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请教：蛋白溶解度测定方法哪位大哥大姐能帮忙发下蛋白溶解度的详细测定方法及注意事项,特别是计算公式要详细. 另外请问下,菜粕棉粕与豆粕的蛋白溶解度的检测方法+计算公式相同吗?谢谢大家了,急!小弟感激不尽!
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7 、蛋白质溶解度(PS)的测定方法 1.0 试剂: 氢氧化钾(KOH)0.2%,相当于0.042mol/L,PH=12.5 其他试剂为凯式定氮所需的标准试剂. 称取2.8734gKOH,置于容量瓶中,溶解于水,稀释至1000ml. 2.0 测定步骤 2.1 称取1.5g大豆饼粕粉(过60目筛)于250ml烧杯中,加入75ml的0.2%KOH溶液（花生粕用0.03%KOH溶液）,在磁力搅拌器上搅拌20min. 2.2 在搅拌20min后,将30～50ml液体转移至离心管,用每分转速2700转,离心10min. 2.3 吸取15ml上清液,用凯氏定氮法测定其中蛋白质含量,其量相当于0.3g的原样本. 3.0 结果计算: 蛋白质溶解度%= ×100% 注意：样本粒度大小对蛋白质溶解度有影响,因此,当比较不同大豆饼、粕样本时,要请注意它们的颗粒大小应是可比较的.还应请注意控制在0.2%KOH溶液中的搅抖时间,在各种情况下,搅抖时间应一致. 豆粕PS＞85%为过生,PS＜70%时,则为过熟
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【求助】如何让可溶性蛋白的解聚
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这个帖子发布于6年零95天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
有没有人做过蛋白解聚的。现在洗出来的蛋白参考分子筛洗出时间，应该是一个大聚合体，要让他解聚该如何操作呢？如何解聚对活性影响比较小？
不知道邀请谁？试试他们
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您好，我现在也碰到了同样的问题，请问您是怎么解决的呢
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可以加入少量的非离子型去污试剂NDSB-201
195等，如果由于二硫键的问题，可以加入少量的GSH/GSSG
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高盐，精氨酸，甘油都可以，但是如果是分子量很大（大于2000kDa）的多聚体很可能是蛋白质折叠失败后疏水集团聚合形成的一种类似包涵体的东西，只能变性后复性
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高盐效果可能会好点，要看具体情况。
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谢谢大家的帮助了哈，我的蛋白应该是形成了八聚体，大肠杆菌表达，裂解buffer是50mM tris， 300mM NaCl， 5﹪甘油， 0.1﹪ triton，10mM 咪唑。我觉得基本上已经符合了高盐，非离子型去污剂，大家觉得呢
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应该不挂His柱子吧。
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300mM盐不算特别高，还有就是某些蛋白对离子的要求比较特殊，比如很多骨骼肌蛋白必须用KCl缓冲否则会聚合。常用的解聚手段都不行的话就只能用TMAO之类的猛药了。缓冲液不要太复杂，成分太多最后究竟是哪一个起作用都不明白了。
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谢谢laforet了，我尝试了下50mM tris， 500mM NaCl， 10﹪甘油， 0.5﹪ triton，10mM 咪唑。结果还是一样的，看来需要再摸索下条件了
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to 能挂his柱子的，关键是后面的标签切除出现问题，TEV 切除不了，怀疑剪切位点被包被在里面了
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植物组织内可溶性蛋白质的提取和含量测定
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植物体内可溶性蛋白质含量的测定
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