电压说课稿 各位老师，同学们，大家好！我是1号选手！ 我说课的内容是人教版八年级物理下册 第六章第一节 电压 …..我的说课包括以下环节：教材分析，教学目标， 教法学法，教学准备，教学过程，板书设计 首先是教材分析： 我着重从以下几个方面进行阐述 （…水 电站 设 计 第 ２ 卷 第 ２ ８ 期 Ｄ　Ｈ　Ｐ Ｓ ２０１ ２年 ６月 关 于 国 内水 电 工 程 施 工 中 柴 油价 格 变 化 引起 的 索赔 问题 探讨 史 自 立 （ 黄河勘测规划设计有 限公 司 ， 南 郑州 河 ４ ００ ）…第六章 1 体育学习的特征是什么 （一）在体育学习中，学生以学习和掌握间接经验为主（二）学生的体育学习是在教师指导下进行的（三）体育学习主要是在从事身体练习的过程中进行 （四）在体育学习过程中学生要承受一定的运动负荷（五）体育学习对学生良好的情感和品…
肉制品保鲜护色和质构改善的天然解决方案2015新产品新技术发布会 闻达配料概 述? 闻达配料简介 ? 肉制品天然保鲜及护色? 肉制品质构改善的天然解决方案闻达配料简介o 1995年成立，功能性配料，香辛料和调味料生产商o生产基地在苏州昆山，获得GFSI-BRC的A级证书 山有肉制品风味物质研发团队和研发厨房o 在大连，美国和墨西哥有肉制品研发团队和实验厂；昆o o全球9个分公司，300多名员工。 与西班牙Prosur (普罗素）公司战略联盟，合作开发天然 功能性配料和肉制品应用研究；在Mucia, Spain有研发中 心和生产厂肉制品天然保鲜及护色前言? 肉制品市场发展趋势“清洁标签”和纯天然食品需求迅速增长；“无添加”、“低钠”、“无化学防腐剂”产品备受欢迎。－ 其中，去除和减少化学防腐剂，化学抗氧化剂的趋势最为突出肉制品天然保鲜及护色前言 ? 天然保鲜技术o ? 包装技术－ 真空和气调 气调包装(MAP)：生鲜和熟肉制品高氧包装：例如 80%O2+20%CO2，适合对保质期要求不太高但对新鲜度有 较高要求的鲜肉制品，如生鲜猪肉，牛肉低氧包装：例如 75% N2+ 25% CO2，多用于熟肉制品；生鲜禽肉。?含亚硝盐包装膜真空状态下，膜中亚硝盐对肉表面进行发色处理，但是亚硝的使用造成推广较慢肉制品天然保鲜及护色前言? 天然保鲜技术o 杀菌工艺－ 降低初始菌落总数 ? 热处理的方法(Post Packaging Pasteurization, PPP)易破坏产品风味和结构，造成营养的流失以及货架期内的出水，欧美 市场已经很少采用。? 高压处理(High Pressure Processing, HPP)可以保留肉制品的风味、质构和营养，解决热处理在货架期的出水问 题。但设备昂贵，运行费用高。代工的高压灭菌费用超过3元/公斤。 仍需要货架期保护前言肉制品天然保鲜及护色? 天然保鲜技术o ? ? 天然配料 迷迭香提取物(Rosemary Extract) – 抗氧化，但抑菌差，有风味影响，添加量受限－ 生鲜调理的护色和风味保护发酵的葡萄糖或糖(Cultured Dextrose or Sugar)-有机酸抑菌， 但有酸味影响产品风味－ 熟肉??醋粉(Dried Vinegar) – 抑菌，需要和其他物质配合使用－ 熟肉水果和香辛料提取物(Fruit and Spice Extractives) – 抗氧化和抑 菌，多种物质复合使用增强效果（即普罗素产品）－生鲜调理和熟肉制品肉制品天然保鲜及护色前言? 普罗素（PROSUR）产品特点? 水果和香辛料的提取物，富含多酚和黄酮类物质 ? 能够替代防腐剂、抗氧化剂和亚硝酸盐； ? 数据显示，与化学防腐剂（山梨酸钾、双乙酸钠、乳酸链球菌素） 相比，有更好的抑制致病菌和腐败菌效果；? 抗氧化和护色。肉制品天然保鲜及护色前言 ? 