尿检指标有三样指标超出参考值分别是酵母样细胞 细菌 和细菌计数超出范围是怎么回事需要怎样的治疗,很急求

急!!关于血球计数板和细菌计数的问题_百度知道
急!!关于血球计数板和细菌计数的问题
1.血球计数板和细菌计数板的差别是什么分别是什么样子的?细菌计数板的百科上特别具体地介绍了血球计数板的样子但是细菌计数板连张图都没有但是又说“细菌计数板较薄,可以使用油镜观...
1. 血球计数板和细菌计数板的差别是什么 分别是什么样子的?细菌计数板的百科上特别具体地介绍了血球计数板的样子 但是细菌计数板连张图都没有 但是又说 “细菌计数板较薄,可以使用油镜观察。而血球计数板较厚,不能使用油镜” 但是我用的是油镜 又觉得使用血球计数板的 就是像图上那个2.这个文库的资料里说 “或细胞数&200个/10mm2或&500个/10 mm2 时,说明稀释不当,需重新制备细胞悬液。”是什么意思?我用的是数五大格总数来计数的 想知道根据上面这段话 5格加、起、来(就是5格总数)需要大于、小于多少个菌数?3. 可以的话介绍一下细胞计数的方法都有哪些 只列名字也没关系 尽量多点我知道问题有点繁琐 大家帮帮忙 谢谢!
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eetaozheng
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血球计数法是不能使用油镜的。因为血球 计数法要使用盖玻片,盖上盖玻片可以确保计数室的高度是0.1mm(这个在你的血球计数板的左上角有标注)。在计数时,还要确保把计数室处于液体不同深度的微生物全部计入。不论是盖玻片厚度还是计数室的高度,都超过了油镜的工作距离(一般也就是在0.1mm左右)。所以,用血球计数法,应使用高倍镜观察。对于较大的细胞,如血细胞(名字来由)、酵母细胞,计数没有问题。对于一般的细菌而言,由于个体太小,在高倍镜下看不清,不适合用该方法。
我做的是酵母菌 就是用血球计数法用油镜的 现在不要跟我说不能用因为我已经做完了不可能重做一遍……我就想知道 如果用了血球计数法再用油镜 是不是数出来的总菌数会比实际的小很多?(因为下层的没数到)那如果用高倍镜下层的也能数到吗?
我不知道你的实验是怎么做下来的,太神奇了。估计镜头一放,就死死地把盖玻片压住才能看清楚,盖玻片必须微微变形才行。这样,计数室的高度就不到0.1mm了(造成计数不准)。另外,移动血球计数板的时候,非常容易把盖玻片弄碎。 是的,会漏数下层的。 用高倍镜可以全数进去,因为高倍镜工作距离较大,计数时可以调节镜头位置把处于液体不同深度的细胞全部数清
youngscientist
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1、这两种计数板的样子差不多,你的照片是血球计数板,主要是盖玻片下面的液体厚度为0.1mm,比较厚,不适用于细菌计数,细菌比血球小得多,细菌在这么厚的液体中会有几层,上层的能看到,下层的就看不到了;好像细菌计数板是0.02mm,反正比0.1薄。2、你的血球计数板上没小格的面积是1/400平方毫米,10平方毫米就是4000个小格。不要用这种板子计数细菌了,不准。3、稀释平板涂布法:菌液稀释后涂布平板,培养,数菌落数。定量PCR:提取DNA,定量。
条件有限 只能用这个……4000小格是160大格?160大格只能有500个菌?!
如果没有细菌计数板,建议用稀释平板涂布法。一块细菌计数板200元左右,买几个吧,国内有卖的。血球计数板数细菌不合适。做个比喻,游泳池中有多少人,容易数清,如果往游泳池中放一些小金鱼你就很难数清了,如果把小金鱼放在杯子中就可以数清了。
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我这两天正用这个东西做菌的计数,画菌的生长曲线,我的理解就是怎么用这个能计出数来就行是吧?细菌计数板,我前两天听一教微生物的老师说过,国外有这个东西,但国内暂未见到。我用的就是上图的这个。你用10倍镜观察,就会发现25个中格,每个中格里有16个小格和16个中格,每个中格里有25个小格的意思了。菌计数的时候,16个中格,只要查四个角上的中格里菌数,然后按公式计算就行了。如果是25个中格,那就四个角的中格加上正中间的中格中菌数,然后按公式计算就行了。只要理解了25*16和16*25,公式自然就明白了,就自然会用了。
嘿嘎嘎的小嘎嘎
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1.数红细胞用专用板,就是你图片上的版,不能用油镜,油镜是看细菌用的,看细菌用一张载玻片就行了,但是要烤干染色2.细胞数&200个/10mm2或&500个/10 mm2 时,属于异常临床结果了吧。不知道你要计数的是红细胞还是白细胞, 数的格子不一样的。白细胞数4角大方格,红细胞数中央大方格的25个中方格,每个中方格又有16个小方格。3.还是自己百度的,我也不知道你想问什么
擅长:暂未定制
