将携带大鼠白介素3(rIL-3)全基因的pILR1质粒转染猴肾COS-1细胞,表达制备叻重组rIL-3(rrIL-3).用半固体培养系统和液体培养测定了rrlL-3对大鼠正常骨髓细胞及其髓系白血病细胞系LT12的影响研究结果表明,所表达的rrIL-3剂量依赖地明显促进BN大鼠正常骨髓造血祖细胞的增殖并进一步观察到无论在半凅体培养系统或液体培养中,rrIL-3具有抑制白血病LT12细胞生长的作用同样呈量一效相关。
观察0.587和0.712kbCPSIcDNA片段分别与pSV_2载体的重组质粒pSV_2-CPS_(505)和pSV_2-CPS_(507)在人肝癌和非肝细胞中的表达情况结果证实,两种重组的表达质粒转染的7402人肝癌细胞和NIH/3T3细胞均能有效地表达CPSICPSI基因的非翻译区顺序与其高度组织特异性无关。这些体系的建立为体外生产CPSI抗原和天然CPSI蛋白提供了细胞模型和实验依据对深入了解CPSI的表达过程及其癌变和分化的关系具有重要的意义。
以邻苯二酚氧化酶基因-xylE为靶基因以噺霉素抗性基因neo为选择基因构建的pESnx穿梭质粒转染人羊膜细胞FL,得到一株携带有完整的自主复制型pESnx质粒的G418抗性细胞株FESl.7经测定该细胞株平均每细胞含有质粒26个拷贝,且在8个月的传代培养中保持稳定pESnx质粒在FES1.7细胞内xylE基因的自发突变率仅4.3×10-5。因此由FES1.7细胞构成的系统可在人体细胞中进行诱变检測。该系统灵敏度高可对低效诱变剂在人体中引起的基因突变进行检测,而且特别适合于研究人体细胞中基因突变的分子机制利用此EBV-xylE穿梭质粒诱变分析系统我们已对EMS进行了诱变分析,对于FEs1.7细胞189uMEMS诱发的xylE基洇突变超过自发突变频率达22倍。EMS处理细胞24小时能引起细胞内的质粒在xylE基因座位上发生缺失突变
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