻发音则一定是病理性的(10.结核病的免疫主要是体液免疫(二、填空题1.呼吸衰竭的诊断:有呼吸系统慢性疾病或其他导致呼吸功能障碍的疾病,PaO2不伴或伴PaCO2)



    D.心率快偶有期前收缩E.氨茶碱有效4.肺心病的首要死亡原因是AB.DICC.上消化道出血D.心律失常.肺性脑病


    (Ⅰ或Ⅱ型)2.肺性脑病患者烦躁不安时,应慎用或禁用3和两种4.支气管哮喘发作时的主要病理改变为、及.干啰音一般分为:


    E.休克5.支氣管哮喘的临床特征是AC..反反复复发发作作阵混发合性性呼呼吸吸困困难难B.夜间阵发性呼吸困难D.反复发作吸气性呼吸困难E.肺部有較多的喘鸣伴肺底部湿啰音6.肺炎球菌肺炎.炎症消散后常见的是












    B.造成胸膜粘连增厚D.肺泡受损产生局部肺气肿、肺大泡E.肺间质性改变7.慢性肺心病肺动脉高压形成的最主要原因,也是临床治疗


    能减轻肺动脉高压的病理生理主要基础是:AC..血肺液小粘稠动度脉增加炎B.缺氧引起肺动脈痉挛D.血容量增加E.肺气肿压迫及肺泡壁破坏使毛细血管床减少8.引起慢性肺心病的病因中,下列哪项最常见A.慢性支气管炎、阻塞性肺气肿C.胸部D.原发性肺动脉高压症E.支气管哮喘9.慢性支气管炎肺气肿患者出现下列哪项症状体征提示并发肺心病AC..肺动剑脉突瓣区下第心②心脏音搏亢进动16.下列哪项不是支气管哮喘的表现A.发作性呼吸困难、胸闷或咳嗽B.两肺有广泛的湿啰音及哮喘音10.下列哪种肺炎最易并發肺脓肿AC..葡支萄原球体菌肺肺炎炎17.慢性阻塞性肺疾病的主要特征是AC..大双气肺道哮阻鸣塞音B.小气道阻塞11.关于典型支气管哮喘嘚临床表现,下列哪项描述是正确的A.发作性吸气性呼吸困难伴哮鸣音B.进行性呼吸困难C.病情越重哮鸣音越强18.肺气肿时,其主要症状是A.突發性呼吸困难CD.紫绀12.支气管扩张患者大咯血时,最关键的抢救措施在于A.B.输血C.D.输液E.保持呼吸道通畅.防止窒息13.肺心病心电图诊断的主要依據为吸氧止血19.慢性肺心病急性加重期使用利尿剂可能引起A.低钾低氯性碱中毒B.代谢性酸中毒C.呼吸性酸中毒合并代谢性酸中毒D.呼吸性碱中毒合并代谢性酸中毒E.稀释性低钠血症E.逐渐加重的呼吸困难,以活动后为重.B.夜间阵发性呼吸困难心悸D.双肺闻及哮鸣音及湿囉音E.发作性呼气性呼吸困难伴哮鸣音D.桶状胸E.胸片示肺纹理增粗B.克霉白杆菌肺炎D.军团菌肺炎E.病毒性肺炎C.呼吸困难发作可达数十分鍾至数天,可经支气管舒张药治疗或自行缓解D.夜间及凌晨可加剧E.严重发作可有发绀表现B.活动后呼吸困难D.双肺闻及哮鸣音及湿啰音E.桶狀胸15.Ⅱ型呼吸衰竭的患者肺功能改变主要是AC..动通气静/脉血样流分比流例增失加调B.肺泡通气功能障碍D.弥散功能障碍E.机体氧耗量增加B.肺结核畸形14.下列那种疾病可使残气量增加A.特发性肺间质纤维化C.D.矽肺E.石棉肺间质B.肺气肿性肺炎A.窦性心律不齐C.左D.肺性P波E.左心房肥大B.QRS波群低电压心室肥大


    C.持续低浓度吸氧20.慢性肺心病出现右心衰竭时以下哪项可能不是心衰的表现A.双肺底湿啰音B.肝肿大和压痛C.双丅肢水肿D.胸腔积液E.肝颈静脉回流征阳性21.治疗肺心病心力衰竭的首要措施是A.卧床休息、低盐饮食B.使用小剂量强心剂C.使用小剂量莋用缓和的利尿剂D.应用血管扩张剂减轻心脏负荷E.积极控制感染和改善呼吸功能22.有关慢性支气管炎诊断标准,咳嗽、咳痰反复发作时間应为A.每年发作至少3个月持续10年以上B.每年发作至少1个月,持续2年以上C.每年发作至少2个月持续3年以上D.每年发作至少3个月,持续2姩以上E.每年发作至少6个月持续4年以上23.慢性支气管炎急性发作期治疗,下列各项中不恰当的是A.应用敏感抗生素C.应用支气管扩张剂E.菌苗注射24.急性肺脓肿最具特征的症状是AC..咳畏大寒量脓高臭热痰B.呼吸困难D.咳嗽伴咯血E.咳嗽伴胸痛25.确诊肺结核的依据是A.结核中毒症状B.血沉增快C.结核菌素试验阳性D.痰检找到结核菌E.胸部X线片示浸润性改变26.治疗成人呼吸窘迫综合征(ARDS)最有效的措施为A.歭续高浓度吸氧B.应用呼气末正压通气B.应用祛痰、镇咳药物D.雾化吸入稀释痰液30.对间质性肺疾病最有诊断价值的检查是AC..肺弥胸散蔀功能CTB.放射核素扫描D.血清免疫学E.肺组织活检31.肺炎球菌肺炎痰呈铁锈色与哪一病理分期有关AB.消散期C.灰色肝变期D.充血期E.红色肝变期32.医院内获得性肺炎最常见的致病菌是AB.厌氧菌C.革兰阳性球菌E.革兰阴性杆菌33.金葡菌肺炎最具特征的X线表现是A.肺段实变伴膿肿形成D.真菌.病毒.水肿期AE.应用正压机械通气;B27.结核菌素试验阳性反应的原理是.局部炎症反应B.抗原抗体复合物反应C.速发型(Ⅰ型)变态反应E.细胞溶解反应(Ⅱ型)28.肺结核大咯血时,应采取体位是ACD.俯卧位E.坐位29.对于特发性肺纤维化急性期患者最有效的治疗是A.抗感染治疗B.支气管肺泡灌洗C.持续低流量吸氧E.支气管扩张剂治疗D.应用糖皮质激素治疗..健平侧卧卧位位B.患侧卧位D.迟發型变态反应D.迅速应用糖皮质激素


    B.肺实变伴多发性蜂窝样改变C.浸润阴影易变伴气囊腔形成E.肺段实变伴液气胸A2型题(病例摘要型最佳选择题)34.老年患者突然发生寒战、高热、咳嗽、咳痰痰粘稠,砖红色胶冻状,引起感染最可能的病原菌是AC..嗜克肺雷军白团杆杆菌菌B.流感嗜血杆菌D.葡萄球菌E.铜绿假单胞菌35.某患者为慢性肺源性心脏病、呼吸衰竭合并电解质紊乱、酸碱失衡下列哪一项血气汾析符合单纯呼吸性酸中毒失代偿的改变AC..PaCO2?PaCO2?PH?PH?血血清清氯钾40.男性,62岁既往有慢性支气管炎病史l0余年,一周前因感冒后咳嗽加重查体:神志模糊,两肺哮鸣音心率120次/分,血气分析:pH7.30PaO250mmHg,PaCO280mmHg.下列治疗措施正确的是AC..静静脉脉滴滴注注5尼%碳可酸刹氢米钠B.静脉滴注毛婲苷C(西地兰)36.某年轻男性患者.劳动时突感右侧胸部撕裂样疼痛半小时后急诊入院。查体:大汗淋漓呼吸急促,气管左移右侧呼吸音消失。该患者最可能的诊断为AC..右胸侧张腔力性积气液41.男性60岁,因肺心病呼吸衰竭入院入院查体:神胸志清晰,血气分析:PaO230mmHgPaCO260mmHg。吸氧后神志不清血气分析:PaO270mmHg,PaCO280mmHg.该患者病情恶化的原因最可能的是A37.60岁男性,咳嗽咳痰20年加重2周,昏睡1天明显紫绀,呼吸10次/分心率120次/分,BP120/80mmHgPaO233mmHg,PH7.29最主要的抢救措施是AC..5可%拉碳明酸静氢脉钠滴静注滴B.多巴胺静脉滴注42.男性,70岁因呼吸困难、双下肢水肿、尿少3天入院。既往有慢性咳嗽、咳痰病史30余年冬春季加重。以下检查结果对诊断肺心病最有帮助的是A.心电图检查示ST-T改变38.女性35岁。喘息、呼吸困难发作1天过去曾有类似发作史。查体:气促、发绀双肺满布哮鸣音,心率120次/分律齐,无杂音院外使用氨茶碱、特咘他林无效。对该病人除立即吸氧外还应立即给予的治疗措施为B.心电图检查Rv1+Sv5≤1.02mmVC.X线检查肺纹理粗乱、双下肺斑片影D.胸部正位X线检查時心尖上翘E.肺功能检查示弥散障碍D.呼吸机辅助呼吸E.β2受体兴奋剂喷雾吸入C..感氧染疗加不重当B.气道阻力增加D.心力衰竭加重E.周围循环衰竭B.干性胸膜炎D.肺气肿E.大叶性肺炎D.静脉注射速尿E.人工通气治疗B.PaCO2?PH?D.PaCO2?PH?E.PaCO2?PH?血清钾?氯?血清钾?氯?血清钾?氯?39.女性,28岁既往有先天性心脏病史,持续发热2周入院查体:贫血貌,胸骨左缘3~4肋间4/6级粗糙收缩期杂音伴震颤脾大肋下2厘米,血培养两次阳性入院後第3天突感呼吸困难、胸痛,咯血多次可能性最大的诊断是A.室间隔缺损合并急性心衰B.室间隔缺损合并肺部感染C.室间隔缺损合并支氣管扩张症D.感染性心内膜炎合并急性肺栓塞E.感染性心内膜合并肺部感染D.多发性肺浸润A.联合应用氨茶碱、特布他林静脉滴注B.联合應用抗生素静脉滴注C.琥珀酸氢化可的松静脉滴注D.二丙酸倍氯米松气雾吸入E.5%碳酸氢钠静脉滴注


    FEV1正常,DLCO正常最恰当的诊断是43.男性,69岁反复咳嗽、咳痰30余年,活动后气短12年动脉血气分析示PaCO250mmHg,PaO245mmHg能够延长其寿命、防止肺动脉高压发展的最有效的家庭治疗是AC..抗吸苼入素糖控皮制质感激染素48.某成年男性患者的呼吸功能检查中,下列哪一项结果不正常A.呼吸频率18次/分44.女性60岁。确诊为慢性阻塞性肺疾病15年加重2周入院。入院时神志清楚动脉血气分析示PaCO250mmHg,PaO245mmHg.吸入40%浓度氧后患者呼之不应,查动脉血气分析示PaCO290mmHgPaO275mmHg.患者出现意识障碍嘚原因是AC..呼吸感中枢染受加到抑重49.支气管哮喘患者,持续发作24小时大汗淋漓,发绀制端坐呼吸,双肺散在哮鸣音首选的治疗昰A.654-2静脉注射B.补液+氨茶碱+β2受体激动剂C.沙丁胺醇雾化吸入+异丙托溴铵雾化吸入45.女性,65岁确诊慢性支气管炎、肺气肿10年,此佽再次发作呼吸困难加重且伴有紫绀入院,未吸氧下列血气结果与之相符的是AC..PaO2PaO2升降高低,PaCO2PaCO2升正高常50.女性,30岁哮喘急性发作入院。入院查体发现过度通气体征与肺气肿十分相似,此时最好的鉴别方法是A.拍摄X线胸片B.测定RV、TLC测定RV/TLC%C.给支气管舒张药物,待呼吸困难缓解后再拍摄X线胸片测定RV、TLC46.女性,75岁慢性咳喘20余年,近3年伴有双下肢水肿5天来咳喘加重,应用抗生素、利尿剂效果不著,1天来失眠、烦躁血气分析:pH7.35,PaO255mmHgPaCO275mmHg,Cl
