普罗素PROSUR产品特点? 由于是天然植物的提取物，不属于防腐剂和抗氧化剂标签， 只需标注“天然食用香料”，符合“清洁标签”的趋势;? 减少生产时间，节省制造成本，设备和空间;? 无风味影响，不影响产品原有风味品质。肉制品天然保鲜及护色普罗素天然香料的抗氧化机理PROSUR产品主要来源于地中海天然香料提取物，活性成分为 多种多酚、黄酮类物质混合物，因此，具有良好的抗氧化作用。 抗氧化作用表现为： ? 捕捉氧化自由基? 自动氧化再生能力? 螯合金属离子，减缓氧化反应肉制品天然保鲜及护色普罗素天然香料的护色机理新屠宰肉 肌红蛋白 Mb(Fe2+)氧和 还原鲜红色 氧和肌红蛋白 MbO2(Fe2+)氧化还原褐色 高铁肌红蛋白 MetMb(Fe3+)氧化强大的抗氧化能力，降低氧化还原电位，达到维持肌红蛋白/氧 合肌红蛋白含量比例在最佳水平，避免和延缓二者形成高铁肌红 蛋白。通过这种方式使肉本身的鲜红或者绛红色颜色得以保持。肉制品天然保鲜及护色普罗素产品在生鲜冷冻肉制品中的应用-调理肉馅产品? 实验目的 对比普罗素产品T-2N Ｗ与迷迭香提取物在牛肉粒中的抗氧化护色效果 ? 实验内容 对照组：无添加 实验组一：添加0.2%迷迭香提取物实验组二：添加0.2%T-2N W将三组实验产品保鲜膜覆盖同时置于10℃条件下贮藏，放置三天后观察结果肉制品天然保鲜及护色PROSUR产品在生鲜冷冻肉制品中的应用-调理肉馅产品? 实验结果 出现明显 腐败气味出现轻微 腐败气味无明显腐 败气味肉制品天然保鲜及护色普罗素天然香料在生鲜肉制品中的应用-调理肉馅产品? 实验目的 验证天然香料 T-2NW 在鲜牛肉馅中的抑菌效果 ? 实验内容 将牛肉通过8mm绞成肉粒，添加 T-2NW 混合均匀，再通过4mm孔板。将肉 粒进行气调包装（MAP, 70% O2, 30% N2）和抽真空包装。此外采用同样的 方法制作一组未添加抑菌剂处理的对照组。 将肉粒在4℃下冷藏放置10天。放置1天、6天和10天时检测菌落总数。肉制品天然保鲜及护色普罗素天然香料在生鲜肉制品中的应用-调理肉馅产品? 实验结果 气调包装下菌落总数（cfu/g）放置天数 添加T-2N W 未添加 第1天（D01） 7 900 16 000 第6天（D06） 9 400 300 000 第10天（D10） 170 000 13 000 000气调包装下牛肉馅菌落总数（log cfu/g）的变化肉制品天然保鲜及护色普罗素天然香料在生鲜肉制品中的应用-调理肉馅产品? 实验结果 真空包装下菌落总数（cfu/g）放置天数 添加T-2N W 未添加 第1天（D01） 13 000 31 000 第6天（D06） 44 000 8 300 000 第10天（D10） 140 000 28 000 000从以上数据可以看出，添加T-2N W 的牛肉馅在两种包装方式下都有显著 的抑菌作用，可以延长产品的货架期。真空包装下牛肉馅菌落总数（log cfu/g）的变化肉制品天然保鲜及护色普罗素天然香料的抑菌机理多酚和黄酮类物质对微生物细胞具有降解细胞壁、破坏细 胞质膜、破坏膜蛋白，从而导致胞内成分渗出，胞质凝结， 分子主动运输力损耗，引起微生物死亡。 通过对两种或两种以上的多酚和黄酮类物质的筛选，充分 产生协同作用，从而提高整体抑菌效果。肉制品天然保鲜及护色普罗素天然香料的抑菌应用实验? 抑菌效果第三方权威验证（致病菌抑制作用） ? 西式熟肉制品中的应用? 中式酱卤制品中的应用肉制品天然保鲜及护色PROSUR产品的抑菌作用第三方权威验证（针对致病菌）? 