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菊天牛是菊花的主要害虫之一。科研人员将抗虫基凶转入菊花，培育出抗虫菊花。下图是获得转基因菊花的技术流程。请据图回答：（注：卡那霉素抗性基因（KanR为标记基因，菊花叶片对卡那霉素高度敏感）(l)质粒是基因工程中最常用的载体，其化学本质是
，此外还可用噬菌体、动植物病毒作用为载体。(2)下图限制酶M和N切割产生的黏性末端是
，连接它们所需要的基本工具是
。(3)为了促进土壤农杆菌吸收重组质粒，可用
处理；使其处于感受态。(4)将愈伤组织转移到添加一定浓度植物激素、营养物质以及
的固体培养基中，在适宜条件下进行培养，筛选转基因菊花。(5)用PCR方法检测转基因菊花是否含有目的基因时，需根据抗虫基因（目的基因）两端的部分碱基序列设计特异引物，若其中一种引物共用了31个，则目的基因最多扩增了
次。(6)将转基因菊花嫩茎及叶片与人工饲料以适当比例混合后饲喂菊天牛2龄幼虫，实验结果如下表所示。请据表回答（
）①对照组应饲喂等量的
。②据表分析，
差异显著，说明转基因菊花对菊天牛2龄幼虫有较强的毒杀作用。 
(1)小型环状DNA
(2)GATC (CTAG) DNA连接酶 (3)Ca2+（或“CaCl2"）
(4)卡那霉素 (5)5
(6)①非转基因菊花嫩茎及叶片与人工饲料混合物 ②实验组与对照组死亡率
试题分析：（1）质粒为细菌细胞质的环状DNA。（2）据图分析, 限制酶M和N切割后产生的相同黏性末端是GATC。需要DNA连接酶连接。(3)可以用氯化钙溶液处理...
考点分析：
考点1：基因工程、生物技术的安全性和伦理问题
相关试题推荐
(1)在哺乳动物的核转移实验中，一般通过
（物理方法）将受体细胞激活，使其进行细胞分裂和发育，当胚胎发育到
阶段时，将胚胎移入受体（代孕）动物体内。(2)一般情况下，体外扩增目的基因常用的方法是
。在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的
。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用
处理。(3)获取干扰素的传统方法是从人的白细胞中提取，但产量很低。科学家利用
酶将干扰素基因与牛乳腺蛋白基因的启动子（即RNA聚合酶
的部位）等调控组件连接在一起，采用
的方法将重组DNA导入牛的
细胞中，经胚胎早期培养一段时间后移植入母体内发育成熟，即可获得能产生干扰素的转基因牛，大大提高了干扰素的产量。 
阅读如下资料：资料甲；噬菌体溶菌酶是由各种能够感染细菌细胞的噬菌体自身编码的，在感染宿主细胞的过程中起到溶解细菌细胞壁的作用。资料乙：乳溶菌酶在温度较高时易失去活性，科学家对编码T4溶菌酶的基因进行改造，使其表达的T4溶茵酶的第3位的异亮氨酸变为半胱氨酸，在该半胱氨酸与第97为的半胱氨酸之间形成了一个二硫键，提高了T4溶菌酶的耐热性。资料丙：现已有科学家利用毕赤酵母表达了T4溶菌酶蛋白。回答下列问题：（1）噬菌体主要由
构成。根据资料甲推测，溶菌酶主要在噬菌体增殖的
阶段起作用。（2）在资料乙中，引起T4溶菌酶空间结构改变的原因足组成该酶肽链的
序列发生了改变。已知噬菌体的基因和原核细胞基因结构相似，则实例中科学家是对T。溶菌酶的基因中的
区进行了改造。（3）资料丙中构建基因表达载体常用的工具酶是
。该实例中最好选择
作为运载体。（4）若需要大规模生产T4溶菌酶还需选用生长曲线中
期的酵母作为菌种，生产时选用的培养基按物理性质来看应属于
培养基。 
利用转基因奶牛乳腺生物反应器可生产人的生长激素，根据下图回答有关问题。（1）基因表达载体的组成，除了目的基因外，还必须有
以及标记基因等。（2）在体外受精前，要对精子进行
处理，对于牛的精子常采用
。（3）图中①过程常采用
，图中②过程的培养液成分比较复杂，除一些无机盐和有机盐类外，还需要添加维生素、
、氨基酸、核苷酸等成分，以及
等物质。（4）早期胚胎发育到
才进行移植。 
下图是利用工程菌(大肠杆菌)生产人生长激素的实验流程。所用的pBR322质粒含有限制酶pstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ的切点各一个，且三种酶切割形成的末端各不相同，而Ampr表示青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因。请回答以下相关问题：(1)过程①所用到的组织细胞是________________，过程④所用的酶是________。⑤过程常用________溶液处理大肠杆菌。(2)如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ对图中质粒进行切割，用一种酶、两种酶和三种酶分别切割时形成的DNA片段种类与用一种酶和两种酶分别切割时形成的DNA片段种类________(填“相同”或“不同”)。