细菌计数板的使用 准备 准备计数时,磨光的表面小心地用擦镜纸擦干净。盖玻片也要擦干净。 盖上盖玻片 在需要盖的周边区域需要用蒸馏水弄的微湿然后盖玻片要慢慢的从计数板的前端推入,直到盖玻片的前端边缘与计数板的划格子的区域处于同位。 注意:盖玻片是很容易坏掉的! 在外部支持和盖玻片之间的干扰线(牛顿环)的组成显示了盖玻片的准确位置。 计数板加样 取一个良好混合型的吸管并且放置一些初期的几滴液体。 把吸管的外部擦干然后保持吸管一定的角度直到小滴液体被吸管尖端吸上去。然后这滴液体被放置在盖玻片和计数板之间。由于盖玻片和计数板之间的毛细管现象作用的结果,两个平面之间的缝隙被灌满。在溶液要满出击数板截面的边缘之前,马上移走吸管的尖端。如果有可见气泡或者液体已经满出边缘并且进入其他的沟里,那么计数板就要擦干净并且重新加样。 计数 装载好的计数板被放置在显微镜台上然后计数格在低倍镜焦距中显示。高倍物镜要非常小心的操作,因为计数板比常规的要更厚。如果你不小心的话,会导致计数板或者物镜镜头的损伤。 如果可能的话,在作血细胞计数的时候使用机械平台的显微镜。显微镜的照明是重要的,太亮了会影响划格线的观察。光可以通过虹膜光圈减弱直到划得格子在背景中再次清晰可见。细胞/质粒的计数应该充分稀释到他们不再互相重叠,并且均匀的分配。 要完成计数检测需要扩大到期望的可见的细胞/质粒。细胞数量的计算推荐计数100方格作为排除少量的结果。 计数格在超过划线区域使用时需要均匀的分配,并且这个通过藉由三倍之数决定的方格支架在进入区段之内。 计数完100方格后总数除100(计数的方格数),来得到每格的平均值。乘稀释度,除1/4000(每个小方格的立方容积1/20 x 1/20 x 1/10 – 1/4000mm3)。这次计算得到的数字是原非稀释流质的每立方毫米的细胞数量。
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发布时间: 来源:安徽省医学协会信息中心
&&&&&& 作者:孙明洁,高燕,赵冬,王珂,& 靖学芳
【摘要】& 目的& 探讨一种简便易行的小鼠巨噬细胞吞噬酵母菌实验的改良法。 方法& 在巨噬细胞吞噬鸡红细胞和巨噬细胞吞噬酵母菌实验基础上建立一种新的吞噬实验方法。 结果& 实验组吞噬10min的结果吞噬百分率57%,吞噬20min的结果吞噬百分率86%,吞噬30min的结果吞噬百分率63%。& 结论& 结果显示小鼠巨噬细胞吞噬酵母菌20min的吞噬百分率可高达86%,说明这种改良法简单而有效。&&& &&& 【关键词】& 小鼠巨噬细胞;酵母菌;吞噬酵母菌实验改良法&&& &&& The mice macrophage swallows the saccharomycetes experimental improvement method&&&&&&&&&&& 【Abstract】& Objective& Discusses one kind of simple macrophage to swallow the saccharomycetes method.&& Methods& Swallows the chicken red blood cell by the macrophage and the macrophage swallows the saccharomycetes in the foundation newly to establish one kind to swallow experimental method.& Results& Experimental group,the phagocyte swallows saccharomycetes 10 minutes after to swallow the percentage to be possible to reach as high as 57%. The phagocyte swallows saccharomycetes 20 minutes after to swallow the percentage to be possible to reach as high as 86% . The phagocyte swallows saccharomycetes 30 minutes after to swallow the percentage to be possible to reach as high as 63%.& Conclusion& The result showed the mice macrophage swallows saccharomycetes 20 minutes after to swallow the percentage to be possible to reach as high as 86%,simply explains this kind of improvement method but to be effective. &&& &&& 【Key words】& mice macrophage;saccharomycete;swallows the saccharomycetes experimental improvement method&&& &&& 巨噬细胞对颗粒性抗原具有很强的吞噬功能,可用鸡红细胞、酵母菌等作为吞噬颗粒来观察其吞噬效果。多年来在实验课教学中,我们一直采用鸡红细胞作为吞噬颗粒,因为它具有个体大呈梭型,核明显并且着色清楚与其他细胞易区别的优点,但是也存在着一定的缺点,例如:费用高及血球制备比较麻烦等,再加上近年来高致病性禽流感的发生,在这种情况下,我们考虑到用酵母菌作为吞噬颗粒来观察其吞噬效果。