实验目的 对比普罗素天然香料和传统抑菌剂对单增李斯特菌和肉毒杆菌的抑制作用 单增李斯特菌－－自然界广泛存在，易二次污染，4度以下仍可生长－加热可杀灭 －气调包装的挑战 肉毒杆菌－ －真空，常温，无竞争性菌群时生长 －芽孢需高温才可杀灭－工艺可靠 －有效的抑菌保鲜剂可控制生长美国威斯康辛州立大学-食品研究所Dr. Kathleen Glass肉制品天然保鲜及护色PROSUR产品的抑菌作用第三方权威验证（针对单增李斯特菌和肉毒杆菌）? 实验地点： 美国威斯康辛州立大学-肉制品研究所 Dr. Kathleen Glass? 实验内容 实验组一：无抑菌剂（对照组） 实验组二：0.4% T-4 N(天然植物提取物，普罗素公司提供) 实验组三：1%Natpre T-10 Plus (天然植物提取物，普罗素公司提供) 实验组四：156 ppm 亚硝酸钠 + 550 ppm 异抗坏血酸钠 实验组五：3.5% 乳酸钾-双乙酸钠混合物 (56% 乳酸钾和4% 双乙酸钠组成，PD4) 实验组六：亚硝酸钠、异抗坏血酸钠、乳酸钾/双乙酸钠混合物（添加量同上） 实验组七：1%缓冲醋液(Mostatin(TM) V liquid) 实验组八：1% Natpre T-10 Plus和1% 缓冲醋液肉制品天然保鲜及护色PROSUR产品的抑菌作用第三方权威验证（针对致病菌）? 实验内容选择适宜培养基，每组分别接种2-3 log CFU/mL的单增李斯特菌和肉毒杆菌。采用光密度（A600nm）方法测量菌数变化，前四周每周三次，然后每周一次至 第八周。当个别组达到最大吸光度时即不再继续。肉制品天然保鲜及护色PROSUR产品的抑菌作用第三方权威验证（针对致病菌）? 实验结果TSB培养基接种单增李斯特菌在7°C下放置8周不同处理组的光密度变化肉制品天然保鲜及护色PROSUR产品的抑菌作用第三方权威验证（针对致病菌）? 实验结果TPGY培养基接种肉毒杆菌在10°C下放置8周不同处理组的光密度变化肉制品天然保鲜及护色PROSUR产品的抑菌作用第三方权威验证（针对致病菌）? 实验目的 对比普罗素天然香料和化学防腐剂对食品中接种的单增李斯特菌生长抑制作用 ? 实验内容火鸡肉中接种单增李斯特菌 实验一：2%PD4-乳酸钾和双乙酸钠 实验二：1%DV 实验三：0.5%DV+0.6%T-4NW DV 实验四：0.75%DV+0.6%T-4NW DV 实验五：1%DV+0.6%T-4NW DV 实验六：0.75%DV+0.6%T-4NW DV+0.75%PRS-PHR 火腿中接种单增李斯特菌 实验七：156ppm 亚硝酸钠 + 547ppm 异抗坏血酸钠 实验八：156ppm 亚硝酸钠 + 547ppm异抗坏血酸钠+2% PD4 实验九：0.50% DV + 1.0% T-10Plus-DV 实验十：0.75% DV + 1.0% T-10Plus-DV 实验十一：1.00% DV + 1.0% T-10Plus-DV 实验十二：0.75% DV + 1.0% T-10Plus-DV + 0.75% PHR-PHR 美国威斯康辛州立大学-肉制品研究所 Kathleen Glass（2015年3月完成）肉制品天然保鲜及护色PROSUR产品的抑菌作用第三方权威验证（针对致病菌）? 实验结果火鸡肉中接种单增李斯特菌生长情况87 6 Control - 2.0% PD4 0.5% DV + 0.6% T4NW-DV 1.0% DV + 0.6% T4NW-DV 1.0% DV 0.75% DV + 0.6% T4NW-DV 0.75% DV + 0.6% T4NW-DV + 0.75% PHR菌落数 Log CFU/ml5 4 3 2 1 0 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 7℃下贮藏天数（周）肉制品天然保鲜及护色PROSUR产品的抑菌作用第三方权威验证（针对致病菌）? 