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【讨论】elisa标准曲线拟合方式的选择（双对数直线回归模式 vs 四参数逻辑曲线）
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这个帖子发布于7年零230天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
双对数直线回归模式是中检所制定的定量elisa试剂盒标准曲线的拟合方式，四参数逻辑曲线也是一种流行的拟合方式，如果是做竞争elisa用哪一个好呢？谁能提供一下双对数直线回归模式的公式。
还有一个问题是关于elisa的线性。我们知道，如果用标准物质做梯度稀释，竞争elisa（检测抗体）的曲线是成s形的，s形的上部和下部的线性是最难保证的，而中间斜率最大的部分是很容易拟合出好结果的。那么建立elisa方法的时候，是否可以通过加大样品的稀释度，让od值落到中间那部分线性好的地方，避开线性难以把握的上部和下部，从而提高elisa方法的线性呢？这样做和不做过多稀释，保留s形上下部的方法想比较，有没有什么缺陷呢？谢谢各位。
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怎么没人讨论啊
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ELISA标准曲线的绘制要点
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3秒自动关闭窗口&>&&>&&>&&>&绘制ELISA标准曲线
绘制ELISA标准曲线
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ELISA的标准曲线一般使用专门的曲线拟合工具，如：Curve Exert1.3下面以Curve Exert1.3为例说明怎么样制作：1 启动“Curve Expert1.3”2 X轴输入标准品的OD值，Y轴输入所对应的浓度值，如图： 2 X轴输入标准品的OD值，Y轴输入所对应的浓度值，如图：
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应用EXCEL绘制ELISA标准曲线及计算样品浓度&&&&&&& 在ELISA实验结束后，我们得到的是经酶标仪得出的标准品以及样本的OD值。其中，标准品的浓度已知，我们可以利用标准品的OD值及其相对应的浓度，以OD值为横坐标，浓度为纵坐标，做一条标准曲线，并用公式表示出来。这样，我们把样本的OD值以X值代入，便可求出Y值，即样本浓度。&&&&&&&&&&&&&&&&&& 下面我们就一步步来实现这个目标：&&&&&&&& 1、首先，将数据整理好输入Excel，分别为经酶标仪读出标准品的OD值及其对应的浓度值。&&&&&&&&&&&&2、拖动鼠标选取完成的数据区，并点击图表向导，在图表类型中选“XY散点图”，并选择子图表类型的“散点图”（第一个没有连线的），如下图所示。&&&&&&&&&& 3、点击“下一步”，出现如下图界面。如是输入是如本例横向列表的就不用更改，如果是纵向列表就改选“列”。&& 在做ELISA标准曲线，并通过此曲线求样本浓度时，因样本OD值是已知的，因此我们需要将OD值设为X。根据上图我们可以看到，横坐标X值为OD值，纵坐标Y为标准品浓度，这正是我们想要的。&&&&&&&&& 有时需要我们手动选择X值，这时可以点击“系列”来更改，如下图。&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& &&&&&&&&&& 如果要对横坐标和纵坐标进行调换，我们可以就点击X值和Y值文本框右边的小图标，结果如下图：&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&出现上图后，拖动鼠标选取正确的数据区域以调整X或Y。&&&&&&&&&& 5、调好之后，然后点击“下一步”出现图标选项界面，如下图。&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 6、点击“下一步”，在弹出的窗口再点击“完成”，现在一张带标准值的完整散点图就已经完成，如下图。&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 7、到了这一步，散点图便完成了。我们可能会问，曲线在哪里啊？其实很简单，先点击图上的标准值点（记住一定要点选上），然后单击右键，点击“添加趋势线”。弹出趋势线类型选择对话框，有线性，对数，多项等选项，如下图：&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 8、在选择之前，我们先对上图做一下肉眼观察，如果那些点能连成一条直线，或接近直线，我们就选择“线性”，意思就是出来的趋势线是一条直线，相应的该直线的方程就是y=ax+b的形式。不过一般的ELISA都不会是所有的标准点呈完全的线性关系的，也就是说不是一条完全的直线，这时我们可以选择“多项式”，多项式后面还有“阶数”的选择，也就是说求出来的方程是几次方，我们一般选“2阶”，即出来的方程为y=ax2+bx+c. 选择完毕后，弹出以下窗口。&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 9、趋势线也就是标准曲线在此便显示出来了。接下来我们需要将公式显示出来，以根据样本的OD值计算其浓度值。在鼠标点选该线（一定要选中，选中后出现下图的样子即线由很多店标识出来），单击鼠标右键，选择趋势线格式。我们在弹出的窗口中选择“选项”选项卡，出现下图，我们选择显示公式，显示R方，即相关系数，这时公式与R方值便都显示出来了。&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&我们将样本的OD值作为X代入上述方程，求出来的便为浓度值了。一般ELISA的标准曲线的相关系数要达到0.95以上，本例中为0.9999，非常不错的曲线，这样就保证了由该曲线及其方程求出的样本浓度具有很强的可信性。