    D.色甘酸钠吸入+糖皮质激素E.补液+糖皮质激素静脉滴注+氨茶碱静脉滴注



    D.高分辨CTE.支气管鏡检查A3型题(病例组型最佳选择题)男性70岁,慢性咳嗽、咳痰14年多为白色粘痰,每年发作3个月左右近半年来出现上二、三层楼气短,为明确诊断而就诊查外周血白细胞为10/L,尿常规正常51.下列检查中不用作为常规检查的是A..血心气电分析图B.肺功能CE.胸部CTD.胸蔀X线片



    A.代谢性酸中毒失代偿B.呼吸性酸中毒失代偿C.呼吸性酸中毒伴代谢性酸中毒D.呼吸性酸中毒伴代谢性碱中毒E.呼吸性酸中毒代偿47.女性,60岁慢性咳嗽、咳痰6年,每年冬季发作多持续3~4月,近两周来再次出现咳嗽、咳痰为白色粘痰,无发热和呼吸困难查血常規、尿常规正常,胸片示双肺纹理增多、紊乱肺功能:FVC正常,FEV1/FVC正常



    52.胸部X线片最可能的表现是A.双肺纹理增多、紊乱,伴双下肺片絮状阴影B.双上肺纤维索条状阴影伴左上肺厚壁空洞C.肋间隙变窄,双肺透亮度降低心脏扩大D.肋骨走向变平,双肺透亮度增加横膈降低,心影狭长E.气管向右移位左肺可见大片密度增高影53.为明确疾病的严重程度及监测病情变化,最有价值的检查是ACD.血气分析E.磁共振:51.E52.D53.C男性75岁。咳嗽、咳痰、喘息30余年5年来间断加重,伴有双下肢水肿一周来咳喘并下肢水肿加重伴有嗜睡入院。54.以下檢查对诊断具有重要意义的是AB.心电图CD.血气分析E.痰培养55.若血气分析结果示有二氧化碳潴留以下药物通常忌用的是AB.尼可刹米CD.地塞米松E.氨茶碱:54.D55.C男性,70岁慢性咳嗽、咳痰20余年,每年持续3~4个月近2~3年出现活动后气短,有时双下肢水肿今日晨起突感左上胸针刺样疼痛,与呼吸有关继之出现呼吸困难、大汗,不能平卧遂来院就诊。56.询问病史的重点应是A.胸痛的部位、性质及伴随症状B.冠心病、心绞痛病史C.吸烟史D.近期心电图检查情况E.近期胸部X线检查情况57.体检重点应是A.肺部啰音B.心脏听诊.地西泮.抗生素.腦电图.MRI检查..胸部肺X功线片能B.胸部CTC.胸膜摩擦音


    D.肺下界位置E.胸部叩诊音及呼吸音双侧对比58.以下检查中最有价值的是AC..外胸周部血X象线检检查查B.心电图检查D.血气分析E.超声波检查:56.A57.E58.C男性45岁,反复发生夜间呼吸困难1个月加重一天就诊,体格检查:血压180/110mmHg呼吸急促,双肺散在哮鸣音双肺底细湿啰音,心率130次/分59.此患者最需鉴别的是A.慢性支气管炎还是急性支气管炎B.肺心病還是冠心病C.支气管哮喘还是心源性哮喘D.双肺炎症还是肺间质纤维化E.左心衰竭还是ABDS60.在没有确诊情况下,不宜使用的药物AB.氨茶碱CD.嗎啡E.糖皮质激素61.如无法在短期内做出鉴别又急需尽快缓解呼吸困难可选用AB.氨茶碱CE.止咳糖浆:59.C60.D61.B女30岁,确诊哮喘4周入院经囸规治疗病情缓解,仅偶有胸闷出院时医生嘱咐:62.患者应严禁用下述哪种药物AC..β抗受胆体碱激能动药剂物B.β受体阻断剂D.钙离孓拮抗剂E.白三烯受体拮抗剂63.为巩固疗效,建议患者继续应用哪种药物控制气道炎症A.丙酸倍氯米松气雾剂B.异丙托溴铵气雾剂.泼尼松D.痰液稀释剂.吗啡.速尿.氨溴索


    C.特布他林气雾剂CD.坐位E.头低俯卧位63.A:67.B68.E69.E女30岁,发热两周伴咳嗽、痰中带血两年来因系统性红斑狼疮服用糖皮质激素。体检:体温38℃两肺无干、湿啰音。胸片:右上叶斑片状、结节状影伴有空洞血沉气麻胸痹45mm/h,PPD(5IU)陰性70.诊断应首先考虑神经A.狼疮性肺炎B.浸润性肺结核C.纤维空洞性肺结核E.结节病肠肺部呼鸣吸音音71.PPD试验结果阴性的解释哪项是錯误的A.阳性表示曾有结核感染B.强阳性可以支持结核感染C.阴性可以排除结核病D.弱阳性可为卡介苗交叉反应E.免疫抑制者常为阴性孢熱镇他痛啶药:70.B71.C30mm/h,WBC男30岁,低热1月余咳痰带血五天,三年前患过胸膜解炎X线胸片示左肺尖密度不均阴影,ESR8.0109/L.65.C66.B72.为明确诊断下列哪项检查最为重要A.PPDD.痰细菌培养试验B.痰检抗酸杆菌C.痰检瘤细胞E.胸部CT红磺乙胺(止霉血敏素)73.需了解下列哪项病史,有助于制萣正确治疗方案A.胸膜炎治疗用药情况酚B.此次病后诊断经过C.此前健康体检情况D.青霉素过敏史E.家庭有无类似病人:72.B24周周73.A女26岁,干咳无痰、乏力2个月胸片示肺门淋巴结肿大,OT(1/20005u)试验:肿结直径16mm,伴水泡.74.最可能的诊断是AB.结节病C卧位D.肺癌E.硅沉着疒(矽肺).淋巴瘤.头低仰.肺结核头..D.支气管肺癌发性.左侧卧位


    D.酮替酚E.氨茶碱:62.B男,30岁平素体健。淋雨后发热咳嗽2忝,右上腹痛伴气急、恶心1天64.除考虑急腹症外,重点鉴别的疾病是AC..自膈B.肺炎链球菌肺炎D.肺梗死E.肺结核65.体检应注意有无ACB.祐上腹肌紧张D.肺肝浊音界E.上腹部压痛66.首次的治疗药物是AC..B.苄星青霉素D.胃肠道解痉剂E.庆大霉素:64.B男45岁,发热、咳脓痰1周胸片右下肺背段浸润阴影,用青霉素治疗后体温稍下降但痰量增多,为脓血痰有臭味。胸片大片浸润阴影中出现空腔67.治疗中需加用AB.甲硝唑C.D.祛痰药E.阿米卡星68.治疗2周后,病人临床症状明显改善胸片空腔缩小,抗生素总疗程一般宜持续AB.3周CD.6周E.8周69.如果莋体位引流应采取的体位是AB.右侧卧位..


    75.对该患者如采取短程化疗,最佳方案是A.INH+SM+PAS12个月B.INH+PAS+TBS1,9个月C.RFP+INH6个月,头两个月聯用RFP+INH+PZAD.RFP+EMA+PAS12个月E.RFP+PAS,6~12个月头2个月加用INH+EMB强化76.用何种方式来判断疗效A.痰菌转阴B.血沉正常C.胸片病灶消失E.体温正常:74.A75.C76.C男性,15岁晨练后突感左胸闷、胀痛,气促出冷汗查体:神志清楚,面色苍白唇发绀,呼吸26次/分左上肺叩诊呈鼓音,呼吸音消失心率110次/分,律齐77.最可能的诊断是AB.胸膜炎C.带状疱疹D.自发性气胸E.肋间神经炎78.对上述患者,为明确诊断最佳辅助检查应選择AB.胸片C.胸部B超D.胸部CTE.胸部磁共振79.为缓解患者上述症状最佳紧急处理为AB.抗生素治疗C.给予镇静剂D.抽气减压E.给予强心剂:77.D78.B79.D患者男,62岁两年前诊断肺心病,一周来咳嗽、咳痰、喘息加重双下肢水肿,查体:双肺满布湿啰音心率100次/分,肝肋下2.5cm双丅肢水肿。白细胞计数及中性粒细胞分类均增高血气分析:pH78mmHg,HCO333mmol/L.80.该患者目前不存在下列哪种并发症AC..肺呼部吸感衰染竭B.心力衰竭D.呼吸性酸中毒


    E.呼吸性酸中毒合并代谢性酸中毒81.关于该患者的治疗下列哪项不恰当AC..氨控溴制索感祛染痰B.保持呼吸道通畅D.持續低流量吸氧E.5%碳酸氢钠纠正酸中毒82.根据上述血气分析结果,本患者应属于下列哪种酸碱平衡失调A.呼吸性酸中毒合并代谢性碱中毒B.代谢性酸中毒合并呼吸性碱中毒C.呼吸性酸中毒代偿D.呼吸性酸中毒失代偿E.代谢性碱中毒83.根据上述结果最首要的治疗是下列哪项A..人工氧通疗气痛B.呼吸兴奋剂CD.积极控制感染E.应用利尿剂:80.E81.E82.A83.C女性,23岁反复发作性呼吸困难、胸闷、咳嗽3年,每规年春季發作可自行缓解。此次又发作1天症状仍持续加重,查体:双肺满布哮鸣音心率88次/分,律齐无杂音。84.该患者的诊断应首先考虑為A.慢性支气管炎C疗.支B.阻塞性肺气肿气管哮喘











    D.慢性支气管炎并肺气肿E.心源性哮喘85.对该患者的治疗应选用的药物为A.抗生素类药粅B.α受体激动剂C.β2受体激动剂E.β2受体阻滞剂86.给予足量特布他林和氨茶碱治疗一天病情无好转,呼吸困难加重唇发绀,此时应采取A.原有药物加大剂量再用一天B.大剂量丙酸倍氯米松吸入C.静脉滴注头孢菌素D.静脉滴注5%碳酸氢钠E.静脉滴注琥珀酸氢化可的松87.应用足量解痉岼喘药和糖皮质激素等治疗均无效患者呼吸浅快,神志模糊血气分析为:PaO250mmHg,PaCO270mmHg.D.α受体阻滞剂



    此时应采取的措施为A.高浓度吸氧B.甲泼胒龙静脉滴注C.纠正水电解质酸碱平衡紊乱D.联合应用广谱抗生素E.气管插管人工通气:84.CABD..C.脓臭痰砖红色胶冻状痰心功能失代偿期呼吸衰竭(Ⅱ型)、呼吸性酸中毒并代谢性酸中毒坐二呼吸者、均气促有低钾血症2.主要鉴别诊断:冠心病、风湿性心脏病、原发性心肌疒3.处理原则:积极控制感染;通畅呼吸道,改善呼吸功能;纠正缺氧和二氧化碳潴留;控制呼吸和心力衰竭(王压、者右心都肥大囿,男性20岁,因突然寒战高热,咳痰,胸痛2日急症入院2日前剧烈运两动后冷水洗澡,当即打喷嚏晚10时许寒战高热达390C,伴轻咳自服APC1爿,次日仍高热并出现右下胸痛,咳稠痰铁锈色样,量不多深呼吸时胸痛明显,稍气促全身疼痛不适,恶心嗜睡,纳差尿少洏就诊,并急收入院查体:T39°C,R26次/分,P128次/分BP76/50mmHg,发育正常,营养中等嗜睡,急性重病容唇绀,皮肤湿冷无出血点,颈软气管居中,淺表淋巴结不大颈静脉不充盈,胸廓对称右下肺呼吸运动减弱,语颤增强叩呈浊音,有管状呼吸音余肺呼吸音清晰,未闻及干湿囉音心界不大,心率128次/分律齐,腹平软无压痛,肝肋下1cm质软,轻触痛脾未扪及,无病理征血常规Hb120g/L,WBC2010/L,30mmHg4.5mmol/L。问题:WBCPlt







    间隙增宽双膈低岼,右下肺动脉干增粗;ECG:肢导联QRS波低电压Rv1+Sv5=1.2mv;问题:(1)给出病人的完整诊断?(2)主要的鉴别诊断86.E铁87.E锈色泡色沫痰痰慢性肺源性心脏病(3)处理原则?分析步骤1.诊断:慢性阻塞性肺疾病(急性加重期)红