实验结果火腿中接种单增李斯特菌生长情况156ppm NaNO2 + 547ppm sodium erythorbate 156ppm NaNO2 + 547ppm sodium erythorbate + 2.0% PD4 0.5% DV + 1.0% T10Plus-DV 0.75% DV + 1.0% T10Plus-DV 7 6 5 菌落数 Log CFU/ml 4 3 2 1 0 0 1 2 3 4 5 6 7 7℃下贮藏天数（周） 8 9 10 11 12 1.0% DV + 1.0% T10Plus-DV 0.75% DV + 1.0% T10Plus-DV + 0.75% PHR肉制品天然保鲜及护色PROSUR产品的抑菌作用第三方权威验证（针对致病菌）? 实验结果火腿参数检测水分含量 （%） 实验七 实验八 实验九 实验十 实验十一 实验十二 75.55 73.65 74.00 73.60 72.94 73.74 水分活度 Aw 0.980 0.975 0.976 0.974 0.971 0.971 亚硝残留量 （ppm） 85.7 ppm 93.5 ppm <1 ppm <1 ppm <1 ppm <1 ppm156ppm NaNO2 + 547ppm sodium erythorbate 156ppm NaNO2 + 547ppm sodium erythorbate + 2.0% PD4 0.5% DV + 1.0% T10Plus-DV 0.75% DV + 1.0% T10Plus-DV 1.0% DV + 1.0% T10Plus-DV 0.75% DV + 1.0% T10Plus-DV + 0.75% PHR*每组选三个平行样检测，结果取平均值肉制品纯天然解决方案应用举例－ 西式 －130%纯天然火腿-无防腐剂、抗氧化剂、发色剂和保水剂? 配方 原料 猪肉 冰水 T-10， DV 和PHR, Kg 100.00 24.15 3.25 ? 制作工艺 1. 对整块原料肉进行深度嫩化(90 Kg)； 2. 通过3mm孔板绞馅(10 Kg)； 3. 将普罗素产品、盐和糖溶于冰水中； 4. 将配制的盐水、原料肉放入滚揉罐内， 抽真空滚揉1h 4.1. 工艺一 ：直接灌入肠衣，熟化至中心 温度达到68? C 。冷却一夜后，切片。 4.2. 工艺二 ：静置一夜，再滚揉10min后 灌入肠衣，熟化至中心温度达到68? C。 冷却一夜后，切片盐糖 总计1.950.65 130.00配料表: 猪肉，水，食用盐，天然食用香料,天然醋粉， 葡萄糖（白砂糖）肉制品纯天然解决方案应用举例－130%纯天然火腿-无防腐剂、抗氧化剂、发色剂和保水剂? 实验结果 预期出品率(%) 工艺一 工艺二 130 130 实际出品率(%) 129.78 129.76? 缩短生产工艺，节省生产成本? 高品质、纯天然? “清洁标签”－替代化学添加 剂 ? 低亚硝残留工艺一工艺二肉制品天然保鲜及护色PROSUR产品在中式熟肉制品中的应用-散装鸭脖? 实验目的 PROSUR产品T-4N DV在散装鸭脖中的应用（抑菌） ? 实验内容 制作工艺 鸭脖→缓化→清洗→腌制→清洗、淋干→卤制→装盘→冷却至室温→放入15℃ 恒温箱中→定期检测微生物 实验组一：未添加防腐剂的对照组 实验组二：添加0.3% T-4N DV（添加量按卤汤和原料总重计）实验组三：添加0.4% T-4N DV（添加量按卤汤和原料总重计）肉制品天然保鲜及护色PROSUR产品在中式熟肉制品中的应用-散装鸭脖? 