(3)如果只用限制酶PstⅠ切割目的基因和质粒，完成过程④、⑤后(受体大肠杆菌不含Ampr、Tetr质粒)，将三角瓶内的大肠杆菌先接种到甲培养基上，形成菌落后用无菌牙签挑取培养基甲上的单个菌落，分别接种到乙和丙两个培养基的相同位置上，一段时间后，菌落的生长状况如图乙、丙所示。接种到甲培养基上的目的是筛选________________的大肠杆菌；接种到培养基乙上的大肠杆菌菌落，能存活的大肠杆菌体内导入的是______________________的质粒。含有目的基因的大肠杆菌在培养基乙和丙上的生存情况是____________________。(4)将大肠杆菌培养在含青霉素、四环素培养基上的过程，属于基因工程基本操作中的__________________________步骤。 
植物像人一样也会生病,引起植物生病的微生物称为病原微生物,主要有病毒、真菌和细菌等。烟草由于受到烟草花叶病毒的侵染而减产,我国科学家利用基因工程技术成功地培育出抗烟草花叶病毒的烟草,下图是转基因烟草培育过程示意图,据图分析回答下列问题。(1)质粒是基因工程中常用的载体,质粒是一种裸露的、结构简单、具有自我复制能力的很小的　　　　　　分子,至少有一个至多个　　　　　　位点。载体除质粒之外,还可以用　　　　　　　、　　　　　等。(2)作为目的基因载体的质粒往往要带有一个抗生素抗性基因,该抗性基因主要用于　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。(3)基因表达载体导入烟草细胞常用的方法是　　　　　　　　　　。(4)转基因工程改良动植物品种,最突出的优点是　　　　　　　　　　　　　　　　　　。(5)一个烟草体细胞通过组织培养技术培育成一个完整的烟草植株个体,原理是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。组织培养过程中,在培养基中要添加的两种激素是　　　　　　　。 
题型：综合题
难度：困难
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满分5 学习网 . All Rights Reserved.题号：4270671题型：综合题难度：一般引用次数：111更新时间：16/07/22
回答利用农杆菌转化法培育转基因植物的相关问题：（1）培育转基因植物过程的核心步骤是构建基因表达载体，其目的是使目的基因在受体细胞中&&&&&&&&&&&&，并且可以通过复制遗传给下一代，同时，使目的基因表达和发挥作用。（2）构建基因表达载体时，可利用DNA连接酶连接被限制酶切开的&&&&&&&&&&&&&&&键。（3）组成基因表达载体的单体是&&&&&&&&&&&&&&。基因表达载体中的启动子是识别和结合的部位，这种结合完成后才能驱动目的基因通过&&&&&&&&&&（填过程）合成mRNA。（4）用两种限制酶XbaI和SacI（两种酶切出的黏性末端不同）切割某DNA，获得含目的基因的片段。若利用该片段构建基因表达载体，应选用下图中的何种Ti质粒？（&&&）（5）将受体细胞培养成植株需要应用&&&&&&&&&&&技术，该技术的理论依据是&&&&&&&&&&&&&。
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【知识点】
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利用生物工程技术，可从转基因奶山羊乳汁中分离获得人凝血因子IV，用于血友病的治疗。请回答下列问题：根据凝血因子IV基因的碱基序列，可用____技术获取并扩增基因。构建该基因表达载体时，所用到的工具酶是____&&_，将人凝血因子IV基因与________的启动子等调控组件重组在一起。（2）将目的基因表达载体导入奶山羊受精卵的常用方法是______。（3）在体外胚胎培养时，应选用囊胚的_____进行DNA分析，用于选择雌性胚胎。此期的胚胎也适于胚胎分割移植，此技术的优点是________。（4）人凝血因子IV是一种胞外酶，该蛋白的加工是在______等细胞器上进行的。人凝血因子IV只在乳腺细胞合成的原因是___________________。