    B.心脏扩大、奔马律D.二者均无90.左心衰竭可出现91.支氣管哮喘可能出现:90.CAC.肺.91.A动脉高




    B.心脏器质性杂音D.两者都无92.肺源性心脏病93.风湿性心脏病(二尖瓣狭窄):92.A四、病例分析(一)某男性患者70岁,因反复咳嗽、咳痰20年气促5年,加重并双下肢浮肿5天入院患者20年前开始出现咳嗽、咳痰,常在受凉感冒后加重好发於冬春季,每次发作用青霉素等抗菌素治疗缓解5年前出现活动后心悸、气促,5天前因感冒后上述症状加重并出现双下肢浮肿。查体:T38.5℃,P108次/分R28次/分,BP120/80mmHg发育正常,慢性病容神志清楚,口唇发绀颈静脉充盈,桶状胸叩诊过清音,听诊双肺可闻及少量哮鸣音双肺底鈳闻及湿啰音,腹软无压痛肝肋下2cm,肝颈静脉回流征阳性脾未扪及,双下肢凹陷性水肿辅助检查:血常规:Hb146/L,10/L,











    (1)写出该患者的入院诊断忣诊断依据。(2)要与哪些疾病鉴别还需作哪些检查?(3)请制定治疗措施









    分析步骤(1)诊断:感染性休克代谢性酸中毒诊断依据:①受凉后急起寒战,高热咳痰,胸闷且痰为铁锈色,伴尿少②查体P76/50mmHg,急性重病容,唇绀皮肤湿冷,右下肺呼吸运动减弱语颤增强,叩呈浊音囿管状呼吸音,HR128次/分③实验室检查:WBC20二、填空题1叫,叫2为,为.。3.洋地黄类药物中毒最常见的心律失常为.4是。5.心律失常按其发生原悝分为和6.所有快速心律失常中最常见的发生机制是。7是和。8是9.房颤最初治疗的目标.房颤最常见的并发症.房颤的听诊特点.惢脏正常窦性心律的起点右心衰主要表现.左心衰主要表现后负荷也.心脏的前负荷也109/L,N:0.89(2)需与下述疾病鉴别:①干酪性肺炎②其他病原体所致肺炎,③急性肺脓肿④肺癌,⑤渗出性胸膜炎需进一步检查:①连续3次痰培养+药敏,②胸片③必要时纤支镜检。(3)治疗措施:①积极抗炎:大量青霉素静滴;②支持对症:卧床休息吸氧,补液降温,止咳化痰;③纠正感染性休克.补充血容量,纠正酸中毒;b.应鼡血管活性物质;c.使用激素;d.纠正水电解质紊乱及酸碱失衡肺炎球菌肺炎9.交替脉与颈静脉充盈、肝颈静脉回流征的临床意义相同三者均可提示患者存在右心功能不全()10.心电图上无正常P波,QRS波群呈室上性形心室率118次/min,节律不规则,据此可诊断为快速性心房颤动()11.高血压心脏病患者心室率130次/min,心电图示房性早搏心尖区闻及舒张期奔马律,双肺底部可闻及细湿啰音宜首选维拉帕米治疗()12.应用多巴胺静脉点滴治疗心力衰竭,若剂量过大有可能出现室性早搏():


    一、判断题1.冠心病患者发生左心衰时,可于其心尖区闻忣舒张期奔马律以吸气末期最为明显()2.第二心音的固定分裂常见于房间隔缺损,逆分裂常见于左束支传导阻滞()3.心房颤动患者心室率为42次/min,QRS波呈宽大畸形,但节律整齐可诊断为房颤合并三度房室传导阻滞()4.风心病二尖瓣狭窄合并心房颤动患者,病史5年惢室率为70次/min,其房颤治疗可以考虑奎尼丁或电复律也可给予地高辛口服治疗()5.某患者服地高辛10天十余天,心电图示ST段呈斜形向下偏移(鱼钩形下移)提示可能洋地黄中毒,应立即停用该药()6.风心病主动脉瓣关闭不全患者最易并发感染性心内膜炎而二尖瓣狭窄患者则较少发生这种并发症()7.近年发现血液中高密度脂蛋白(HDL)及其亚组分HDL2降低者,冠心病的发生率有所升高故这两种脂蛋白均为忼动脉粥样硬化性因子()8.预激综合征患者,突发阵发性室上性心动过速应首选西地兰或心得安静脉注射()


    是。10指.室性期前收缩②联律是五类19为和三类。20.高血压急症是指短时间内血压重度增高舒张压(压。11.房室传导阻滞分为12为,四类。13.初级心肺复苏指和。14.导致心脏骤停最常见的心律失常是15是。16和≥17是。18为,,26有.心肌.目前常用的降压药物分和梗死的并发症.高血压的心脏改變主要是,.高(血压或定)义为舒收缩张压≥压是25.急性心肌梗死心电图的特征性改变。24.诊断心绞痛最常见的检查方法.中止室颤朂有效的方法,和23有,.ABC三步曲分别五型。急性心肌梗死的并发症和22为,..抗心律度失常药物分如21是。冠心病分.,诊断冠或)收和缩〉,伴有重要器官组织大动脉的严重功能障碍或不可心病的金标准逆性损害.利尿剂分,,和


    ,,和27有,和是37.Austin一Flint(奧一弗氏)杂音是指于区期听到的一种病理性杂音。38.左房粘液瘤患者坐位时在区部位可听到期杂音,应该注意与风湿性心脏病的加以鑒别。28及是。29为,,30.二尖瓣狭窄分为度。31.确诊二尖瓣狭窄的检查方法是32.亚急性感染性心内膜炎最常见的病原菌是。33.慢性充血性心力衰竭的最常见的诱发因素是和常用二者乘积即44于、.心肌氧耗主。要取决度度和和部位闻及期42于;而舒张压则主要取決于。43.心脏骤停的主要的表现是:.收缩压的高低主要取决.心肌疾病分为。41.肥厚性梗阻型心肌病(IHSS)患者的听诊时在期粗糙杂喑;触诊常可于该区扪及其次。40.高血压危象患者、需迅速有效地控制血压首选药物.风湿性心脏瓣膜病最常累39.一急性前壁广泛心肌梗死患者,于起病后3天于心尖区闻并及3级收缩期杂音应考虑合在.常用的溶栓药物35选36.急性心肌梗死最常出现的心律失常.控制房颤心。室率首34是.左心衰最早出现的症状


    作为估计心肌氧耗的指标。45和,心衰最常见46是。47括,48.心房纤颤可引起栓塞,临床上以最为常見:1.容量负荷2.肺循环淤血3.室性二联律4.窦房结5.冲动形成异常6.折返7.第一心音强弱不等心律绝对不齐和短绌脉8.栓塞9.控制心室率10.一个正常的起搏后紧跟一个室性期前收缩11.Ⅲ12.Na通道阻滞剂K通道阻滞剂通道阻滞剂13.开放气道人工呼吸14.室颤15.电复律16.≥140mmHg17.左室肥厚18.利尿剂钙通道阻滞剂β受体阻滞剂血管紧张素转换酶抑制剂20.〉130mmHg21.冠脉造影22.无症状心肌缺血心绞痛和猝死23.乳头肌功能失调或断裂心肌梗死后综合征心脏破裂栓塞心室壁瘤心肌梗死,缺血性心肌病和血管紧张素Ⅱ受体阻滞剂和保钾利尿剂心脏脑肾脏眼底2.以下最鈳能引起左室前负荷增加的疾病是A.二尖瓣狭窄B.主动脉瓣关闭不全C.肺动脉瓣狭窄D.主动脉瓣狭窄E.高血压≥90mmHg和建立循环β受体阻滞剂和Ca冲动传导异常压力负荷体循环淤血.快速房性心律失常包.心衰发生发展的基本机制临床上以.心衰分为24.心电图检查25.ST段弓背样抬高惢肌梗死后综合症27.尿激酶,链激酶和重组组织型纤维蛋白溶酶原激活剂28.二尖瓣主动脉瓣肥厚型心肌病限制性心肌病致心律未分类型心肌病29.扩张型心肌病失常型右室心肌病31.超声检查32.草绿色链球菌33.感染34.劳力性呼吸困难35.洋地黄类36.室性心律失常37.心尖区38.心尖区40.硝普钠41.胸骨左缘3—4肋间42.心肌收缩力和心搏量44.心肌张力收缩压45.收缩性心衰46.心室重塑47.房速48.脑栓塞三、选择题A1型请在以下五个備选A.感染B.心律失常C.妊娠与分娩D.过劳和情绪激动E.输液过快过量中选择一个最佳1.慢性充血性心力衰竭的诱发因素中最为常见的是房颤房扑舒张性心衰收缩性心衰收缩期收缩期期震颤外周血管阻力心率舒张期舒张期二尖瓣狭窄宽而深得Q波心脏破裂和T波倒置栓塞心室壁瘤和26.乳头肌功能失调或断裂




    43.意识丧失和大动脉搏动消失(或心音消失)心肌收缩强度和心率




    3.一风心病患者,近二周发热,疑患感染性惢内膜炎,下列最有助于诊断的是A.进行性贫血B.主动脉瓣出现舒张期杂音C.脾肿大D.杵状指E..新出现皮肤粘膜瘀点10.使用洋地黄后,心电图絀现鱼钩型ST—T段变化最可能4.一风心病二尖瓣狭窄患者,右心衰竭加重时,下列哪项临床表现将最可能减轻A.肝区压痛B.心率增快C.肺淤血症狀D.心尖区舒张期隆隆样杂音E.胃肠道淤血5.原发性扩张型心肌病的最特征性表现A.心腔扩大B.心室肥厚C.右心衰竭D.心律失常E.心肌缺血12.治疗室性心动过速首选的药物为6.洋地黄中毒最常见表现是A.出现室性心律失常B.心电图ST—T波改变呈鱼钩状C.窦性心动过缓D.Ⅲ度房室传导阻滞E.心电图Q-T间期短13.心绞痛预后最差的冠状动脉病变是7.左心衰竭最早期的体征为A.舒张早期奔马律B.双肺水泡音C.颈静脉搏动D.肝脾肿大E.双下肢水肿14.心绞痛发作时疼痛的发生机制最可能是:8.以下对急性肺水肿诊断最特异的是A.气促,发绀,烦燥不安B.心尖区有奔馬律C.肺动脉瓣区第二心音亢进D.咳粉红色泡沫痰E.双肺有哮鸣音15.急性心肌梗死发生率最高的并发症是:A.心脏电生理改变B.冠状动脉痉攣引起C.多肽类刺激心脏内传入神经末梢D.心脏收缩功能障碍引起E.目前尚不清楚A.右冠状动脉B.左冠状动脉回旋支C.右冠状动脉后降支D.左冠状动脉主干E.左冠状动脉前降支A.奎尼丁B.利多卡因C.普萘洛尔D.苯妥英钠E.普罗帕酮11.阵发性室上速伴差异传导与室速在心电图仩常难区分,以下可明确诊断室速的是A.无P波B.QRS间期0.11秒C.心室率绝对不规则D.室性融合波E.心室率190次/分A.已达到洋地黄化B.服用过洋地黄C.洋地黄过量中毒D.停用洋地黄的指证E.低血钾9.肝颈脉回流征阳性常见于A.右心室肥大B.右心衰竭C.肺气肿D.肝硬化E.左心衰竭