实验结果6 5 菌落总数 [logcfu/g] 4 3 2 1国标 限量test1test2 test30初 始 第一天 第二天 15℃恒温放置天数 第三天 第四天肉制品天然保鲜及护色PROSUR产品在中式熟肉制品中的应用-真空包装低温杀菌酱卤猪蹄? 实验目的 PROSUR产品T-4N DV在酱卤猪蹄中的抑菌作用 ? 实验内容 制作工艺 原料→香辛料水腌制24h→卤制（添加化学防腐剂/T4N DV，沸水煮50min） →真空包装→二次杀菌（沸水浴35min）→37℃恒温贮藏 实验组一：0.0075%山梨酸钾和1%乳酸钠 实验组二： 0.3% T4N DV （添加量按卤汤和原料总重计）肉制品天然保鲜及护色PROSUR产品在中式熟肉制品中的应用-真空包装低温杀菌酱卤猪蹄? 实验结果添加T4N DV的猪蹄菌 落总数明显低于添加 化学防腐剂的猪蹄菌落总数 (log cfu/g) 7.00 6.00 5.00国标 限量添加化学防腐剂 添加T-4N DV4.003.00 2.00 1.00 0.00 0天 7th 14th 37℃贮藏天数 21th 49th肉制品质构改善的天然解决方案1. 作用于蛋白的配料－ 盐，磷酸盐, PHR, TG… 充分发挥肉蛋白本身的保水能力2. 肉制品中的填料和粘合剂－ 淀粉，植物蛋白，动物蛋白，各种胶体保水的同时带来质构的影响存在问题：“胶条”，“面糊”，“分层”肉制品质构改善的天然解决方案天然提取物PRS-PHR? 酵母提取物和柑橘提取物。螯合钙、镁离子，打破二硫键；保持蛋白 分子在放松状态，增大肌纤维的空间，使肌束膨胀。 ? 在保持肉质纤维结构不变，提高肉制品的保水能力和口感 ? 可以直接添加，提高产品保水能力，增加终产品出品率； ? 可替代磷酸盐、植物蛋白、淀粉等；? 促进亚硝发色，节省生产时间；? 操作简单，适合于注射、滚揉或直接添加； ? 清洁标签–食品原料“酵母提取物”或“天然香料”。肉制品质构改善的天然解决方案天然提取物PRS-PHR的应用? 肉佳美MP-5在酱牛肉中的应用建议配方牛肉 闻达-肉佳美MP-5 盐 糖 味精 水 亚硝 最终出品率 100 1.5-2 2 1 0.5 20 适量 80%以上建议工艺： 滚揉4-6小时至分散均匀， 腌制过夜后直接卤制肉佳美MP-5主要成分 ：酵母提取物，磷酸盐、卡拉胶肉制品质构改善的天然解决方案胶原蛋白－WendaPro 95从猪皮中提取的功能性蛋白质，是不含过敏原的纯天然产品 由丹麦 Scanflavor 特别定制生产功能特点－? 冷凝胶，保水好， 注射率20-40% ? 良好的冻融稳定性, 99.5%? 有效减少熟化损失，保持产品嫩度和多汁感? 乳化能力强 ? 掩盖淀粉感，提高产品弹性和切片性肉制品质构改善的天然解决方案胶原蛋白在肉制品中的应用-调理肉制品? 实验目的调理肉制品中的应用 ? 实验内容 建议配方 （kg） 原料肉 闻达-肉佳美MP-7 冰水 总重 100 2 28 130 ? 肉佳美MP-17成分胶原蛋白、磷酸盐? 制作工艺A 大块肉注射率25-30%，适当滚揉至分散均 匀，静腌过夜后冷冻B 小块肉滚揉至分散均匀后直接冷冻烟熏肉制品质构改善的天然解决方案胶原蛋白在肉制品中的应用-调理肉制品? 实验结果 o o o 几乎无解冻出水 肉块表面无粘液，无明显注射痕迹 嫩滑效果明显，熟化损失更少解冻后的牛排注射后的里脊肉制品质构改善的天然解决方案胶原蛋白在肉制品中的应用-重组培根? 实验目的制作高出品率重组培根 ? 实验内容 配方（kg） 原料肉（7/3） 肉佳美RB-17 马铃薯淀粉 盐糖等 冰水 100 2.5 8.5 3.4 55 ? 肉佳美RB-17成分 胶原蛋白、磷酸盐、香料 ? 制作工艺 配料溶解于冰水后，与原料肉一起 滚揉2-4小时后静腌过夜，压模烟熏亚硝TG适量0.6肉制品质构改善的天然解决方案胶原蛋白在肉制品中的应用-重组培根? 实验结果 o o o 成型好，切片率高； 熟化损失少，热煎变形小； 口感佳，无粉感。
