如何确定HPLC的质谱进样浓度度

上样的样品量
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1.吸附色谱(AbsorptionChromatography)2.分配色谱(PartitionChromatography)3.离子色谱(IonChromat...
气相色谱工作原理:是利用试样中各组份在气相和固定液液相间的分配系数不同,当汽化后的试样被载气带入色谱柱中运行时,组份就在其中的两相间进行反复多次分配,由于固定相...
新购买的“高效液相色谱柱”一般 需要做一下3点: 1:用甲醇冲洗柱子30分钟到1个小时; 2:在1的步骤下,使用甲醇:水=1::9 作为流动相冲洗柱子30分钟以...
大的类型有方法误差,操作误差,随机误差等等
答: 电脑怎么修改wifi密码,小孩子经常上WIFI打游戏,想改密码让他不能玩。
答: 买路由肯定可以,拿一根网线建个局域网也应该可以
答: 门户网站
门户(portal)。原意是指正门、入口,现多用于互联网的门户网站和企业应用系统的门户系统。
这里是一个应用框架,它将各种应用系统、数据资源...
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【求助】高效液相色谱法含量测定标准品进样原则???
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这个帖子发布于5年零216天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
有关高效液相色谱法含量测定标准品进样原则是什么?
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对照品溶液1进样1针,对照品溶液2进样5针计算峰面积的RSD≤2%来保证你的SYS
供试品溶液两份个1针。计算:用(对照1浓度/对照1峰面积+对照2浓度/对照2峰面积平均值)/2=F含量=样品峰面积*F/样品浓度(样品浓度折水分)两个含量值平均值为最终结果,并且含量的结果相对偏差要小于1%
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成品含量检验,是称一个标,扎两针平行就行,还是进五针平均,或是称双标…………
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主要是你们怎么规定来着的一般是,双标....园子类似的讨论很多
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一般是定一个标准品,进6针~然后选连续的 5针,取平均值,作为对照
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我们通常是 两针对照 6针样品 这样也大概的看了下系统适应性怎么样
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依然很迷茫!!!
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5针对照考察系统适应性,2针检查溶液,双样双针。
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标准品溶液5+2较好,平行样,一个进5,一个进2,5的那个算进样精密度。
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那用哪个算含量呢?是两针平均,还是5针平均。或是7针?7针那个怎么平均呢???
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这个看你申报资料的标准是什么
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还要看你做的是按照国内标准还是出口标准,举例说,国标一般要求就是双标,3+2进样;但如果药品抽口按照欧盟或美国标准,就是直接单标,6针。
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对照品溶液1进样5针,5针峰面 积的RSD≤2%。对照品溶液2、供试品溶液1及供试品溶液2各进样两针按平均值计。
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对照品溶液1进样1针,对照品溶液2进样5针计算峰面积的RSD≤2%来保证你的SYS
供试品溶液两份个1针。计算:用(对照1浓度/对照1峰面积+对照2浓度/对照2峰面积平均值)/2=F含量=样品峰面积*F/样品浓度(样品浓度折水分)两个含量值平均值为最终结果,并且含量的结果相对偏差要小于1%
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关于丁香园关注今日:2 | 主题:305964
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【讨论】大家在HPLC实验中一般进样量有多大?
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这个帖子发布于12年零175天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
如以15cm*4.6mm,5um柱为例,大家在实验中通常采用的进样量是多少?最大曾经有过多少而没引起柱超载?我原来的概念是20ul,曾经一个实验试过50ul而峰形就变得很差。现在的实验老板竟然要我进100ul,还说没问题。我很是担心!
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进样量的大小主要看检测目的1)有些时候如果目的是一些毒性较大杂质或危害较大中间体残留,会采用高浓度,大进样量而不会顾及主峰的过载情况,比如一些头孢类聚合物和一些手性杂质;2)如果进行一般样品测定,采用大进样量是不利的,一般会采用高浓度低进样量的方法,这样峰展宽较小,分离度,峰纯度,柱效各方面都可以,较美观cleverwdw wrote:如以15cm*4.6mm,5um柱为例,大家在实验中通常采用的进样量是多少?最大曾经有过多少而没引起柱超载?我原来的概念是20ul,曾经一个实验试过50ul而峰形就变得很差。现在的实验老板竟然要我进100ul,还说没问题。我很是担心!
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我是做药代动力学实验的。由于化合物的量很少,所以一般都采用小鼠进行试验。这样取血量就很有限。所以为了尽可能的测定药物浓度,才采用100ul。就是不知道这样大的进样量能接受吗?
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应该没问题,前提是这样大的进样量能够分开,不过你做的是血样,浓度也不会太高,不会有问题的.另外,你可以把样品浓缩一下,提高浓度,也有利于样品的检测.
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Phenomenex的建议是:4.6mm内径150mm长的分析柱,比较典型的进样量大概是:100 µg样品或者10 µL样品,最大进样量大概是2.5 mg或者200µL.样品峰型不好跟很多因素有关,比如说样品overload柱子。此外对反相柱,如果你的样品在甲醇里头,流动相基本是水相,如果进样量大会导致部分样品提前elute.