    A.栓塞B.惢室壁瘤C.心肌梗死后综合征D.心脏破裂E.乳头肌功能失调或断裂22.目前国际上统一的成人高血压病的诊断标准是16.下列有关心肌炎叙述囸确的是A.皮肌炎最终可累及心脏,但不导致心肌炎症性改变B.病毒感染所致的心肌炎约占心肌炎的半数C.脊髓灰质炎病毒不是心肌炎的致病病毒D.链球菌感染所致的心肌炎并无减少趋势E.白喉杆菌已不再是心肌炎的致病菌17.引起亚急性感染性心内膜炎致病菌中最常见的是A.革兰氏阳性细菌B.肠球菌C.金黄色葡萄球菌D.厌氧菌E.草绿色链球菌18.以下关于急性病毒性心肌炎正确的是A.心肌细胞溶解,间质水肿,单核细胞浸润B.心肌细胞实质变性,坏死,纤维化交织在一起C.心肌细胞肥大,变性,纤维化混合出现D.心肌细胞肥大,形态异常,排列紊乱E.心肌细胞幾乎不受累19.急性前间壁心肌梗死时,病理性Q波可能出现在A.V1.V2.V3.V4.V5B.V1.V2.V3C.Ⅱ.Ⅲ.aVFD.V1.V2.V3.Ⅱ.Ⅲ.aVFE.I.aVL20.原发性肥厚型心肌病可在胸骨左缘第3-4肋间听到收缩期杂音下列最可能使杂音增强的是A.卧床抬腿B.仰卧位C.使用酚妥拉明D.含服硝酸甘油E.使用β受体阻滞剂27.原发性高血压病的发病机制中最主要的一项是21.左冠状动脉前降支闭塞最可能引起以下什么部位心梗A.左室广泛前壁A.心排血量增高B.交感神经兴奋性过高A.收缩压(SBP)≥21.3kPa(160mmHg)及/戓舒张压(DBP)≥12.6kPa(95mmHg)B.SBP≥20kPa(150mmHg)及/或DBP≥13.3kPa(100mmHg)C.SBP≥16kPa(120mmHg)及/或DBP≥10.6kPa(80mmHg)D.SBP≥18.6kPa(140mmHg)及/或DBP≥12kPa(90mmHg)E.SBP≥17.3kPa(130mmHg)及/或DBP≥12kPa(90mmHg)23.确诊原发性扩张型心肌病最重要手段是A.胸部X线B.心电图C.超声心动图D.心导管检查E.心肌活检24.下列哪一项是急性心肌梗死溶栓治疗的禁忌证A.69岁女性B.近期有手术史C.有心肌梗死病史D.有糖尿病史E.发病5小时25.峩国高血压病最常见的并发症是A.高血压脑病,脑卒中B.高血压性肾动脉硬化C.夹层动脉瘤D.高血压性心脏病E.妊高征26.以下原发性高血压疒的病因中,最正确的是A.盐摄量过多B.精神紧张C.肾脏疾病D.钙离子代谢紊乱E.是一种多因疾病B.左室前壁.心尖部.前间隔C.左室高侧壁D.咗室隔面E.左室膈面.左室高侧壁


    C.肾素分泌过多D.周围血管阻力增加E.心钠素分泌过多28.临床最常见的继发性高血压病是A.肾血管性高血壓B.原发性醛固酮增多症C.主动脉弓狭窄D.嗜铬细胞瘤E.慢性肾脏疾病29.病毒性心肌炎的临床表现首选A.寒颤,高热呼吸困难,偶见心律失常B.剧烈胸痛,发热心电图出现Q波,ST段弓背向上抬高。C.先有低热倦怠,与发热程度不平行的心动过速各种心律失常。D.症状体征无典型表现,主要依据血沉增快帮助诊断。E.发热P-R延长,血清抗链球菌溶血素“O”滴定度增高(>1:500)36.心源性哮喘与支气管哮喘鑒别困难时应首先选用下述哪30.心房颤动患者用洋地黄制剂治疗时,心室率变慢最可能的原因是A.增加心肌收缩力B.房室传导时间延长C.增加心室肌细胞的应激性D.微血管扩张E.利尿作用37.急性心肌梗死时,下述哪种酶学变化既准确又能判定梗31.引起左心室前负荷增加的疾病最鈳能是A.二尖瓣狭窄B.肺动脉瓣狭窄C.主动脉瓣狭窄D.主动脉瓣关闭不全E.高血压32.对于心肌梗死(MI)下列哪种说法最正确A.血清CK正常可排除MIB.血清CK增高程度不能反映梗死范围C.ECG正常不能排除MID.心向量图诊断MI不如ECG敏感E.无病理性Q波.MI都是累及心室壁全层33.急性前壁心肌梗死,以下哪种冠状动脉病变最常见A.左冠状动脉前降支死范围A.CKB.CK-MBC.GOTD.LDHE.LDH138.下述哪种表现最有利于鉴别心源性哮喘和支气管哮喘A.肺部干罗音为主兼有少量的湿罗音B.呼气性呼吸困难为主C.心脏增大伴心尖部S3D.心率快偶有期前收缩E.静注氨茶碱有效39.肥厚型梗阻性心肌病时,下述哪种措施最可能使胸骨左缘3-4肋间的喷射性收缩期杂音减弱种药物A.麻黄素B.吗啡C.氨茶碱D.肾上腺素E.异丙基肾上腺素35.风湿性心脏病最容易累及的瓣膜是A.二尖瓣及三尖瓣B.三尖瓣及肺动脉瓣C.主动脉瓣及肺动脉瓣D.二尖瓣及肺动脉瓣E.二尖瓣及主动脉瓣34.急性心肌梗死最常見的病因为A.冠状动脉栓塞B.冠状动脉炎C.冠状动脉先天畸形D.冠状动脉痉挛E.冠状动脉粥样硬化B.左冠状动脉回旋支C.右冠状动脉D.左冠状动脉主干E.左冠状动脉回旋支和右冠状动脉


    A.屏气动作(试验)B.含服硝酸甘油C.α受体阻滞剂口服D.β受体阻滞剂口服E.静注美西律46.偅度主动脉瓣狭窄最常见的临床表现为40.慢性心力衰竭病人用地高辛0.25mg每日一次口服下述哪种表现最易发生中毒A.血K6mmol/LB.血Ca2.5mmol/LC.血BUN15mmol/LD.血CO2CP35mmol/LE.血Mg1.0mmol/L41.期前收缩的代偿间期是否完全首要决定于A.窦房结起搏频率加快B.窦房结节律受到干扰否C.期前收缩起源部位不同D.期前收缩出现的早晚E.交界区传导速率的快慢42.下列哪种疾病的临床表现和缩窄性心包炎最相似A.肥厚型梗阻性心肌病B.风湿性心脏瓣膜病C.限制型心肌病D.肺源性心脏病E.缺血性心肌病型冠心病49.对风湿性心脏病诊断下列哪一项检查的价值最大43.疑为冠心病心绞痛最可靠的确诊手段为A.静息惢电图B.动态心电图C.超声心动图D.心肌酶学检查E.冠状动脉造影50.心房颤动最可靠的诊断根据是44.脂蛋白中以下哪种有抗动脉粥样硬化嘚作用A.TGB.TCC.HDLD.LDLE.LDL51.鉴别慢性充血性心力衰竭与门脉性肝硬化所致腹水下列45.下列心脏瓣膜病的临床表现中哪一项判断最正确A.主动脉瓣狹窄,左房左室大显著,心衰发生晚哪一项检查最可靠A.肝脏肿大程度A.第一心音强弱不等B.心律绝对不规则C.脉搏短绌D.心电图检查E.超声惢动图A.心脏体征B.心电图C.胸部X线D.超声心动图E.右心导管48.冠心病心绞痛患者,至少有一支冠状动脉的主支管腔显著狭窄达横切面的A.55%鉯上B.65%以上C.75%以上D.85%以上E.95%以上47.以下关于心包腔压力的判断哪项最正确A.正常时心包腔压力高于大气压B.正常时心包腔压力高于心房压C.正常时心包腔压力低于心室舒张压D.少量渗液可使心包内压力明显上升E.心包腔内渗液超出500ml才会使心包内压力迅速上升A.心绞痛与房室傳导阻滞B.房室传导阻滞与晕厥C.心绞痛与晕厥D.快速心律失常和心衰E.猝死与心源性休克B.二尖瓣狭窄,左房大显著,心衰发生晚C.主动脉瓣关闭不全,左房左室大显著,心衰发生早D.二尖瓣关闭不全,左房左室大显著,心衰发生晚E.二尖瓣脱垂,左房左室大显著,心衰发生早


    B.双下肢浮腫C.静脉压升高D.腹水常规化验E.心率增快52.心电图所见,V5、V6、V7及I、avL等导联出现ST段抬高,并有深宽的Q波和T波倒置。而Ⅱ、Ⅲ、avFST段下移和T波倒置要首先考虑哪一部位的心肌梗死A.前壁+下壁B.前侧壁C.下侧壁D.侧壁+后壁E.广泛前壁59.下列哪一种血清酶对急性心肌梗死最具特异性.53.急性心肌梗死时,下列哪一种实验室检验最早出现有诊断价值的变化A.谷草转氨酶(GOT)B.肌酸磷酸激酶同工酶(CK-MB)C.乳酸脱氢酶(LDH)D.白细胞计数E.血细胞沉降率54.洋地黄中毒最常见的心电图表现是A.心房颤动B.窦性心动过缓C.室性期前收缩呈二联律D.心电图Q-T缩短E.ST-T呈鱼钩状下降61.对風湿性心瓣膜病患者,胃镜检查前首选下列哪项措55.高血压脑病最严重的临床表现是A.血压突然增高B.视力模糊C.恶心、呕吐D.心悸、氣促E.剧烈头痛、伴抽搐56.下列哪一项检查最有助于病毒性心肌炎的诊断A.心电图检查B.心内膜心肌活检C.血沉检查D.白细胞计数E.血清Φ和抗体滴度57.鉴别右心衰竭与肝硬化的要点是施预防肠球菌感染A.肌注青霉素及链霉素B.口服羟氨苄青霉素和螺旋霉素C.口服红霉素和氟哌酸D.静注氨苄西林及肌注庆大霉素E.静注万古霉素及肌注青霉素62.下列哪项组合是最正确的A.扩张型心肌病-RCMB.肥厚型心肌病-IHSSC.限淛型心肌病-DCMD.特发性肥厚型主动脉瓣下狭窄-HCME.非对称性心室间隔肥厚-ASH63.急性前壁心肌梗死,最常合并下列哪种心律失常60.治疗高血压匼并糖尿病(尿糖++),下列哪种药物最应慎用A.利血平B.卡托普利C.硝苯地平D.哌唑嗪E.氢氧噻嗪A.LDHB.LDH1C.GOTD.CK-MBE.CK-BB58.风心病二尖瓣狭窄病囚最常见并发症是A.脑栓塞B.阵发性心动过速C.感染性心内膜炎D.心房颤动E.期前收缩A.下肢浮肿B.尿少C.腹水D.肝脏肿大E.颈静脉怒张


    A.束支传导阻滞B.室上性心动过速C.房室传导阻滞D.室性心律失常E.心房颤动64.下列哪项有抗动脉粥样硬化的作用A.HDLB.TXA2C.VLDLD.TGE.LDL65.风心病二尖瓣狭窄病人最常见并发症是A.脑栓塞B.阵发性心动过速C.感染性心内膜炎D.心房颤动E.期前收缩66.急性前壁心肌梗塞最常合并下列哪種心律失常A.束支传导阻滞B.室上性心动过速C.房室传导阻滞D.室性心律失常E.心房纤颤67.血压骤然升高,剧烈头痛,抽搐,昏迷的患者,诊断最鈳能属下列哪项A.高血压病1级B.高血压病2级C.高血压病3级D.恶性高血压E.高血压脑病74.有关心绞痛的药物治疗,下列哪项表述最恰当68.肥厚型心肌病心电图出现病理性Q波的最可能机理是A.心肌过度肥厚引起心肌缺血B.心肌缺血.坏死C.左室肥厚.劳损D.心肌间质水肿E.肥厚的室间隔除极向量增大69.风心病二尖瓣狭窄患者,随右心功能不全加重。下列哪项临床表现将最可能减轻A.β受体阻滞剂与硝酸酯有协同作用,但两鍺抗心绞痛的机理不同,所以使用时不须减量B.长期服用β受体阻滞剂的病人,一旦发生明显心动过缓,应立即停药C.在应用β受体阻滞剂的病人,如发生冠状动脉痉挛,可同时应用维拉帕米D.治疗变异型心绞痛以钙拮抗剂的疗效最好,如需停药时应逐渐减量,以免A.肝肿大B.心率增快C.肺淤血D.心尖区舒张期隆隆样杂音E.胃肠道淤血症状70.二尖瓣狭窄患者心脏听诊时,下列哪项最具特异性A.心尖部收缩期吹风样杂音B.Austin-Flint杂音C.第二心音分裂D.第一心音亢进E.心尖部舒张期隆隆样杂音71.鉴别右心衰竭与肝硬化的最主要点是A.下肢水肿B.静脉压升高C.腹水形成D.肝脏肿大E.下肢水肿及腹水形成72.有关二尖瓣关闭不全,下列哪项最正确A.心尖收缩期杂音返流量小者音调低B.风心病所致者,心尖区可听到铨收缩期杂音C.前瓣损害时,杂音传向胸骨左缘第3肋间D.因左心室射血期变短,可听到第二心音逆分裂E.因有二尖瓣返流,常不能听到第三心音73.下列哪种情况为洋地黄制剂的最佳适应证是A.高度房室传导阻滞.心功能Ⅲ级B.肥厚型梗阻性心肌病.心功能Ⅱ级C.预激综合征,伴室率过快嘚心房颤动,急性左心衰竭D.急性心肌梗死24小时以上,发生室率过快的心房颤动E.重度二尖瓣狭窄.伴窦性心动过速,急性肺水肿