肉制品保鲜护色和质构改善的天然解决方案 2015新产品新技术发布会 闻达配料 概 述 ? 闻达配料简介 ? 肉制品天然保鲜及护色 ? 肉制品质构改善的天然解决方案 闻达配料简介 o 1995年成立，功能性配料，香辛料和调味料生产商 o 生产基地在苏州…浙江工业大学硕士学位论文 Ｍ．Ｓ．Ｔｈｅｓｉｓ Ｒｅｇｉｏｓｅｌｅｃｔｉｖｅｃｏｕｐｌｉｎｇｒｅａｃｔｉｏｎｏｆ ｄｉｈａｌｏｐｙｒｉｄｉｎｅｓａｎｄｒｅｇｉｏｓｅｌｅｃｔｉｖｅｃｏｕｐｌｉｎｇ ●＾●－ｌ ｒｅａｃｔｉｏｎｏｔｐｅｒｔｕｏｒｏｂｅｎ…国土资源部关于为扩大内需促进经济平稳较快发展做好服务和监管工作的通知 国土资发〔号 各省、自治区、直辖市国土资源厅（国土环境资源厅、国土资源局、国土资源和房屋管理局、房屋土地资源管理局、规划和国土资源局），计划单列市国土资源行政主管部…数字图像处理的发展概况 数字图像处理就是用计算机对图像进行分析和处理，它是一门跨学科的技术。数字图像处理始于20世纪50年代。特别是在1964年，美国喷射推进实验室使用计算机对太空船送回地面的大批月球照片进行处理后，得到了清晰逼真的图像，使这门技术受…
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国家质检总局抽查熟肉制品 两成不合格防腐剂超标
<font style="font-size:9color:#06-12-18 06:32:25　南方日报网络版
　　昨天（17日），国家质检总局公布了对熟肉制品的质量监督抽查结果，抽样合格率为80%，主要存在的质量问题是超范围和超量使用食品添加剂、微生物指标超标以及标识标注不规范。
　　国家质检总局的抽查发现，个别熟肉制品添加了禁用的苯甲酸，有部分熟肉制品山梨酸超标。据了解，苯甲酸和山梨酸是两种比较常见的食品防腐剂，长期过量食用将危害人体肝脏、肾脏功能。此外，抽查中还发现有个别产品菌落总数和大肠菌群超标，其中最严重的超标10倍多。
　　据了解，此次共抽查了包括广东在内的17个省市103家企业生产的125种产品。武汉新农牛肉卤制品有限公司生产的“新农”牌牛筋、石家庄市宝地食品有限公司生产的“兰欧”牌宝地烤肠等因存在种种的质量问题，被点名为“质量较差的产品”。　（编辑：栾春晖）
作者：记者/陈清浩通讯员/孔祥佩邱晓莹
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如果您在本页面发现错误，请先用鼠标选择出错的内容片断，然后同时按下“CTRL”与“ENTER”键，以便将错误及时通知我们，谢谢您对我们网站的大力支持。[几种防腐剂在化妆品中的作用效果评价]&摘要:目的了解化妆品常用防腐剂在化妆品基质中的防腐效果。方法采用纯培养的微生物挑战性实验验证0.05%,0.1%,0.2%,0.4%的对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯,0.1%,0.2%,0.3%,0.4%的咪唑烷脲,0.01%,0.02&[&防腐剂&微生物&羟基]
