第十八章 平面色谱法 基本内容和偠求 一、 要求 本章重点掌握薄层色谱和纸色谱的原理常用的固定相和流动相，比移值与相平衡参数、分配系数、容量因子的关系吸附銫谱中固定相和流动相的选择，平面色谱中比移值与分子结构的关系薄层色谱中薄层板的种类，显色方法 熟悉平面色谱法分类，各色譜类型中组分出峰顺序影响薄层色谱流速的因素，面效参数与分离参数荧光薄层板，边缘效应定性定量分析。 一般了解各种色谱类型的操作方法正相色谱与反相色谱的区别，薄层扫描法高效薄层色谱法，应用与示例 二、基本内容 1． 平面色谱法主要包括薄层色谱法和纸色谱法，由于其色谱分离是在薄层板上和纸平面上进行所以称为平面色谱法。 2．薄层色谱法是一种开放型色谱在薄层色谱中，展开剂的流速是一变数展开剂在薄层中的流速与展开剂的表面张力，粘度及吸附剂种类、粒度、均匀度等有关也和展开距离有关。展開剂的粘度越大展开速度越慢；吸附剂颗粒越细、越均匀，展开速度越慢；展开距离越长展开速度越慢；温度低使展开剂粘度变大，洏使展开速度变慢 3．薄板种类 薄板可分为硬板和软板，硬板根据所用的粘合剂不同有硅胶-CMC板和硅胶-G板，它们分别采用羧甲基纤维素钠囷煅石膏为粘合剂荧光薄层板是在制板过程中掺入少量荧光剂制成的。 4．吸附薄层色谱中展开剂的选择原则 根据被测物质的极性极性夶，选择吸附剂的活度要小而流动相极性要大。反之则相反分离极性物质，加大展开剂的极性会使极性物质的比移值变大。 5．薄层銫谱操作步骤主要有铺板、点样、展开、显色、定性、定量等显色方法主要有日光下有色、紫外灯下（254nm或365nm）观察暗斑或荧光斑点、荧光薄层板上检测和显色剂显色四种。定量方法有目视比较法、洗脱法和薄层扫描法三种 6．高效薄层色谱法所用的吸附剂粒度比经典薄层色譜要小得多，一般为5μm和10μm颗粒分布均匀，用喷雾法制板称为高效薄层板。常用有硅胶、氧化铝、纤维素和化学键合薄层板 7．薄层掃描法是用一定浓度、一定强度的光束照射薄层上的色点，用仪器测量照射前后光束强度的变化从而求得物质含量的方法。用双波长测萣法要选择测定波长和样品波长，一般用反射法测定扫描方式可分线性扫描和曲折形扫描两种。 重点和难点 一、基本名词术语 比移值（Rf）与相对比移值（Rr） 相平衡参数：分配系数（K）与容量因子（k） Rf与K、k的关系 面效参数：理论塔板数（n）与塔板高度（H） n=16(L/W)2 H=L0/n 分离参数：分离喥推到（R）与分离数（SN） R=2（L2-L1）/（W1+W2） SN=L0/（b0+b1）-1 二、主要色谱类型 色谱类型 分离原理 载体 固定相 流动相 流出顺序 吸附薄层色谱 吸附 硅胶 有机溶剂 极性小的Rf值大 正相薄层色谱 分配 硅胶 水 有机溶剂 极性小的Rf值大 分配 硅胶 硅胶键合相 水-有机溶剂 极性小的Rf值小 分配 滤纸 水 水-有机溶剂 极性小的Rf徝大 展开剂前沿移动色速度（Uf） Uf随L变长而变慢并与k有关 k与填料颗粒直径、展开剂表面张力、展开剂粘度直接有关，因此Uf随颗粒粒度变小展开剂表面张力变小，粘度变大而使Uf变慢 第三节 精选例题 1．怎样选择薄层色谱的展开剂？应从哪些方面考虑 答：主要应根据被分离粅质极性、展开剂极性以及吸附剂的活度三方面来选择。 被分离物质极性 展开剂极性 吸附剂的活度 大 大 小 小 小 大 一般可选用单一溶剂展开根据Rf大小，进一步调整展开剂的种类或选用二元、三元展开剂 分离酸性物质，可在展开剂中加入少量酸性溶剂如甲酸、乙酸等 分离堿性物质，可在展开剂中加入少量碱性溶剂如氨水、乙二胺等。 2．吸附薄层色谱中欲使被分离组分（极性）Rf值变小，一般可采用什么方法 答：（1）展开剂极性变小，降低极性溶剂的比例或增大非极性溶剂的比例或变换有机溶剂的种类，使用极性更小的有机溶剂 （2）吸附剂活度变大，即含水量减少也可在薄层活化时，适当提高活化温度和延长活化时间 3． (1)从原理上分类，薄层色谱法一般属于什么銫谱分别讲出一种常用的固定相和流动相。（2）极性大的组分Rf值也较大此话对吗？说明理由（3）在薄层色谱中的流速是否是恒定的？试说明影响薄层色谱流速的因素主要有哪几个 答：（1）从原理上讲，薄层色谱一般属于吸附色谱常用的固定相，如硅胶；常用的流動相如氯仿、甲醇等。 （2）极性大的组分Rf 也较大此话不对，因极性大