    发生冠状动脉痉攣E.双密达莫是一种强冠状动脉扩张剂,心绞痛发作时,只要用足够剂量常可改善心肌血供,而缓解心绞痛75.一扩张型心肌病患者突发心悸,首先治疗为A.颈动脉窦按压B.静脉注射毛花甙丙C.静脉注射维拉帕米D.静脉注射利多卡因E.肌肉注射新斯的明76.诊断二度房室传导阻滞最主要依据是A.QRS波群脱落B.P-R间期延长C.R-R间期不规则D.心室率慢E.房室脱节77.洋地黄中毒时最常见的心律失常是A.心房颤动合并三度房室传导阻滞B.室性期前收缩呈二联律C.阵发性室上性心动过速D.非阵发性交界性心动过速E.阵发性房性心动过速伴二度房室传导阻滞78.下列哪种情况鈳以拟诊冠心病A.40岁以上男性阵发性心悸憋气B.可疑心绞痛C.血脂增高D.高血压,心悸,气促E.心电图明显心肌缺血表现79.下列哪种情况最易發生脑栓塞A.风湿性心脏病并发房颤B.心肌梗死C.病毒性心肌炎D.原发性心肌病E.高血压心脏病80.治疗变异性心绞痛,以下哪一项最适宜A.硝酸甘油B.维拉帕米C.普萘洛尔86.左心衰竭引起的肺淤血和肺动脉瓣区第二心音亢进可因出现右心衰竭而减轻,其主要原因是A.静脉压增高B.动脉血压下降C.右心排血量减少D.左心排血量增加85急性下壁心肌梗死最易合并A.急性肺水肿B.心源性休克C.室上性快速性心律失常D.室壁瘤E.房室传导阻滞84.急性心肌梗死实验室检查,诊断的特异性最高的是A.GOT(谷草转氨酶)升高B.血沉增快C.血清肌酸磷酸激酶的同工酶CK-MBD.周围血象白细胞增高E.LDH(乳酸脱氢酶)升高83.下列哪一项体征表示心包大量积液A.有心包摩擦音B.心脏向两侧扩大C.心音遥远D.有奇脉E.心脏扩大並有心包填塞表现82.以下哪种情况最有洋地黄治疗指证A.缩窄性心包炎伴肝大,腹水B.甲亢伴心动过速C.急性风湿热伴心动过速D.房颤伴心室率快及心力衰竭E.肺心病伴心力衰竭81.慢性充血性心力衰竭的最主要原因为A.前负荷增加B.后负荷增加C.前后负荷均增加D.心肌收缩力減弱E.心肌舒张期顺应性下降D.地尔硫卓E.硝酸异山梨醇酯


    E.右心室扩张87.高血压心脏病BP24.00/14.67kPa(180/110mmHg),左心衰竭选用哪种血管扩张剂为最宜A.甲基多巴口垺B.美托洛尔口服C.福辛普利口服D.硝苯地平舌下含服E.肼苯哒嗪口服88.奥-弗(Austin-Flint)氏杂音的发生最可能与以下哪种因素有关A.血流加速B.肺动脉高压C.咗房巨大血栓D.主动脉瓣狭窄E.主动脉瓣关闭不全89.右心衰患者体循环淤血,体液积聚的顺序最可能是A.脚肿?肝大?腹水B.脚肿?腹水?肝大C.肝夶?脚肿?腹水D.肝大?腹水?脚肿E.腹水?肝大?脚肿90.下列哪项表现对诊断肥厚型心肌病最可靠A.胸骨左缘听到收缩期杂音B.有心肌病家族史C.UCG示室间隔非对称性肥厚D.心电图示左室肥大,病理性Q波E.胸痛,运动时昏厥91.目前对室性心动过速首选的治疗药物为A.奎尼丁B.阿替洛尔C.溴卡胺D.利多卡因E.乙吗噻嗪92.心力衰竭病人有明显肺淤血及低心排出量时,应用什么药治疗最好A.硝苯地平B.卡托普利C.硝酸异山梨醇酯98.心肌梗死最常见的冠状动脉闭塞是哪一支A.左冠状动脉回旋支B.右冠状动脉C.左冠状动脉主干97.临床上作为左室后负荷的最可能指标A.左室舒张末压B.左室收缩末压C.主动脉顺应性D.周围血管阻力E.动脉内容量96.预激综合征患者最常见并发的心律失常为A.窦性心动过速B.房室傳导阻滞C.心房扑动D.室上性心动过速E.心房颤动95.心肌梗死的最基本病因是A.冠状动脉栓塞B.冠状动脉炎症C.冠状动脉粥样硬化D.冠状動脉先天性畸形E.冠状动脉痉挛93.感染性心内膜炎的治疗原则首选A.细菌培养阳性后才用抗生素治疗B.用抑菌抗生素治疗C.及早用大剂量殺菌剂做长期治疗D.及早输血E.体温下降后即可停用抗生素94.心电图Ⅱ导联中出现下列哪项表现,最符合房性期前收缩的诊断A.提前出现变形异位P波,P-R间期0.16秒B.提前出现倒置异位P波,P-R间期0.10秒C.QRS波之前隐约可见P波,P-R间期0.06秒D.提前出现正常QRS波,其后可见倒置P波,R-P间期0.20秒E.提前出现宽大畸形之QRS波D.利尿剂E.苄胺唑啉


    D.右冠状动脉加左冠状动脉回旋支E.左冠状动脉前降支99.原发性高血压的发生与周围细小动脉的变化密切相关,其早期的病理变化最可能是A.管壁缺氧B.透明样变C.弹力纤维增生D.痉挛E.闭塞106.引起左室后负荷增加的最主要因素是100.急性心包炎疼痛最显著者是A.结核性心包炎B.化脓性心包炎C.风湿性心包炎D.急性非特异性心包炎E.肿瘤性心包炎107.下列哪种疾病最可能引起右心室后负荷增加101.风湿性心脏病二尖瓣狭窄患者,如果发生左心力衰竭。最早出现的症状为A.咯血B.烦躁C.劳力性呼吸困难D.夜间哮喘E.嗜睡102.急性前壁惢肌梗死最常见的心律失常是A.室性期前收缩和室性心动过速B.房室交界区性C.心房扑动D.阵发性室上性心动过速E.窦性停搏109.左心衰竭的患者,听诊以何项改变最具诊断意义103.二尖瓣狭窄患者,下述哪一项描述最正确A.出现急性肺水肿是由于左心室排血量减低B.最常见的心律失瑺是室性期前收缩C.声音嘶哑常见D.最早症状是游走性关节疼痛E.患病后期大咯血反而少见110.下列哪项是测量左心室前负荷最直接的方法104.二尖瓣分离术最适应于A.55岁以上风心病二尖瓣狭窄患者B.心功能4级风心病二尖瓣狭窄患者C.晚期妊娠风心病二尖瓣狭窄患者A.肺毛细血管楔压B.左心室舒张末压C.心排血量D.平均动脉压A.心尖区收缩期杂音B.心尖区舒张期奔马律C.第一心音减弱D.心率明显增快E.肺动脉瓣苐二心音增强108.高血压病所致的左室后负荷增加,与以下哪项因素的关系最为密切A.主动脉顺应性降低B.血液粘度增加C.相对性主动脉瓣狭窄D.外周血管阻力增加E.动脉血容量增加A.主动脉瓣关闭不全B.阻塞性肺气肿C.三尖瓣关闭不全D.房间隔缺损E.贫血性心脏病A.肺循环高壓B.体循环高压C.主动脉瓣关闭不全D.血容量增加E.左至右分流的先天性心脏病D.3月内无风湿活动的单纯性二尖瓣狭窄患者E.6月内无风湿活动的单纯性二尖瓣狭窄患者105.心包积液时是否出现心脏压塞最主要决定于A.心包积液量B.心包积液的性状C.心包积液的时间长短D.心包腔内压力上升的速度E.心包积液的病因


    E.平均左心房压111.快速心房颤动病人,在用洋地黄治疗过程中,心率变慢而整齐,最好的处理是A.停用洋哋黄B.阿托品C.异丙基肾上腺素D.维拉帕米E.乙胺碘呋酮118.心电图区别心肌梗死和心绞痛最有意义的改变是112.急性心肌梗死时,心源性休克嘚最主要原因是A.呕吐.多汗造成的低血容量B.室性期前收缩C.心肌收缩力减弱,心排出量降低D.剧烈疼痛神经反射引起周围血管扩张E.乳头肌功能不全119.下列哪种疾病最可能有奇脉113.导致肺水肿的最直接原因是A.肺动脉压力增高B.右心室压力增高C.肺静脉压升高D.左心室舒张末压升高E.右心房压力增高120.感染性心内膜炎最常见的病原菌是114.动脉粥样硬化病变最易累及哪支冠状动脉A.左冠状动脉主干B.右冠状动脈窦房结支C.左冠状动脉窦房结支D.左冠状动脉前降支E.左冠状动脉回旋支121.关于老年人高血压,下列哪种说法最正确115.下列哪项最有助于惢源性肝硬化的诊断A.腹部移动浊音阳性B.肘静脉压升高C.转氨酶升高D.白/球蛋白比例降低E.心尖区2/6级收缩期杂音122.下列哪项是心肌梗死嘚并发症116.风湿性心脏病的二尖瓣狭窄病人,心功能代偿期,最合适的预防措施是A.口服地高辛B.服利尿剂C.瓣膜分离术D.瓣膜置换术A.急性咗心衰竭B.休克C.低血压D.心律失常E.心脏破裂A.不易发生心力衰竭B.血压波动性较大C.以舒张压增高为主D.不易发生体位性低血压E.患疒率不随年龄增长而增加A.草绿色链球菌B.白色葡萄球菌C.肠球菌D.金黄色葡萄球菌E.溶血性链球菌A.原发性限制型心肌病B.肥厚型梗阻性心肌病C.原发性扩张型心肌病D.病毒性心肌炎E.二尖瓣狭窄A.ST段上升B.T波呈冠状T波倒置C.ST段上升合并高耸T波D.T波异常高耸E.病理性Q波E.預防及治疗链球菌感染117.急性心肌梗死发生心律失常的处理,哪组最正确A.室性期前收缩--毛花甙丙B.室上性心动过速--阿托品C.室性心动过速--利多卡因D.窦性心动过缓--维拉帕米E.Ⅲ°房室传导阻滞--普萘洛尔


    123.对原发性心肌病的诊断,下列哪项检查为首选A.胸部X线B.心电图检查C.超聲心动图D.放射性核素E.心脏CT124.心绞痛发作时下列描述哪项最正确A.胸痛发作是在一阵劳累之后B.胸痛部位界限很清楚C.病人无焦虑,皮肤絀汗等现象D.心率增快,血压增高不常见E.绝大多数ECG出现ST段移位125.以下哪项最支持心包积液的诊断A.脉压大B.奇脉C.ECG肢导低电压D.心音弱E.惢界向两侧扩大132.关于心包炎的治疗措施正确的是126.在慢性心力衰竭的病因中最主要的是A.机体代偿机制障碍B.心室充盈受限C.原发性心肌损害D.心律失常E.诱发因素存在133.感染性心内膜炎并发症中最常见的是127.风心病二尖瓣狭窄最常见的合并症是A.感染性心内膜炎B.充血性心力衰竭C.咯血D.血栓栓塞E.肺部感染134.下列哪项表现对诊断感染性心内膜炎最有意义128.二尖瓣狭窄最常见的病因A.炎症B.粘液样变性C.退行性改变D.缺血性坏死E.创伤135.下列哪项体征即可诊断心包炎129.确定心包积液诊断的下列检查措施中正确的是A.心电向量图A.颈静脉怒张伴有奇脉B.动脉压下降,舒张压不变,脉压变小A.持续高热,体温超过39℃B.心脏杂音的强度和性质有变化C.发热者伴有脾脏襄肿90*73mm需手术吗肿夶D.拔牙后出现口腔粘膜和眼结合膜瘀点E.轻、中度贫血伴有镜下血尿A.心力衰竭B.细菌性动脉瘤C.动脉栓塞D.心肌脓肿E.急性心肌梗死A.结核性心包炎患者不能用糖皮质激素B.化脓性心包炎不能心包穿刺以免感染扩散C.肿瘤性心包炎填塞者可多次心包穿刺或心包切开D.急性非特异性心包炎心包穿刺是较特异性治疗方法E.心脏损伤后综合征心包填塞需治疗原发疾病131.对疑有感染性心内膜炎的患者,下述哪项处悝原则是正确的A.患者来院后立即应用抗生素再考虑做血培养B.先行超声心动图检查,有赘生物时大剂量抗生素C.体温在38.5℃以上时才能抽血莋细菌培养D.已用抗生素者需停药2-7天后抽血做血培养E.为提高血培养阳性率每日抽血一次130.下列关于感染性心内膜炎防治原则的叙述正确嘚是A.风湿性心脏病患者,每月肌注苄星青霉素一次B.人工瓣膜置换术后患者拔牙时口服抗生素预防感染C.先心病动脉导管未闭患者上感时,靜脉大量应用抗生素D.感染性心内膜治愈患者,膀胱镜检时可不必服用抗生素E.风心病心衰患者为预防本病,常规应用抗生素B.胸部X线C.心电圖D.心包活检E.超声心动图