经查阅有关资料,并结合我们的教学安排,考虑到整个实验所用的时间较长,以及所用的仪器设备对我们来讲在短期内解决都是个问题,面对这种情况,我们根据以往的实验课教学经验决定,在巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验和巨噬细胞吞噬酵母菌实验这两个实验的基础上,探索一种时间短、简便易行的新方法来达到预期的效果,于是做了改良的小鼠巨噬细胞吞噬酵母细胞实验。&&& &&& 1& 材料与方法&&& &&& 1.1& 实验动物& ICR小白鼠,体重18 ~ 22g,雄性,由首都医科大学实验动物部提供,颗粒饲料喂养。分笼饲养于空调室内,室温(23±2)℃,相对湿度45%~65%,自由饮用自来水,自动控制昼夜各12h,自动换气通风。&&& &&& 1.2& 实验材料& 金黄色葡萄球菌、酵母菌均由首都医科大学病原生物学系提供。瑞氏染料、甲醇均由北京化学试剂厂提供。0.9%氯化钠注射液由石家庄四药有限公司提供。&&& &&& 1.3& 方法&&& &&& 1.3.1& 金黄色葡萄球菌的制备& 将金黄色葡萄球菌接种到普通斜面培养基上,于37℃温箱培养后,每支培养基中加1ml的0.9 % 氯化钠注射液,反复吹打冲洗斜面培养物上的金黄色葡萄球菌,收集菌液,然后将收集到的菌液,参照标准比浊管用0.9% 氯化钠注射液调至为3亿/ml菌的菌液,放4℃冰箱备用。&&& &&& 1.3.2& 酵母菌菌液的制备& 将酵母菌接种到沙氏斜面培养基上,于37℃温箱培养后,每支培养基中加1ml的0.9 % 氯化钠注射液反复吹打冲洗斜面培养物上的酵母菌,收集菌液,然后将收集到的菌液,参照标准比浊管用0.9 % 氯化钠注射液调至为10亿/ml菌的菌液,放4℃冰箱备用。&&& &&& 1.3.3& 实验& 将小白鼠分成6组,每组3只。第1、2、3组为对照组,经腹腔注射0.9 % 氯化钠注射液0.6ml/只,第4、5、6组为实验组,经腹腔注射3亿/ml的金黄色葡萄球菌菌液0.6ml/只。48h后将所有的小白鼠腹腔均注射10亿/ml的酵母菌菌液1ml/只。注射10min后、20min后和30min后,取对照组、实验组各一组小白鼠,行颈椎脱臼处死,轻轻按摩腹部后,消毒小鼠腹部皮肤,持镊提起腹中部皮肤并剪开,暴露腹膜,避开血管剪开腹膜一小口。用毛细吸管取出腹腔液,并收集于试管中。每组的每只小鼠取腹腔液滴于3张玻片,每张一滴,推片,自然干燥,固定。滴加瑞氏染液30min后,加等量蒸馏水,染3min后,水冲,滤纸吸干,在显微镜油镜下观察结果。并且计算吞噬百分率[1~4]。&&& &&& 2& 结果&&& &&& 2.1& 对照组& 见图1。吞噬10mim的结果吞噬百分率5.5%,吞噬20min的结果吞噬百分率10%,吞噬30min的结果吞噬百分率7%。
&图1& 吞噬细胞吞噬酵母菌的对照组结果&&&&2.2& 实验组& 见图2。吞噬10min的结果吞噬百分率57%,吞噬20min的结果吞噬百分率86%,吞噬30min的结果吞噬百分率63%。
         图2& 吞噬细胞吞噬酵母菌的实验组结果&&& &&& 由图2所示,小鼠腹腔注射酵母菌液后20min的吞噬百分率是较高的。&&& &&& 3& 讨论&&&&&&& 机体的免疫系统是由非特异性免疫、体液免疫和细胞免疫共同构成的防御系统,单核巨细胞的吞噬能力是衡量机体非特异性免疫功能的标志之一。当细菌、异物等抗原性物质进入机体后,可迅速被单核巨噬细胞系统吞噬和清除,因而巨噬细胞吞噬百分率的多少可以反映其吞噬能力的高低,针对病原微生物侵袭和体内细胞变异,体液免疫和细胞免疫通过形成抗体或产生细胞因子等方式针对特异性抗原产生各种生物学效应[5]。&&&&&&& 本实验利用免疫学和微生物学实验原理,在小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞和小鼠巨噬细胞吞噬酵母菌实验的基础上加以改进,参照前一个实验利用注射金黄色葡萄球菌吸引巨噬细胞向腹腔趋化后再注射酵母菌让它在体内吞噬的优点,又避免了后一个实验在体外吞噬所利用的实验材料及仪器设备的烦琐过程,例如各种液体的配制和使用及37℃温箱培养等。另外,将后一个实验的酵母菌的制备加以简化把计数步骤改为用标准比浊管比浊的方法,即节省了时间又节省了实验材料等。 &&& &&& 现将三个实验方法总结见表1。
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&&& 总之,小鼠巨噬细胞吞噬酵母菌实验的改良法简便而有效。
【参考文献】
&&& 1& 朱正美,刘辉.& 简明免疫学技术. 北京:科学出版社,7.&&& 2& 张子康,何光泽.& 医学微生物学与免疫学实验教程.成都:四川科学技术出版社,4.&&& 3& 靖学芳,赵文明.& 医学免疫学和微生物学实验指导.北京: 首都医科大学,.&&& 4& 吕世静,陈育民.& 免疫学检验.北京:人民卫生出版社,.&&& 5& 刘春丽,张风林,李明凯,等. 山楂提取物对免疫功能的调节作用. 中华中西医杂志,):.
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