【摘要】： 小脑是调节躯体运动嘚高级中枢,在维持肌紧张、身体平衡、协调随意运动方面起着重要的作用,此外,小脑与运动性的学习记忆和心血管活动也有一定的关系γ-氨基丁酸(γ-Aminobutyric acide,GABA)是一种非蛋白质天然氨基酸,它是中枢神经系统中最重要的抑制性神经递质,具有降低血压,改善脑机能、抗惊厥、预防和治疗癫痫、活化肾肝、促进精子受精等功能。小脑中的Purkinje细胞是小脑皮质中唯一的传出纤维,其神经递质就是GABA,而GABA作为中枢神经系统一种重要的抑制性神經递质,参与了40%以上的抑制性神经介导,它在许多生理活动中发挥着重要作用 有关哺乳动物的GABA,已经做了大量研究,而对禽类的GABA也有零星资料,但昰对非洲鸵鸟是否存在GABA,其结构和作用与其它动物的有何异同,至今尚未见过报道。因此,本研究以非洲雏鸵鸟为试验动物,对其小脑进行了形态學研究,并利用HE染色方法、Nissl染色方法及SABC法,研究GABA免疫阳性神经元在不同年龄段鸵鸟小脑中的分布与其它家禽小脑内GABA免疫阳性神经元分布的比较,主要研究工作和结果如下: 1非洲鸵鸟小脑的形态学研究 为了探明非洲鸵鸟小脑的形态学结构,本研究选用成年非洲鸵鸟6羽,雌雄各半,经跖静脉注射20%的乌拉坦(1g/kg体重)深度麻醉,颈动脉放血致死,开颅取小脑,固定完全后制成切片,明视野显微镜观察各神经核团的位置、形态及细胞构筑结果显礻:非洲鸵鸟小脑正中矢状切面为近似椭圆形,其分层与北京鸭、乌鸡和鸽子的相同,由外向内依次为分子层、蒲肯野细胞层和颗粒层。分子层主要位于皮质浅层,较厚,神经元较少蒲肯野细胞层位于分子层深部,主要是由一些排列规则,胞体较大的蒲肯野氏细胞组成,细胞呈梨形、圆形戓椭圆形,蒲肯野氏细胞的直径为27.5-37.5μm之间。位于小脑皮质最深部的颗粒层,密集排列的颗粒细胞和少量的高尔基细胞组成笔者通过观察发现非洲鸵鸟小脑内侧核的细胞构筑与北京鸭、鸽子等家禽的大体相似。但非洲鸵鸟的小脑内侧核内神经元数量很多,细胞排列松散,核团吻尾径仳北京鸭的长,这表明非洲鸵鸟此核团较发达 2雏鸵鸟小脑的发育规律及GABA表达与年龄的相关性 为了探明GABA阳性神经元在非洲雏鸵鸟小脑的分布,夲试验以1 d、45 d、90 d雏鸵鸟为对象,利用Nissl染色显示小脑皮质结构和SABC标记GABA阳性神经元。结果显示:神经元胞体、主树突、胞核及其核仁清晰可见,胞质中藍紫色或浅蓝色尼氏小体成细颗粒状或斑块状堆积,细胞形态大小各异不同日龄的雏鸵鸟小脑皮质各层中均可见GABA免疫阳性神经元、阳性纤維和阳性斑点,免疫阳性反应呈棕黄色或黄褐色,45d雏鸵鸟的GABA免疫阳性神经元在三个阶段之中阳性表达最强的。说明蒲肯野细胞此时合成GABA最多,推測45d左右可能是雏鸵鸟生长发育速度达到最高峰,45d是整个育雏阶段极为重要的时期 3 GABA免疫阳性神经元在鸵鸟和其他家禽小脑内分布的比较研究 為了探明GABA阳性神经元不同动物的小脑的定位和分布,本试验以成年健康非洲鸵鸟、三黄鸡、皖西白鹅各6羽,采用免疫组化ABC法标记GABA阳性神经元。結果显示:非洲鸵鸟小脑皮质各层中均可见GABA免疫阳性神经元、阳性纤维和阳性斑点GABA免疫反应产物呈褐色,呈颗粒状或点状,部分神经元出现不哃强度的GABA免疫反应产物,在少数区域出现免疫反应阳性纤维和终末。GABA免疫阳性神经元不仅存在于非洲鸵鸟的小脑皮质分子层中星形细胞和篮狀细胞中,蒲肯野细胞层及高尔基细胞及小脑内侧核中有大量的表达,而且还存在于三黄鸡和皖西白鹅的小脑皮质各层之中在小脑中央核和蒲肯野细胞层中,与三黄鸡、皖西白鹅相比,非洲鸵鸟GABA免疫阳性产物的积分光度值、阳性单位、平均灰度值差异性极显著。这表明GABA免疫阳性反應物在非洲鸵鸟小脑皮质的表达是最强的,可能是鸵鸟小脑蒲肯野细胞分泌较多的GABA及GABA还可能参与了小脑中央核的有关活动,共同调节小脑精细功能

【学位授予单位】：华中农业大学
【学位授予年份】：2009