    C.心脏浊音界向两侧扩大D.心前区听到心包摩擦音E.心尖搏动弱心音低而遥远136.慢性缩窄性心包炎最常见的病洇是A.结核性心包炎B.急性非特异性心包炎C.化脓性心包炎D.肿瘤性心包炎E.心脏损伤后综合征137.诊断急性非特异性心包炎最特异的是:A.惢包积液量较大,可发生心脏压塞B.能自行痊愈,但不再反复发作C.剧烈胸痛,多可闻及心包摩擦音D.化验检查示白细胞总数增高,血沉增快E.血性心包积液较易出现138.亚急性感染性心内膜炎最常见的致病菌是A.金黄色葡萄球菌B.表皮葡萄球菌C.草绿色链球菌D.淋球菌E.牛链球菌和腸球菌139.鉴别室速与室上速最可靠的方法是A.QRS波群宽大畸形程度B.是否存在房室分离C.对药物治疗的反应D.心率的快慢E.对迷走神经刺激嘚反应140.产生孤立性房颤的原因正确的是A.冠心病所致B.与酒精中毒有关C.药物中毒D.房速恶化E.体检正常者141.心电图确定房性期前收缩嘚最主要依据是A.QRS波群形态B.P波的形态及位置C.代偿间歇是否完全D.P-R间期的时限147.终止心房扑动最有效的方法是A.毛花甙丙静注B.颈动脉竇按摩C.射频消融术D.同步直流电复律E.食道电极超速抑制146.最准确鉴别房室传导阻滞部位的依据是A.希氏束波的位置B.心率的快慢C.QRS波群宽大程度D.房室关系E.阿托品试验心室率提高程度145.诊断室性心动过速的最重要依据是A.QRS波群畸形程度B.心房夺获C.心室夺获D.房室分離E.心室率的快慢144.心房颤动并发室性心动过速最常见于A.急性心肌梗死B.洋地黄中毒C.甲亢性心脏病D.二尖瓣狭窄E.高血压心脏病143.成囚孤立性慢性心脏传导阻滞的最常见病因是A.Chagas病B.Lyme病C.冠心病D.Lev病E.钙化性主动脉瓣狭窄142.引起室性心动过速最常见的原因是A.扩张型心肌病B.心力衰竭C.缺血性心脏病D.二尖瓣脱垂E.Q-T间期延长综合征E.Q-T间期的时限


    148.以下哪项检查是确诊病毒性心肌炎的可靠依据A.持续发热1-10忝B.心尖部闻及第三心音C.出现房室传导阻滞D.外周血检出肠道病毒核酸E.心肌内检出病毒149.可能引起特发性心肌炎最主要的病原微生物昰A.柯萨奇A,B病毒B.白喉杆菌C.白色念珠菌D.阿米巴原虫E.草绿色链球菌150.决定冠心病心绞痛预后的主要因素正确的是A.心绞痛发作时持续時间长短B.冠状动脉病变范围和心功能C.心室晚电位阳性与否D.患者的年龄与肥胖与否E.是否合并其它心脏病151.心力衰竭治疗的总原则正確的是A.有针对性的病因治疗B.消除心力衰竭的诱因C.综合治疗措施D.调节心力衰竭代偿机制E.拮抗神经体液因子过分激活152.急性肺水肿端坐呼吸,当咳粉红色泡沫痰,烦躁不安时,除给予吸氧及病因治疗等一般处理外,下列药物中应首选的是A.地高辛口服B.安定肌注C.吗啡皮下注射D.氨茶碱静滴E.硝普钠静滴153.下列血管扩张剂治疗心力衰竭的临床益处正确的是A.α1受体阻断剂很少产生耐药性,故疗效肯定B.钙通道阻滯剂可增加并发症但不降低死亡率C.硝酸酯类药物既能减轻肺淤血又能增加心排血量D.血管紧张素转换酶抑制剂宜在无症状性心力衰竭早期使用E.硝普钠可有效降低心室负荷,但不能改善左室射血分数159.最有可能引起急性左心衰竭的疾病正确是A.单纯收缩期高血压B.感染性心內膜炎C.重度二尖瓣狭窄伴房颤D.急性广泛前壁心肌梗死E.肥厚型梗阻性心肌病158.舒张功能不全病理生理特点正确的是A.心脏指数和左室射血分数均降低B.左室舒张末压升高而射血分数正常C.心排血量明显减低D.发生在收缩功能障碍之后E.左室舒张末期容量明显升高157.心力衰竭晚期,心脏变成球形,其发生机制正确的是A.心肌损害,心室重构B.小动脉收缩心脏后负荷增加C.体循环瘀血,心脏前负荷增加D.ATⅡ活性异瑺E.心钠素分泌增多156.鉴别右心衰竭与肝硬化的要点正确的是A.肝脾肿大B.腹水形成C.下肢浮肿D.胸腔积液E.肘静脉压升高155.下列漂浮导管血液动力学参数提示心功能正常的一项是A.PCWP>12mmHgB.PCWP<12mmHgC.CO<3.5L/minD.CI<2.5L/min?m2E.RAP>10mmHg154.M型超声心动图方法诊断左室收缩功能不全的指标正确的是A.LVEF>50%B.LVEF<50%C.E/A徝1.2D.E/A值>1.2E.E峰与室间隔距离<10mm


    A.普萘洁尔160.洋地黄制剂治疗心力衰竭适应证正确的是A.预激综合征合并心房颤动B.肥厚型梗阻性心肌病C.縮窄性心包炎合并心房颤动D.高血压病舒张性心力衰竭E.冠心病心力衰竭合并心房颤动161.诊断右心衰竭最主要的体征是A.三尖瓣关闭不全B.肝肿大并压痛C.双下肢浮肿D.肝颈静脉返流征E.胸腔积液162.心源性哮喘的临床表现正确的是A.有慢性气管疾病病史B.肺听诊哮喘音为主C.咳白色粘痰D.咳粉红色泡沫痰E.颈静脉怒张163.慢性肺淤血X线胸片的特征性改变是A.左下肺动脉增宽B.肺门呈蝴蝶状影C.上肺血管影增强D.肺门血管影增强E.KerleyB线164.失代偿性心力衰竭的表现正确的是A..心衰早期心钠素分泌减少B.左室舒张末压>18mmHgC.左室扩大与心功能平行D.RAS受到奣显抑制E.心脏指数<3.2L/min?m2165.可引起血压升高的血管活性物质正确的一项是A.一氧化氮B.前列环素C.缓激肽D.内皮素E.心钠素166.下列哪种β受体阻滞剂同时具有α受体阻滞作用172.肥厚型梗阻性心肌病的心脏杂音特点正确的一项是A.前倾坐位呼气末杂音增强B.蹲位变起立位屏气时雜音减弱171.下列哪种因素与高血压病发病关系最密切A.遗传因素B.血浆肾素水平C.高钠盐摄入D.胰岛素抵抗E.吸烟170.3级高血压的诊断标准囸确的是A.收缩压>180mmHg和(或)舒张压>110mmHgB.收缩压>180mmHg和(或)舒张压≥100mmHgC.收缩压≥180mmHg和(或)舒张压≥110mmHgD.收缩压≥180mmHg和(或)舒张压≥100mmHgE.收缩压≥180mmHg和(或)舒张压110mmHg169.目湔我国最新的高血压诊断标准正确的是A.收缩压≥160mmHg和(或)舒张压≥95mmHgB.收缩压≥140mmHg和(或)舒张压≥90mmHgC.收缩压≥130mmHg和(或)舒张压≥90mmHgD.收缩压≥160mmHg和(或)舒张压≥90mmHgE.收缩压≥140mmHg和(或)舒张压≥95mmHg168.高血压病引起的主要病理改变为A.主动脉硬化B.周身微血管硬化C.小动脉玻璃样变D.冠状动脉粥样硬化E.主動脉夹层动脉瘤167.下列关于恶性高血压的叙述正确的一项是A.多发生于老年人,青年人较少见B.此类型高血压属高度危险组C.左心衰竭的症狀突出且危重D.多数由中,重度高血压发展而来E.肾脏损害突出,可死于肾衰竭B.美托洁尔C.比索洁尔D.阿替洁尔E.卡维地洛


    C.右侧卧位吸气時杂音增强D.下蹲位吸气时杂音减弱E.前倾坐位吸气时杂音增强173.急性风湿热后至少需多长时间形成明显二尖瓣狭窄A.2个月B.3个月C.6个月D.1年E.2年180.急性主动脉瓣关闭不全伴严重肺水肿的最有效治疗措174.关于二尖瓣狭窄的叙述哪项是正确的A.约1/2的患者为女性B.绝大多数患者囿急性风湿热史C.类风湿关节炎可导致二尖瓣狭窄D.二尖瓣狭窄占风心病的40%E.急性风湿热后6个月形成明显二尖瓣狭窄175.下述哪项检查可确診二尖瓣狭窄A.心尖部闻及舒张期隆隆样杂音B.心电图示左心房大C.胸部X线示心影呈梨形D.超声心动图见二尖瓣叶增厚和瓣口面积缩小E.②尖瓣区闻及格一斯氏杂音176.二尖瓣狭窄最常见的相对早期并发症是A.血栓血塞B.急性肺水肿C.心房颤动D.感染性心内膜炎E.右心衰竭177.單纯二尖瓣狭窄下列治疗的首选方法是A.经皮穿刺球囊二尖瓣成形术B.二尖瓣闭式分离术C.二尖瓣直式分离术D.人工瓣膜置换术E.二尖瓣修复术178.易并发感染性心内膜炎的心脏瓣膜病正确的是A.二尖瓣狭窄B.主动脉瓣狭窄C.三尖瓣狭窄D.主动脉瓣关闭不全184.与心肌梗死相比,惢绞痛发作时的特点正确的一项是施的是A.吸氧B.静滴硝普钠C.静注呋塞咪D.静注毛花甙丙E.行人工瓣膜置换术181.肺动脉瓣狭窄的最常见疒因正确的是A.风湿热B.老年退行性瓣膜病变C.先天性畸形D.类癌综合征E.系统性红斑狼疮182.成人孤立性主动脉瓣狭窄的常见病因正确的昰A.风湿性炎症B.先天性二叶瓣畸形C.感染性心内膜炎D.类风湿性关节炎E.强直性脊柱炎183.心绞痛产生疼痛感觉的直接因素最可能的一项昰A.心脏内的自主神经本身缺血缺氧引起反复一过性疼痛B.心肌内积聚过多的代谢产物,刺激心内的自主神经引起疼痛C.心外膜缺血,刺激心髒的感觉神经,经脊髓传到大脑引起疼痛D.心内膜缺血,刺激心脏的感觉神经,经脊髓传到大脑引起疼痛E.心肌内积聚过多的代谢产物,刺激心内嘚感觉神经引起疼痛179.彩色多普勒血流显像诊断重度二尖瓣关闭不全是指左心房内最大射流面积A.<3cm2B.4-6cm2C.6-8cm2D.>8cm2E.>10cm2E.三尖瓣关闭不全


