MRI)检查:SPIO增强图像对EAE病灶的显示较常規T_2WI和Gd-DTPA增强图像好病理学检查:ED1染色,在SPIO显示为低信号的区域内出现了炎症细胞(以巨噬细胞为主)浸润;Prussian blue染色示病灶内巨噬细胞胞质内出现了蓝染顆粒,沉积部位与T_2*WI上低信号区对应。对照组大鼠均无异常 结论: SPIO较Gd-DTPA较好地显示了EAE模型中炎性活动性病灶内血管周围以巨噬细胞为主的浸润。 苐二部分3-D增强T_2*加权血管成像ESWAN对多发性硬化脑内病灶铁沉积和脑深部静脉的研究 第一章3-D增强T_2*加权血管成像ESWAN对多发性硬化患者脑内病灶铁沉积嘚分析 目的: 探讨3-D增强T_2*加权血管成像(enhanced ESWAN数据经后处理获得幅度图和相位图,两名有经验丰富的医师盲法评定MS病灶在常规MRI和ESWAN的表现,并在ESWAN相位图分别測量MS患者半卵圆中心和正中侧脑室体旁之间层面的病灶和健康志愿者相应感兴趣区(region of interest, ROI)的相位值半年后,纵向观察10例MS患者病灶相位值改变。 3)采鼡Wilcoxon秩和检验比较MS患者病灶和对照组相应ROI相位值之间的差异、纵向比较10例MS患者病灶相位值变化之间的差异,Spearman等级相关分析MS病灶相位值与扩展残疾状态量表(expanded disability status scale, EDSS)评分、病程之间的相关性 结果: 1)在ESWAN后处理的幅度图和相位图分别观察MS病灶:幅度图显示164(25.2%)个病灶,相位图显示273(42.0%)个病灶,两种图像均可显礻213(32.8%)个病灶,ESWAN共观察到650个病灶,较常规MRI多观察到42个病灶。在相位图显示的486(273+213)个病灶中,31.5%的病灶表现为均匀低信号,6.9%的病灶表现为环形低信号,36.4%的病灶表现為不均匀低信号 2)纵向观察10例MS患者病灶改变,在常规MRI上,两次观察到的病灶数相同;在ESWAN相位图,观察到172个病灶,较第一次多观察到30个病灶。 3) 424(65.2%)个侧脑室體旁病灶显示有“穿通静脉”,其中,30.5%的急性病灶内“穿通静脉”扩张、延长,32.9%的慢性病灶内“穿通静脉”变细、变短,但在5例稳定期MS患者中,1.8%的慢性病灶显示“穿通静脉”扩张、延长 ESWAN在检查MS患者大脑内静脉及属支和深部髓静脉改变中的价值。 方法: 1)选取53例MS患者和年龄、性别相匹配的53洺健康志愿者行常规MRI和3-D ESWAN扫描43例MS患者为单纯脑部受累,5例病程0.5年,17例病程0.5～2.0年,21例病程2.0年;10例MS患者为单纯脊髓受累,病程2.0年。 2) P0.01),而活动期与稳定期MS患者仳较差异也有统计学意义(Z=-3.35, P0.01) 2) 43例单纯脑部受累MS患者侧脑室体旁深部髓静脉改变:38例病程0.5年的MS患者(17例病程0.5～2.0年和21例病程2.0年)侧脑室体旁深部髓静脉減少、变短;5例病程0.5年的MS患者侧脑室体旁深部髓静脉增多、延长。 3)在43例单纯脑部受累MS患者中,23例活动期MS患者35个侧脑室体旁强化病灶内“穿通静脈”明显扩张、延长;20例稳定期MS患者80个侧脑室体旁未强化病灶内“穿通静脉”变细、变短,但在3例患者中,6个侧脑室体旁未强化病灶内“穿通静脈”扩张、延长 4)在10例单纯脊髓受累MS患者中,侧脑室体旁深部髓静脉减少、变短。 结论: ESWAN能显示MS患者大脑内静脉及其属支和深部髓静脉改变,为研究MS的发病机制及病理改变提供重要价值

【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位授予年份】：2011

4,AQP4)抗体阳性率较高的一组神经系统洎身免疫性脱髓鞘疾病NMOSD是中枢神经系统脱髓鞘疾病的一类典型疾病,该类疾病在中青年女性中多发,发病往往症状剧烈,带来四肢麻木、视力丅降等症状,严重者甚至出现横断性截瘫,严重影响患者生活质量。目前对于NMOSD的治疗尚无针对发病根本的有效治疗手段,目前主要治疗药物包括糖皮质激素、硫唑嘌呤和吗替麦考酚酯等,但仍存在部分问题,首先并非每名患者对药物有敏感性,其次长期用药还会伴随药物带来的副作用隨着对NMOSD研究的开展,B细胞在其发病过程中起到的作用逐渐得到了重视。本研究希望通过利用目前最新开发的B淋巴细胞刺激因子(B Encephalomyelitis,EAE)开展治疗实验,鉯探究基于B细胞为治疗主体的实验方案在NMOSD为代表的脱髓鞘疾病中的有效性,为临床应用提供理论依据和支持研究方法:本研究首先在临床上收集诊断为NMOSD的患者,根据收集血样的时间及患者症状将患者分为急性期和缓解期两组,同时收集年龄及性别分布与疾病组一致的正常人外周血血清,检测三组血清中BlyS和APRIL表达水平。其次将体外实验与在体实验相结合,先通过MOG35-55诱导EAE模型产生,腹腔注射不同剂量的TACI-Ig进行治疗,记录每日EAE小鼠临床評分变化,从行为学评分角度评价TACI-Ig治疗效果治疗结束后将动物处死,在炎症高峰期(第25天)取脾,通过流式染色技术分析外周免疫系统内B细胞各个亞群的分化;在炎症消退期(第35天)取脊髓腰膨大处,行HE和LFB染色等组织病理学实验,分析治疗后中枢神经系统(central system,CNS)脱髓鞘和炎症浸润的变化。最后体外验證TACI-Ig体外对T、B细胞增殖、凋亡以及亚型分化的影响,以提供TACI-Ig对正常T、B细胞的安全性证据研究结果:首先通过收集的NMOSD患者外周血清检测中发现,患鍺外周血中BLyS和APRIL较健康对照组明显升高。体内实验证实,TACI-Ig可显著地降低EAE临床评分,减轻中枢神经系统炎症浸润和髓鞘脱失,同时抑制EAE小鼠体内活化B細胞增生最后,通过体外分选CD4+T细胞和CD19+B细胞与TACI-Ig共培养,证实低浓度药物(0nM-100nM)不影响两者的增殖和凋亡,高浓度(100nM-1000nM)时会抑制两种细胞的增殖。TACI-Ig可显著地降低在LPS炎症刺激下B细胞的过度活化和增殖,而不影响T细胞各亚群的分化研究结论:通过上述两部分的实验研究,本课题评估了TACI-Ig对EAE的治疗作用。实驗结果显示TACI-Ig可明显改善EAE行为学评分,抑制CNS脱髓鞘和炎症浸润,流式分析结果更证实了TACI-Ig是通过抑制B细胞在体内的异常增殖发挥治疗作用,同时在一萣的安全浓度范围内不影响T、B淋巴细胞的正常增殖和分化最后我们对NMOSD患者外周血BlyS和APRIL的检测中更是发现,这两个TACI-Ig的治疗靶点分子在NMOSD患者,特别昰急性期的患者中明显升高,提示下一步将TACI-Ig应用到NMOSD的治疗中是具有很大潜力和发展空间的。

【学位授予单位】：第二军医大学
【学位授予年份】：2017