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养过PC12细胞的虫友们请进来
本人打算养PC12细胞，查了不少资料也有一定的疑惑，先提出一些困惑，希望大家一起讨论，都有所提高：
1、就培养容器的选着，有培养瓶，有培养皿，有培养板，我觉得在养殖过程中应该用培养皿，在毒性试验的过程中应该用培养板，就培养皿的选着有玻璃的，有聚酯的，我不知道到底选什么类型的，是不是培养皿灭菌之后就能直接用，要不要平铺聚糖类物质？
2、就传代而言，是不是离心完去上清，然后加新的培养液，吹打均匀就行了？还是先吹打在离心？然后在换液？具体操作有没有人指导一下，如果谁养过的话。
3、就培养液的选择问题，是不是一般人养的多半是低分化和高分化的，应该咩有人养完全分化的PC12吧，据说完全分化后的是不传代的，所以低分化或者高分化，的应该是大部分研究者选的，应该分化后的比未分化的更具有神经敏感性。分化后的PC12细胞培养液应该是：高糖DMEM+10%FBS，也有人用1640（加双抗）+10%FBS，分化后的不需要封闭分化位点，所以我觉得应该不需要加HS，不知道这样的理解对不对，请了解熟悉的虫友指正。
4、就PC12细胞的冻存问题，我看到的资料比较少，是不是加入DOME什么的，直接放入-70°C的冰箱就行了？解冻过程大家可以查一些资料，感觉还是比较详细的。还是希望养过的虫友指导指导。
-----祝开心每一天
:D你觉得在养殖过程中注意哪几点，就我上面的提出的问题，你应该都劝经历过，希望详细说说你的见解。
额，谢谢你的留言，终于看到有价值的了，请问你是养PC12细胞的吗？:D
额，要100次以上啊？你也是养pc12的吧？
正确，昨天开始养，最近查了点资料，你能不能先说说第一次传代换液注意事项。
i不好意思，我还没有开始做这个项目呢。具体怎么操作我也还不清楚呢。
如果时间不是很长的话，那就换液了，换成有血清的，影响不大
您好！请问你有没有pc12细胞？有的话可不可以传一瓶给我。我也在养pc12细胞，但由于意外，全部没了。不甚感激！以后也希望多跟你交流交流！
我的联系方式为
我有个疑问，pc12细胞是贴壁的吗？为什么我查的资料还有养出来的细胞是半悬浮半贴壁的？
你好，请问你们实验室还有PC12细胞吗，最近想用这个细胞，可以跟你们实验室交换细胞吗？
对培养器材包被是怎么操作？加多聚赖氨酸吗？
请问PC12细胞胰酶消化是多大浓度，多长时间啊？我做的是未分化细胞，必须消化。
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【求助】低分化PC12细胞传代后生长情况
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这个帖子发布于5年零290天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
最近养低分化PC12细胞，来源是原来老师冻存的一管细胞，刚解冻是很好，可是传到第二代时瓶底就出现了一层类似胶原样的物质，细胞的形态也没有刚解冻时的好，不是刚开始漂亮的梭形，而是月牙形，而且细胞喜欢首尾相连成圆形生长，大家的低分化有这种现象吗？细胞团与细胞团之间有很大空隙，一个细胞也不长，充满了一层胶原物质，我以为是瓶子没刷干净的问题，把瓶子重新刷了还是有，我传代的时候是直接吹打，每次因为贴壁比较牢固都有20%左右的细胞不能完全吹下来，后来就弃去原液后先用手拍打，再吹打，这样能好点，可还是吹不完全，大家传代的时候有什么好办法吗？用胰酶是不是对细胞不好啊，有没有不用胰酶的办法，还有我的细胞有一层胶原样的物质的原因是什么？是因为每次传代的时候细胞损伤后残留的碎片吗？感觉铺的很均匀，照片照不出来这种效果，但还是照了几张，
不知道邀请谁？试试他们
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还是用胰酶消化吧，看到园里有人说过直接吹打对细胞的损伤不比胰酶小。培养瓶你可以试试一次性的，有多聚赖氨酸包被的那种，效果可能好点。
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民间恺撒 还是用胰酶消化吧，看到园里有人说过直接吹打对细胞的损伤不比胰酶小。培养瓶你可以试试一次性的，有多聚赖氨酸包被的那种，效果可能好点。是啊，早知道一开始就用了，今天实验室的老师在，弄清楚了，原来我的那些胶原样的东西都是细胞碎片啊！细胞贴壁太牢固，我不用胰酶直接吹打强行分离，把细胞给吹死了，唉，在老师帮助下用胰酶传了最后一瓶，效果很好，希望这瓶能能长好，
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这是昨天用胰酶传代后的细胞，
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但是可惜的是在镜下发现了霉菌，我把细胞重新消化了一下，霉菌和一部分细胞弃去，原代培养，不知道能不能彻底去除，希望明天能好！大家说哪些步骤最容易污染？感觉操作中没有特别明显的污染地方，
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杯具了， 细胞彻底挂了，只能重新养了，找找原因吧，
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你好！请问你们实验室现在还有人养PC12细胞吗？这个霉菌是怎样判断的呢？
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关于丁香园PC12细胞低分化、高分化有哪些区别(未分化,细胞库,营养药,神经) - 细胞实验 - 生物秀
标题: PC12细胞低分化、高分化有哪些区别(未分化,细胞库,营养药,神经)
摘要: [PC12细胞低分化、高分化有哪些区别(未分化,细胞库,营养药,神经)] 中科院上海所细胞库有PC12细胞未分化、低分化、高分化三种。我打算用H2O2损伤PC12细胞后，用MTT法检测神经营养药对细胞的增殖。未分化的应该不合适，那么高、低分化用哪种呢？ 关键词:[未分化 细胞库 神经 营养药]……
中科院上海所细胞库有PC12细胞未分化、低分化、高分化三种。我打算用H2O2损伤PC12细胞后，用MTT法检测神经营养药对细胞的增殖。未分化的应该不合适，那么高、低分化用哪种呢？
回复自己顶一下。没人知道么
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