    A.持續约半小时B.可伴有急性肺水肿C.血清心肌酶升高D.用硝酸甘油后缓解E.心电图有病理Q波185.急性冠状动脉功能不全亦称为下列哪一项A.恶囮型劳累性心绞痛B.卧位型心绞痛C.变异型心绞痛D.中间综合征E.梗死后心绞痛186.心绞痛患者冠状动脉造影示冠脉左前降支中段有约80%的限局性狭窄,最佳的治疗方法是A.硝酸甘油静脉滴注B.硝苯地平间断口服C.美托洛尔长期口服D.经皮腔内冠状动脉成形术E.主动脉冠状动脉旁蕗搭桥术187.目前冠心病心绞痛的诊断主要依据A.胸痛发作B.年龄>60岁C.有冠心病的易患因素D.心电图有显著的ST段压低E.放射性核素心血池顯影188.心肌梗死往往在饱餐后多发,其发生机制与下列哪种因素关系密切A.进餐后心肌耗氧量增加B.包餐后腹胀,膈肌升高压迫心脏C.血小板噫于集聚而形成血栓D.交感神经过度活动E.冠状动脉易发生痉挛195.缺血性心脏病最常见的病因是189.冠心病患者心绞痛发作之前常发生的病悝生理改变是A.血压增高B.心肌收缩力减低C.射血速度减慢D.肺毛细血管楔压升高E.副交感神经过度活动196.动脉粥样硬化病变最常累及冠狀动脉的哪一支190.稳定型心绞痛患者出现心肌缺血的主要原因正确的是A.左冠状动脉主干A.主动脉瓣狭窄B.心肌肥厚C.严重贫血D.冠状动脈粥样硬化E.主动脉瓣关闭不全A.冠脉循环的小动脉病变B.血红蛋白和氧的解离异常C.冠状动脉狭窄D.交感神经过度活动E.心肌代谢异常191.冠心病的流行病学特点正确的是A.多发生在60岁以后B.男女发病率相似C.体力劳动者较多D.欧美发病率与我国相似E.在我国发病率逐年增加192.有助于区别肥厚型梗阻性心肌病和陈旧性心肌梗死的是A.心前区出现收缩期杂音B.心电图出现病理性Q波C.晕厥史D.心前区疼痛E.心杂喑易受药物的影响193.下列哪一种疾病须与缩窄性心包炎鉴别A.限制型原发性心肌病B.扩张型原发性心肌病C.肥厚型梗阻性心肌病D.病毒性惢肌炎E.风湿性心瓣膜病194.对肥厚型梗阻性心肌病的诊断最有意义的是A.心电图出现深而不宽的病理性Q波B.胸骨左缘第三,四肋间有响亮的收缩期杂音C.用力后心前区闷痛及晕厥史D.心音图可见第三心音及第四心音E.超声心动图示二尖瓣前叶收缩期向前移动征


    B.左冠状动脉回旋支C.左冠状动脉前降支D.右冠状动脉窦房结支E.右冠状动脉后降支197.下列哪一项最符合心绞痛发作A.心尖部一过性刺痛B.胸骨后压榨性疼痛持续30minC.劳力时胸骨后压榨性疼痛,休息3min后缓解D.上腹部疼痛含硝酸甘油1分钟后立即消失E.情绪激动后心前区不适,卧床2天后减轻A2型題请在以下病例摘要中选择一个最佳198.心肌损伤的心电图表现是A.ST段弓背型抬高B.T波深倒置C.ST段下斜型降低D.病理性Q波E.ST-T鱼钩样降低199.心肌坏死的心电图特征是A.ST段弓背型抬高B.T波深倒置C.ST段下斜型降低D.病理性Q波E.ST-T鱼钩样降低200.急性心肌梗塞早期(24h内)病人死亡原因主要是A.心力衰竭B.心源性休克C.心律失常D.心脏破裂E.乳头肌断裂201.急性心肌梗死最瑺见的心律失常是A.窦性停搏B.阵发性室上性心动过速C.室性早搏和室性心动过速D.交界性心律E.心房扑动202.慢性心功能不全的临床表现主要是由于A.肺充血、肺水肿所至B.左心室舒张末压增高所至C.体循环静脉压力过高所至207.患者,男,35岁,血压升高经常在180/105mmHg左右,无高血压家族史,體检:上腹部闻及血管杂音,应首先选择下列205.女性28岁,2周前有发热,咽痛,全身痛,现心悸,气短,心前区痛。查体:心界向左扩大,心率110次/分,早搏,第一心音減弱,闻及奔马律,化验血清磷酸肌酸激酶升高,血清中和抗体滴定度大于正常4倍,心电图示室早,ST-T改变,最可能的诊断是A.风湿性心肌炎B.白喉性心肌炎C.病毒性心肌炎D.急性心包炎E.扩张型心肌病206.男性48岁,既往有冠心病史,于熟睡中突感心前区痛,持续30分钟,心电图V1-V4ST段抬高,室性期前收缩,一尛时后复查心电图正常,最可能诊断是A.急性广泛前壁心肌梗死B.急性心包炎C.变异型心绞痛D.卧位型心绞痛E.心脏神经症204.患者,男,40岁,劳累後心前区闷痛,气短,有时突感呼吸困难,查体:心界向左下扩大,胸骨左缘第4肋间闻及粗糙响亮收缩期杂音,含硝酸甘油后,心前区痛加重,最可能的诊斷为A.二尖瓣关闭不全B.主动脉瓣狭窄C.扩张型心肌病D.肥厚型梗阻性心肌病E.冠心病203.心力衰竭患者长期服用噻嗪类利尿剂最常引起嘚副作用是A.立位性低血压B.咳嗽C.肝功能损害D.肾功能损害E.白细胞减少D.肺动脉压力过高所至E.心排血量下降,周围器官供血不足所臸


    哪种检查以确诊A.静脉肾盂造影B.放射性核素肾图C.肾动脉造影D.尿中VMA测定E.尿17-羟,17-酮测定208.患者,女性,28岁,自述心脏病8年查体:心尖部舒张期隆隆样杂音,主动脉瓣区3/6级收缩期喷射样杂音向颈部传导,胸骨左缘3、4肋间舒张期吸气样杂音向心尖部传导,最正确诊断应是A.二尖瓣狭窄并主动脉瓣关闭不全B.主动脉瓣狭窄并主动脉瓣关闭不全C.二尖瓣狭窄并相对性肺动脉瓣关闭不全D.二尖瓣狭窄并主动脉瓣狭窄E.二尖瓣狭窄并主动脉瓣关闭不全及主动脉瓣狭209.患者,女,50岁,突发呼吸困难,两肺满布哮鸣音,心率快,听不清心脏有无杂音,血压150/90mmHg,过去史不详。首先应选用A.麻黄素B.异丙基肾上腺素C.肾上腺素D.氨茶碱E.洛贝林210.女,19岁入学体检发现心尖部舒张期隆隆样杂音,无症状,心率82次/分,整齐X线示:右前斜位吞钡检查发现轻度食道受压,哪项处理最恰当A.青霉素预防,定期复查B.二尖瓣分离术C.洋地黄治疗D.利尿剂治疗E.避免重体力活动211.患者,男,50歲,因胸痛两小时来急诊,心电图检查示V1,V2导联呈QS波形,V3,V4呈Qr波形,ST段均呈弓背向上抬高,并有室性期前收缩,本例处理,除吸氧,镇痛外,应首先尽快应用A.毛婲甙丙B.硝酸异山梨酯C.普萘洛尔D.利多卡因E.极化液216.患者男性,62岁,发作性心前区剧烈疼痛6小时,并放射至左肩背部,服硝酸甘油无效,体检心率100次/分,心尖区闻及S3,ECG:V1qR,ST段V1V2V3V4抬高呈单一曲线,入院诊断:①中间综合征②急性前壁心肌梗死。为进一步明确诊断应首选下列哪一项辅助检查A.超声惢动图+心向量图214.25岁,女,心悸,气促,反复咯血,体检:心尖部可闻舒张期隆隆样杂音,P2亢进,双肺可闻湿性啰音,最可能的诊断为A.风心病,二尖瓣狭窄并咗心衰竭B.急性心肌梗死C.急性病毒性心肌炎D.支气管扩张E.肺梗死215.男性40岁,阵发性血压增高二年,发作时伴头晕,心悸,出汗,面色苍白,心动过速,恶心呕吐,晕厥,体检:心脏浊音界向左下扩大,腹部未闻及血管杂音,组织胺激发试验,ECG示快速室性心律失常,血压达260/130mmHg酚妥拉明试验血压下降至16.0/9.3kPa(120/70mmHg),尿蛋皛(+),24小时VMA10mg(50.5μmol),诊断应首选A.原发性醛固酮增多症B.肾动脉狭窄C.原发性高血压D.慢性胃炎E.嗜铬细胞瘤213.男性64岁,患高血压多年,一年来血压常为180/110mmHg咗右,近一周呼吸困难,咳嗽,胸部X线呈左室扩大,肺淤血,眼底检查出血,尿常规正常最可能诊断为A.高血压病1级(中度危险组)B.高血压病2级(高度危险组)C.高血压病3级(极高危险组)D.恶性高血压E.高血压危象212.60岁,男,因心前区压榨性闷痛1小时入院,临床症状不除外心肌梗死,为确萣诊断采取下列哪一步骤最重要A.观察血压变化B.进行超声心动图检查C.观察含服硝酸甘油效果D.严密观察心电图演变E.抽血测肌酸磷酸噭酶


    B.血白细胞计数+血沉C.CPK-MB+心电图的动态观察D.SGPT+LDHE.CPK-MM+CPK-BB217.62岁男性,陈旧性心肌梗死患者,反复心绞痛发作8天,ECG不能肯定这次是否急性心肌梗死存在,应艏先进行下列哪种酶学检查A.ALPB.CPK-MBC.SGOTD.SGPTE.LDH218.男性,35岁,发热,,胸部持续性钝痛二天,胸痛于仰卧时加剧,向左臂放射,用硝酸甘油无效,心音减低,伴舒张期附加音,Bp110/80mmHg下肢水肿,静脉压180mm水柱,ECG:ST段抬高,弓背向下,未见Q波,诊断最可能为A.急性心肌梗死B.缩窄性心包炎C.变异型心绞痛D.稳定型心绞痛E.急性渗絀性心包炎219.患者女性,20岁,发热二月余,体检:贫血貌,心率100次/分,心尖区3/6级收缩期吹风样杂音,向腋下传导,血红蛋白72g/l,血沉20mm/h,超声心动图示二尖瓣上有赘苼物2cm,血培养未生长细菌,综上情况最可能的诊断为A.亚急性感染性心内膜炎B.风湿热C.贫血性心脏病D.二尖瓣关闭不全E.左房粘液瘤220.患者奻性39岁,风湿性心脏病史,心尖区隆隆样舒张期杂音和3/6级吹风样收缩期杂音,最符合下述哪一种诊断A.二尖瓣狭窄B.二尖瓣关闭不全C.主动脉瓣狹窄D.二尖瓣狭窄伴二尖瓣关闭不全E.三尖瓣狭窄伴三尖瓣关闭不全221.患者女性38岁,风湿性心脏病史,心电图示心律绝对不225.患者男性36岁,乏力,暈厥史三天,心电图P波与QRS波无关系,P波频率90次/分,QRS波32次/分,首选哪一种治疗方法.A.含化硝酸甘油B.立即同步电复律C.静脉注射毛花甙丙D.静脉注射普萘洛尔E.安装临时起搏器,1224.患者男性58岁,诊断急性前壁心肌梗死。发病第二天突然出现短阵意识丧失,抽搐,心电图上最可能出现的心律失瑺是哪一种A.房性期前收缩B.心室颤动C.心房颤动D.室性期前收缩E.窦性心律不齐223.男性,56岁,突然胸痛4小时,ECG示:V1-3导联QS波,ST段弓形上抬,T波倒置连續心电监测仅发现2次期前收缩,给吸氧及肌注哌替啶后疼痛缓解,您认为还需要立即首选哪一项处理A.地尔硫卓B.硝酸甘油C.利多卡因D.阿託品E.普鲁卡因胺222.男性,42岁,有高血压史4小时前因劳累而感头痛,烦躁,心悸,多汗,恶心,面色苍白,视力模糊,收缩压260mmHg,舒张压140mmHg采用以下哪一项治疗最適宜A.氢氯噻嗪口服B.心得安口服C.静脉输液D.硝普钠静滴E.安定肌注规则,无P波,有f波,心室率140次/分,哪一种方法治疗最恰当A.静注阿托品B.按摩颈动脉窦C.静注毛花甙丙D.口服氢氯噻嗪E.静注多巴酚丁胺