摘要:目的了解化妆品常用防腐剂在化妆品基质中的防腐效果。方法采用纯培养的微生物挑战性实验验证0.05%,0.1%,0.2%,0.4%的对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯,0.1%,0.2%,0.3%,0.4%的咪唑烷脲,0.01%,0.02%,0.05%,0.1%的凯松,0.01%,0.02%,0.03%,0.05%布罗波尔对金黄色葡萄球菌(ATCC6538)、大肠杆菌(Escherichia coli)(ATCC8739)、黑曲霉(ATCC16404)、白色假丝酶母(ATCC10231)的抑菌效果。结果在化妆品基质中,对羟基苯甲酸酯类防腐剂抑制细菌的能力较弱,对真菌的作用效果较好;咪唑烷基脲对真菌类的抑菌能力较差;布罗波尔的抑菌效果较好,凯松在允许使用的剂量范围内不能达到抑制微生物的作用。同时化妆品成分对防腐剂的作用效果有影响。结论仅0.4%对羟基苯甲酸丙酯、0.15%和0.1%凯松、0.05%布罗波尔通过了纯培养挑战性实验。筛选、复配防腐剂要根据化妆品的配方结合实际情况进行。关键词:化妆品;防腐剂;微生物挑战性实验;纯培养
化妆品中一般都含有丰富的营养物质,容易造成微生物的污染,添加防腐剂是预防化妆品微生物污染的主要手段。但是防腐剂在预防微生物污染的同时,还是化妆品中的危险因素———引起化妆品性皮炎的因素之一。而且化妆品的成分复杂,主要有油性原料、粉质原料和水溶性聚合物等,其中干扰防腐剂作用效果的因素比较广泛,因此防腐剂的选择是化妆品研制的一个重要环节,既要达到防腐的效果又要尽可能地减少防腐剂的用量。目前对防腐剂的评价多是通过高效法、法等方法测定其在产品中的含量来进行。这类方法测定的结果只能定量而不能直接反映出该类产品中防腐剂的实际防腐效果。微生物挑战性实验是目前比较公认的评价防腐剂防腐效果的生物学方法,通过该方法可以选择既能有效抑菌又可以使产品安全的化妆品中防腐剂的最低浓度。但以往很多评价都是采用混合培养的方式进行的,没有排除微生物之间的相互影响因素,缺少防腐剂在化妆品中对具体微生物防腐效果的数据。化妆品常用防腐剂一般包括酚类、酯类、卤化物及季铵盐等。我国一些地区的调查及美国FDA关于化妆品防腐剂的使用情况公布显示对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、凯松使用频率排名在前三位,其次咪唑烷基脲和布罗尔的使用频率也比较高。笔者采用上述防腐剂,用纯培养的方式,探索在化妆品基质中不同防腐剂对不同菌株的作用效果,为防腐剂的选择提供依据。1材料与方法1.1材料<st1:chsdate w:st="on" IsROCDate="False" IsLunarDate="False" Day="30" Month="12" Year=".1化妆品样品实验用化妆品为本实验室自制的样品,生产过程经过严格的无菌控制,防腐剂成分及含量明确。1.1.2防腐剂对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、咪唑烷基脲、布罗波尔、凯松。1.1.3实验用菌株金黄色葡萄球菌(ATCC6538)、大肠杆菌(Escherichia coli)(ATCC8739)、铜绿色假单胞菌(ATCC9027)、黑曲霉(ATCC16404)、白色假丝酵母(ATCC10231)均购自美国标准菌库。1.1.4实验用培养基水解大豆培养基(TSA),糊精培养基(SDA),卵磷脂,吐温-80琼脂培养基,沙氏琼脂培养基。1.1.5实验用菌悬液将以上各细菌接种在TSA培养斜面上,37℃培养24h;真菌接种在SDA培养斜面上,28℃培养5d。分别用0.85%的无菌盐水和含0.05%吐温80的无菌盐水将菌苔洗下,充分混合制成菌悬液(细菌:108cfu/ml,真菌:106cfu/ml)备用。1.2方法1.2.1方法本次实验参考化妆品、盥洗用品与香料协会(CTFA)及欧洲药典的微生物挑战性实验方法,即将一定量的微生物悬浊液加入到化妆品中,每隔一定时间用平板计数法检测微生物的存活情况,以此判断防腐剂的防腐效果。1.2.2培养方式纯培养。