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没问题,只要你的样品的浓度不要太高,否则。。。
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对反相柱,如果你的样品在甲醇里头,流动相基本是水相,如果进样量大会导致部分样品提前elute.能讲讲原因吗?我老板也是要求我样品用乙腈配的要先用水稀释一倍,否则会再前面都跑掉。可是以前做实验也有很多次用纯甲醇或乙腈进样,怎么没发现这个问题?
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丁香园荣誉版主
偶是进20的拉但是偶有自动进样器所以重复性还比较OK拉
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进样量应该决定于配置的样品浓度。如果配制的浓度很高,可能进1μL都嫌多;假如配制的浓度很低,进样量高些也无所谓。
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只要塔板数,拖尾因子,分离度等参数能达到分析要求就行,不过较大的进样量会使柱外峰宽效应培加,因此当其它方法不能提高分析效能时你可考虑是不是减小进样体积看看。
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液相色谱分类管理员
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求助高效液相色谱进样量问题
领域:生物技术
求助高效液相色谱进样量问题
悬赏:5枚色谱币  回答:6  浏览:8427  提问时间: 9:44:22
本人刚接触液相色谱,想要检测某饮料中某一物质的含量采用外标法,该物质的大体含量不清楚,看了几篇参考文献说外标法中浓度范围最好包括样品浓度,这该怎么做呢?难道扩大外标法中的浓度范围吗,这样好像比较麻烦又不见得准确啊?还有就是进样量应该怎么确定啊?
后即可回答该问题或发表自己的观点和看法
级别:色谱三年级
领域:液相色谱
20ul都已很大了,我们实验室以前用10
回答时间: 17:01:36
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级别:色谱三年级
领域:石油化工
一般情况下,液相色谱进样量1UL就足够了。
回答时间: 14:51:36
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级别:色谱三年级
领域:气相色谱
先进一针看看,是不是在外标的浓度范围里面,如果超出可以进行稀释
回答时间: 14:39:19
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级别:色谱本科生
领域:气相色谱
至少先知道大体多少,提前做实验吧,然后选择外标浓度,进样量最终还是根据你的样品浓度来定的,还有看你用的是哪个品牌的仪器了?
回答时间: 16:55:53
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被采纳答案
级别:色谱高中生
领域:化学药品
首先明确两点:& &1.要检测含量有没有检测方法,有方法的话,一般要求配制对照品溶液及被测样品溶液的浓度都有的;
& &2.你所用的液相色谱仪是哪一种,进样量范围支持多大,一般的手动进样用的定量环一般为20ul,自动进样的一般为100ul。明确了这两点后再检测。& &3.一般来说,对于你上述情况而言,外标法浓度范围最好包括样品浓度,这个问题牵扯到分析方法验证中的相关内容,一般验证的浓度范围要包括所要检测样品的浓度,这样在用外标法计算结果才可信,如果超出了验证范围,就无可靠的数据支持了,计算结果变得毫无意义,比如:含量分析方法验证中准确度的验证范围为检测浓度的50%-150%,就是说你在以后的检测中所配制的样品浓度必须在50%-150%内, 又如你的检测浓度为1mg/ml,那么你所配制的样品浓度就必须在0.5mg/ml-1.5mg/ml,这样检测结果才符合准确度的要求。& &4.关于进样量的确定也牵扯到分析方法验证当中的内容,在分析方法验证中要对定量限进行验证,所谓定量限即可以进行计算,计算结果并被认可的样品量。如你的样品在日常检测中的量为1mg,而你的定量限为10ng,那么当你的检测样品量大于10ng时才可以计算含量,小于10ng时就不被认可。一般样品进样量是定量限的倍.& &5.你可以先配个对照溶液,浓度为0.1mg/ml,根据响应值再调整检测浓度,可以的话测个定量限(主峰响应因子/噪音峰响应因子=10,或大于10但不能小于10或大于10太多,10-15这个范围最好),然后根据4中描述确定检测浓度,一般对照浓度和样品浓度一致即可。& &6.随意配个样品溶液,浓度不定,进液相看下响应值多高,和5中的对照主峰的响应值进行比较,然后调整浓度,后就可以检测含量了。先试试做,有问题再问哈。
回答时间: 16:54:59
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我想问问我测得样品中所含物质不确定,我只是先想测测看有什么物质,而对于各物质的浓度大小更不知道?请问此时标准曲线的浓度范围还有就是样品的进样量该怎么确定?还要标曲和各样品之间的进样量可以不同吗
采纳时间: 17:24:43
级别:色谱四年级
领域:液相色谱
配一个已知浓度的对照(合理范围内),制备一个或几个样品液(浓度可以不同),分别进一定体积,根据数据估算,尽量使对照和样品的进样量相同(别超过20ul),因为常用的定量环是20ul的。
回答时间: 10:34:51
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