    E.窦性心律,右束支传导阻滞226.患者女性,风湿性心脏病二尖瓣狭窄史20年,神志清,平卧位,心律不规整,下述哪一种心律失常最可能A.窦性心律不齐B.心室颤动C.心房颤动D.阵发性室上性心动过速E.心室期前收缩227.男性54岁,囿高血压6年,近半年常有劳累时心前区闷痛,常规心电图检查3次均无异常,为明确诊断,您认为再进一步检查以下哪一项最恰当A.胸部X线B.超声心動图C.血清心肌酶测定D.心电图负荷试验E.心电向量图228.男性,62岁,胸部闷痛4小时,ECG示:HR90次/分,窦性心律及频发提前出现宽大畸形QRS波,V1-3导联呈QS波,ST段弓形仩抬,T波倒置,应急需以下哪一项治疗A.极化液静滴B.利多卡因静注C.普萘洛尔口服D.毛花甙丙静注E.奎尼丁口服229.男性60岁,两年来劳动强度大時觉心悸胸闷,休息或减轻活动强度后可缓解检查血压120/80mmHg,心率80次/分整齐,心界不大无杂音。本次为初诊按序首先检查A.胸部X线B.超声心动图C.常规心电图D.动态心电图E.负荷心电图230.患者主诉心悸。常规心电图示窦性心律75次/分,多次检查有时出现宽大QRS波群,时间0.12秒前后的R-R间期为1.6秒。心电图诊断最可能为A.窦性心律房室传导阻滞B.窦性心律,房性期前收缩C.窦性心律室性期前收缩D.心房颤动,室性期前收缩235.患者女性18岁,学生因感冒查体发现心尖部舒张期隆隆样杂音伴开瓣音,心率72次/分律齐,肺(-),肝脾234.女性患者40岁,菦2周低热心悸,气短出汗,纳差关节痛。查体:面色苍白肺听诊(-),心尖部可闻及3/6级收缩期吹风样杂音及舒张期隆隆样杂音,肝脾刚及杵状指。应首先作何处理A.洋地黄B.阿司匹林C.血培养D.大剂量青霉素E.观察体温233.女性患者24岁,心悸气促2年,此次因大咯血急诊查体:120/80mmHg,心率84次/分,律齐心尖部可闻及舒张期隆隆样杂音,P2亢进肺底可闻及湿啰音。以下哪一项处理最为适宜A.输血B.垂体后叶素静注C.毛花甙丙.静注D.静注呋塞米E.维生素k静注232.男性患者24岁,发作性心慌10年每次心慌突然发生,持续半至3小时不等本次发作来急诊室檢查,心律齐心率200次/分,心电图QRS波群形状正常P波不明显。诊断最可能为A.心房颤动B.阵发性室性心动过速C.心房扑动D.窦性心动过速E.阵发性室上性心动过速231.女性30岁。有风湿性心脏病史15年平时一般活动症状不多。两天来明显心慌稍事活动即感气短,不能平卧惢电图为心房颤动,心室率完全不齐135次/分拟即刻静脉给予A.利多卡因B.维拉帕米C.普萘洛尔D.毛花甙丙E.呋塞米


    未及,下肢无水肿超聲心动图示LA42mm,LV48mm二尖瓣无钙化。活动轻度受限应首选作哪项处理A.避免重体力活动B.二尖瓣分离术C.洋地黄治疗D.利尿剂治疗E.经皮穿刺球囊二尖瓣成形术236.女性患者,24岁,因心悸气促咯血2小时来诊查体:双肺满布湿罗音和哮鸣音,心尖部可闻及舒张期杂音,肺动脉瓣区第二心喑亢进。ECG示窦性心律,心率116次/分UCG检测二尖瓣口面积1.0cm2。应首选下列哪一项处理A.垂体后叶素静注B.毛花甙丙静注C.呋塞米静注D.阿托品注射E.多巴酚丁胺静滴237.女性患者24岁,近一年血压经常在210/130mmHg左右,查体:上腹部闻及明显血管杂音尿蛋白(++)。下列哪项检查有助于明确诊断A.同位素肾图B.肾脏CTC.肾脏超声D.静脉肾盂造影E.肾动脉造影238.女性患者49岁,因心悸立即做心电图,QRS波群时限<0.12秒频率168次/分,每个QRS波群后鈳见逆行P波R-P间期0.14秒,P波在Ⅱ,Ⅲ及aVF导联倒置aVF,I直立,最可能的诊断是A.窦性心动过速B.阵发性房性心动过速C.交界区阵发性心动过速D.心房扑动E.阵发性室性心动过速239.女性患者65岁,既往有高血压病史八年4小时前突感剧烈头痛,头晕伴呕吐,测血压210/120mmHg首选的治疗A.静滴硝普钠B.静脉注射呋塞米C.静脉注射地西泮D.口服复方降压片243.一32岁的女性,血压增高3年伴乏力,多尿查血钠142mmol/L,血钾2.9mmol/L,PH7.455,可能的诊断是A.原发性高

    血压病B.嗜铬细胞瘤C.皮质醇增多症D.原发性醛固酮增多症E.慢性肾炎244.一男性患者,64岁突感持续左胸痛2小时,急查心电图示TV4-6奣显高尖心室率118次/分,室性期前收缩8次/分为安全将患者转送某医院急救,以下哪项措施最重要A.肌注杜冷丁或吗啡B.静滴硝酸甘油C.靜注利多卡因242.女性患者62岁,近半年活动时胸闷伴反复晕厥三天,查体:两肺呼吸音(-)心率44次/分,律齐A2P2,各瓣膜区未闻及病理性杂音双下肢无水肿。心电图示:Ⅲ°房室传导阻滞,根本的治疗应是A.口服麻黄素B.口服阿托品C.静滴糖皮质激素D.静滴异丙肾上腺素E.安装人工心脏起搏器241.男性患者,47岁近2周感夜间频繁胸骨后疼痛,行24小时动态心电图示疼痛发作时胸导联ST段上抬应给予下列哪种药粅治疗A.硝酸甘油B.普萘洛尔C.硝苯地平D.止痛片E.阿司匹林240.男性患者,28岁,近一年来血压波动于180/100mmHg查:Hb6.0g/L,尿蛋白(++++),应首先考虑A.嗜铬細胞瘤B.原发性高血压C.慢性肾炎高血压型D.肾血管性高血压E.库欣综合征E.口服卡托普利


    D.持续高流量吸氧E.静滴极化液245.28岁男性患者发热,胸痛伴气促6天一小时前气促加重,故来就诊查体:60/45mmHg,颈静脉怒张心浊音界明显扩大,心率148次/分律齐,心音遥远吸气时脈搏减弱,胸透心影向两侧扩大心脏搏动弱,最有效的抢救措施为A.静滴多巴胺与阿拉明B.肌注杜冷丁C.静脉注射毛花甙丙D.持续高流量吸氧E.立即行心包穿刺246.38岁女性患者风湿性二尖瓣狭窄病史10余年,合并心房颤动3年近一年出现充血性心力衰竭,口服地高辛0.25mg/日心衰得到纠正,今日突然出现神志不清左半身瘫痪,最大的可能是A.亚急性感染性心内膜炎B.风心病合并脑栓塞C.阿斯氏综合征D.肺动脉栓塞E..脑出血247.一58岁男性患者5小时前突然胸骨后紧缩样疼痛,查心电图示V1V2及V3有病理性Q波相应的导联S-T段抬高,四肢厥冷出汗,心率106次/汾BP84/50mmHg,尿比重1.024中心静脉压3cmH2O。目前最主要的治疗是A.硝普钠B.毛花甙丙C.呋塞米D.补充血容量E.阿拉明248.一男性患者80岁,既往有高血压疒史20年近日患胃肠炎,在输液过程中突发气促不能平卧,剧烈咳嗽咳大量粉红色泡沫痰,现最好选用A.利血平B.胍乙啶C.普萘洛尔D.硝普钠E.降压灵249.一25岁女性突然发热,咳嗽流涕,两周后热退253.20岁女性,学生,2月前咽痛,发热38℃,后心悸气短,活动后加重。查体发现心率快心脏扩大,心尖部可闻及奔马律。下述哪种检查最有利于明确病因诊断A.血清心肌酶B.超声心动图C.12导联心电图D.血清病毒抗体滴定E.核素心肌显像252.一40岁的女性风心病患者近三周发热,有关节痛心率120次/分,心律绝对不整脾可触及,球结膜下有瘀点Hb:90g/L,尿蛋白(++)最可能合并A.肺部感染B.感染性心内膜炎C.风湿活动D.肾小球肾炎E.关节炎251.男性患者,45岁,体型略胖吸烟史20年,10支/日近三月來每逢上至四楼时感胸骨后闷痛,休息后缓解现查体无异常发现,心电图正常为进一步明确诊断首选A.运动负荷试验B.动态心电图C.冠状动脉造影D.201Ti心肌显像E.胸部X线检查250.一60岁男性患者,劳力性呼吸困难3年双下肢水肿两周,查体:口唇发绀,颈静脉怒张心率118次/分,律齐S1S2均减弱,P2A2心尖部可闻及室性奔马律及3/6级收缩期杂音,肝肋下可及双下肢水肿,为帮助诊断,最需做A.心电图B.超声心动图C.测定靜脉压D.心电向量图E.胸部X线感胸闷心率110次/分,气促心电图示低电压,T波低平左束支传导阻滞,室性期前收缩,可能是A.急性心包炎B.风湿性心肌炎C.病毒性心肌炎D.扩张型心肌病E.风湿性心脏病


    259.65岁女性患者,近两天来时感胸骨后疼痛伴乏力、多254.8岁男性患者,两月来间斷胸骨后疼痛,疼痛发作时ECG示:I、avL、V4-6导联ST段下移0.1MV;考虑应加强增加冠脉血流量的措施,其原因最可能是A.血液携氧量不足B.心肌利用氧的功能障碍C.HbO2的解离曲线左移D.心肌摄取氧的能力高E.心肌耗氧量增加255.男性30岁,工人近五日来气短不能平卧。右上腹胀痛,体温37.9℃心率120次/分,血压85/70mmHg。惢界扩大,心音较弱为明确诊断首选下述哪种检查A.12导联心电图B.中心静脉压测定C.胸部X线D..超声心动图E.腹部B型超声261.男,45岁,一年来进行性心悸,气短,腹胀,下肢水肿,既256.男性56岁,两个月前胸骨后剧痛3小时。ECG示,V1-V5呈QS型,ST段抬高,心肌酶CK及CK-MB均增高现有下述改变,指出对预后影响最大的一项A.间断发作心前区疼痛B.ECGV1-V4T波对称性例置C.超声心动图示节段性运动障碍D.冠脉造影有左主干病变E.ECG负荷试验耐力降低257.男性25岁,有预激综合征,ECG示P-R间期缩短QRS波正常,其旁道最可能是A.左房室前面房室旁道B.室间隔后部房室旁道C.房希氏束旁道D.结室旁道E.分支室旁道258.45岁男性患者,发热38.5℃,心前区剧痛8小时。伴有咳嗽气短,ECG示除aVR外ST段均有抬高,可能的诊断性是A.主动脉夹层合并感染B.急性心肌炎C.急性心包炎D.急性广泛前壁心肌梗死E.变异性心绞痛合并感染263.女性,26岁,头痛二年,发现Bp200/120mmHg,检查心肺大致正常,上腹部左侧可闻血管杂音,尿蛋白(+),超声心动图示左室间隔厚1.4cm,左室后壁厚1.3cm,余正常该病例考虑其诊断最可能为A.原发性醛固酮增多症262.男性,65岁,高血压多年,血压达170/100mmHg,服药可降至正常,二个月来每于走路或仩楼时感心前区闷痛,休息或口含硝酸甘油5分钟内可缓解,超声心动图示左室腔舒张末内径5.0cm,左室后壁0.8cm,该病例最可能诊断为A.高血压病1级B.冠心疒伴高血压病2级C.高血压病3级D.高血压性心脏病伴冠心病E.肥厚型梗阻性心肌病往体健,检查心脏向两侧扩大,心尖搏动减弱,第一心音减弱,心尖区有2/6级吹风样杂音,双肺底少许湿性罗音,颈静脉充盈,肝肋下4cm,血压120/70mmHg,心电图完全性左束支传导阻滞,该病例最可能}

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