玉米中赖氨酸的含量较低，原因是赖氨酸合成过程中，天冬氨酸激酶和二氢吡啶二羧酸合成酶的活性受细胞内赖氨酸浓度的影响。为此，有人提出，将天冬氨酸激酶第352位苏氨酸变成异亮氨酸，将二氢吡啶二羧酸合成酶第104位天冬氨酸变成异亮氨酸，使玉米叶片和种子游离的赖氨酸分别提高5倍和2倍。请回答：（1）上述材料中，赖氨酸的高产，是通过蛋白质工程来实现的，它通过基因修饰或合成，对现有蛋白质改造后形成的。除此外，还可通过&&&&&&&&&&&&育种，获得赖氨酸的高产，它是在&&&&&&&&&&&&等物理因素或亚硝酸、碱基类似物等化学因素下改变基因的碱基对排列顺序，经选育而得。（2）在基因改造时，需要用到2种工具酶。其中一种酶，如：Eocoli DNA连接酶，T4DNA连接酶，后者可以缝合双链DNA片段的&&&&&&&&&&&&&&末端。除工具酶外，还需要的工具有&&&&&&&&&&&。（3）将改造后的基因导入玉米时，常用&&&&&&&&&&&&法，它与常见的双子叶植物的导入方法不同。导入目的基因后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，还需要进行检测与鉴定，检测对象有&&&&&&&&（填一种合理的对象）。有时还要进行个体生物学水平的鉴定。（4）进行上述基因改造后的玉米体细胞，通过&&&&&&&&&&&&技术得到高产赖氨酸的玉米植株。有人认为转基因植物可以通过花粉传播，会使周围植物受到基因污染，为此，他们建议导入的目的基因需整合在受体的&&&&&&&&&&上，而不是染色体。
(8分，除特别说明外每空1分)人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，其疫苗生产和抗体制备的流程之一如下图：请回答：（1）过程①代表的是&&&&&&&&。（2）过程②构建A基因表过载体时，必须使用___&&&&&&&&&&和&&&&&&&&&两种工具酶。（3）过程③采用的实验技术是&&&&&&&，获得的X是&&&&&&&&&&&。（4）对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的&&&&&&&&&所制备的疫苗。对该传染病疑似患者确诊时，可从疑似患者体内分离病毒，与已知病毒进行&&&&&&&&&&比较，或用图中的&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&（2分）进行特异性结合检测。
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下列有关物质进出细胞方式的相关描述，正确的是（&&&）A．哺乳动物成熟红细胞主动运输吸收钾所需能量来自该细胞的有氧呼吸B．人甲状腺滤泡细胞通过主动运输摄取碘C．土壤温度不影响植物根系对矿质元素离子的吸收D．抗体在载体蛋白协助下主动运输到细胞外
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菊天牛是菊花的主要害虫之一。科研人员将抗虫基凶转入菊花，培育出抗虫菊花。下图是获得转基因菊花的技术流程。请据图回答：（注：卡那霉素抗性基因（KanR为标记基因，菊花叶片对卡那霉素高度敏感）(l)质粒是基因工程中最常用的载体，其化学本质是&&&&&，此外还可用噬菌体、动植物病毒作用为载体。(2)下图限制酶M和N切割产生的黏性末端是&&&&&，连接它们所需要的基本工具是&&&&&。(3)为了促进土壤农杆菌吸收重组质粒，可用&&&&&处理；使其处于感受态。(4)将愈伤组织转移到添加一定浓度植物激素、营养物质以及&&&&&的固体培养基中，在适宜条件下进行培养，筛选转基因菊花。(5)用PCR方法检测转基因菊花是否含有目的基因时，需根据抗虫基因（目的基因）两端的部分碱基序列设计特异引物，若其中一种引物共用了31个，则目的基因最多扩增了&&&&&次。(6)将转基因菊花嫩茎及叶片与人工饲料以适当比例混合后饲喂菊天牛2龄幼虫，实验结果如下表所示。请据表回答（&&&）①对照组应饲喂等量的&&&&&。②据表分析，&&&&&差异显著，说明转基因菊花对菊天牛2龄幼虫有较强的毒杀作用。
答案(1)小型环状DNA(2)GATC (CTAG)&&& DNA连接酶&&& (3)Ca2+（或“CaCl2"）(4)卡那霉素&&& (5)5(6)①非转基因菊花嫩茎及叶片与人工饲料混合物&&&②实验组与对照组死亡率
解析试题分析：（1）质粒为细菌细胞质的环状DNA。（2）据图分析, 限制酶M和N切割后产生的相同黏性末端是GATC。需要DNA连接酶连接。(3)可以用氯化钙溶液处理土壤农杆菌，使之处于溶液吸收周围DNA状态，即感受态。（4）标记基因对应性状用来筛选导入目的基因的受体细胞，故要将愈伤组织培养在含卡那霉素培养基，（5）每生成一条子链需要一个引物，引物一共用了31个，故共生成31条子链，加上原来的一条模板链，共有32条DNA链，有16个DNA，16=25，故目的基因最多扩增了5次。（6）实验目的是探究转基因植株的杀虫效果，故自变量为转基因植株，实验组喂转基因植株，对照组应饲喂等量的正常植株。因变量为害虫数量，即实验组和对照组死亡率。考点：本题考查基因工程相关知识和实验设计，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构能力；能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确的结论能力；具有对一些生物学问题进行初步探究的能力，包括运用观察、实验与调查、假说演绎、建立模型与系统分析等科学研究方法能力。}