分别称量20g已制备好的化妆品样品于无菌瓶中,每瓶中分别加入每种菌悬液0.2ml,充分震荡混匀后,于室温存放。于第0、1、7、14、21、28d用平板计数法检测微生物的生长情况。1.2.3评价标准参考2005版《欧洲药典》:细菌于第7天时菌落总数下降3log,至第28天时无增长;真菌于第14天下降2log,至第28天时无增长,判断为防腐剂防腐效果良好。2结果与讨论2.1防腐剂的作用效果。对羟基苯甲酸酯类防腐剂是化妆品中使用最广泛的防腐剂,是全世界各个国家都认可、传统使用的化妆品防腐剂,数10年来该类防腐剂一直占踞使用频率排位的前列。实验结果显示对羟基苯甲酸酯类防腐剂对金黄色葡萄球菌的抑菌效果比较差,单独使用不能达到预防微生物污染的效果(表1)。对黑曲霉的作用效果较好,在推荐的使用范围内都能起到抑制作用。对羟基苯甲酸丙酯对白色假丝酵母的作用效果优于对羟基苯甲酸甲酯。此外有文献报道对羟基苯甲酸酯类防腐剂对革兰阴性菌的抑菌效果差,本次实验在受试样品中加入108cfu/ml的铜绿色假单胞菌,在7天后均无菌检出。同时对大肠杆菌(Escherichia coli)的防腐效果也很好,有悖于报道。对比两次研究不同之处在于培养方式(以往报道采用的是混合培养,本次采用的是纯培养)和化妆品的配方,因此可见化妆品的配方对微生物的影响很大,在化妆品的研制过程中要根据其配方成分选择合适的防腐剂。咪唑烷基脲是甲醛供体类防腐剂中使用最广泛的一个品种,其性能较好,具有很好的活性,从实验结果看其对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌(Escherichia coli)等细菌的作用效果较好,但是对黑曲霉和白色假丝酵母的抑菌能力相对较低。布罗波尔是一种卤代化合物型抑菌剂,能溶解于水和醇中,对细菌、霉菌、酵母菌都有一定的抑杀作用。实验中能抑制绝大多数细菌的生长,但是对黑曲霉和白色假丝酵母的抑制能力较弱。凯松是5-氯-2-甲基-异噻唑啉和2甲基-4-异噻唑啉3酮的混合物,抑菌效果虽然较好,但是其毒性大,存在安全性问题《,化妆品卫生规范》中规定的限用量为0.0015%,在此剂量内不能达到抑菌的效果。2.2白色假丝酵母的防腐问题白色假丝酵母是多数防腐效能实验推荐的酵母菌代表。它是一种致病菌,通常以它代表酵母菌对防腐系统的抵抗性。白色假丝酵母的污染即使不对人体造成威胁,也会削弱防腐剂的作用而给其他致病菌以可乘之机。因此化妆品中应重视白色假丝酵母的防腐问题。实验结果显示以上常用的防腐剂中只有凯松对白色假丝酵母的作用效果明显,但是用量也超出了《化妆品卫生规范》规定的最高限用剂量,说明白色假丝酵母的防腐问题应引起重视。2.3化妆品微生物挑战性实验的总结果从挑战性实验的总结果显示,仅0.4%对羟基苯甲酸丙酯、0.05%和0.1%凯松、0.05%布罗波尔通过了纯培养挑战性实验,可以看出,虽然每种防腐剂对微生物都有一定的抑杀作用,但是不同防腐剂作用的优势不同,单一防腐剂也很难达到保护化妆品的作用。3小结每一种防腐剂都不能对所有的微生物产生良好的抑菌效果,在对化妆品中防腐剂进行定量检测时,发现防腐剂的含量远远低于其最低抑菌浓度,从侧面反映出化妆品防腐剂复配的必然问题。复配后的防腐剂能否起到防腐作用,怎样控制复配后的剂量而不增加防腐剂对使用者的危害等问题都需要进一步研究。此外,防腐剂在化妆品介质中的抑菌浓度要不同于已知的该防腐剂的最小抑菌浓度,化妆品的成分可能增强或减弱防腐剂的作用效果。因此选择防腐剂时要参照防腐剂的最低抑菌浓度的同时还要考虑化妆品的配方因素,确定适宜的防腐剂配方,正确评价其性能后再投入使用。
作者：郑萍，陈西平
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