兔子脑钠素/脑钠尿肽(BNP)ELISA试剂盒 & & rabbit&brain&natriuretic&peptide,BNP&ELISA试剂盒 & &兔子内皮抑素(ES)ELISA试剂盒 & & rabbit&Endostatin,ES&ELISA试剂盒& & &兔子内皮素1(ET-1)ELISA试剂盒 & & rabbit&Endothelin&1,ET-1&ELISA试剂盒& & &兔子免疫球蛋白G(IgG)ELISA试剂盒& & & rabbit&Immunoglobulin&G,IgG&ELISA试剂盒 & &兔子免疫球蛋白E(IgE)ELISA试剂盒 & & rabbit&Immunoglobulin&E,IgE&ELISA试剂盒 & &兔子免疫球蛋白A(IgA)ELISA试剂盒& & & rabbit&Immunoglobulin&A,IgA&ELISA试剂盒& & &兔子可溶性血管细胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA试剂盒 & & Rabbit&soluble&Vascuolar&cell&adhesion&molecule&1,sVCAM-1&ELISA试剂盒 & &兔子可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)ELISA试剂盒 & & rabbit&Soluble&Intercellular&Adhesion&Molecule-1,sICAM-1&ELISA试剂盒& & &兔子可溶性E选择素(sE-selectin)ELISA试剂盒 & & rabbit&soluble&E-selectin,sE-selectin&ELISA试剂盒 & &兔子巨噬细胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA试剂盒 & & rabbit&macrophage&inflammatory&protein&5,MIP-5&ELISA试剂盒& & &兔子碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)ELISA试剂盒& & & rabbit&basic&fibroblast&growth&factor,bFGF&ELISA试剂盒& & &&兔子免疫球蛋白M(IgM)ELISA试剂盒& & & &rabbit&Immunoglobulin&M,IgM&ELISA试剂盒& & &兔子甲状腺素(T4)ELISA试剂盒 & & rabbit&thyroxine,T4&ELISA试剂盒& & &兔子基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA试剂盒 & & rabbit&tissue&inhibitors&of&metalloproteinase&1,TIMP-1&ELISA试剂盒 & &兔子基质金属蛋白酶9(MMP-9)ELISA试剂盒 & & rabbit&matrix&metalloproteinase&9,MMP-9&ELISA试剂盒& & &兔子基质金属蛋白酶4(MMP-4)ELISA试剂盒 & & rabbit&matrix&metalloproteinase&4,MMP-4&ELISA试剂盒 & &兔子基质金属蛋白酶5(MMP-5)ELISA试剂盒 & & rabbit&matrix&metalloproteinase&5,MMP-5&ELISA试剂盒 & &兔子睾酮(T)ELISA试剂盒 & & rabbit&Testoterone,T&ELISA试剂盒& & &兔子肝细胞生长因子(HGF)ELISA试剂盒 & & rabbit&hepatocyte&growth&factor,HGF&ELISA试剂盒& & &兔子γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒& & & rabbit&Interferon&γ&,IFN-γ&ELISA试剂盒& & &兔子端粒酶(TE)ELISA试剂盒 & & rabbit&telomerase,TE&ELISA试剂盒& & &兔子单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA试剂盒 & & protein&1/monocyte&chemotactic&and&activating&factor,MCP1/MCAF&ELISA试剂盒 & &兔子促肾上腺皮质激素(ACTH)ELISA试剂盒 & & rabbit&adrencocorticotropic&hormone,ACTH&ELISA试剂盒 & &兔子促卵泡素(FSH)ELISA试剂盒 & & rabbit&follicle-stimulating&hormone,FSH&ELISA试剂盒& & &兔子促甲状腺素(TSH)ELISA试剂盒 & & rabbit&Thyroid&Stimulating&Hormone,TSH&ELISA试剂盒& & &兔子雌二醇(E2)ELISA试剂盒 & & rabbit&Estradiol,E2&ELISA试剂盒 & &兔子肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)ELISA试剂盒 & & rabbit&intestinal&fatty&acid&binding&protein,iFABP&ELISA试剂盒& & &兔子表皮生长因子(EGF)ELISA试剂盒& & & Rabbit&Epidermal&growth&factor,EGF&ELISA试剂盒& & &兔子白血病抑制因子受体(LIFR)ELISA试剂盒 & & rabbit&leukemia&inhibitory&factor&receptor,LIFR&ELISA试剂盒& & &兔子白三烯B4(LTB4)ELISA试剂盒 & & rabbit&Leukotriene&B4,LT-B4&ELISA试剂盒& & &兔子白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA试剂盒 & & rabbit&Interleukin&8,IL-8&ELISA试剂盒 & &兔子白介素6(IL-6)ELISA试剂盒 & & rabbit&Interleukin&6,IL-6&ELISA试剂盒 & &兔子白介素4(IL-4)ELISA试剂盒 & & 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&兔子Ⅱ型胶原(Col&Ⅱ)ELISA试剂盒 & & rabbit&Collagen&Type&Ⅱ,Col&Ⅱ&ELISA试剂盒 & &兔子Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)ELISA试剂盒 & & rabbit&N-terminal&procollagen&Ⅲ&propeptide,PⅢNP&ELISA试剂盒 & &兔子Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢNT)ELISA试剂盒 & & rabbit&procollagen&Ⅲ&N-terminal&peptide,PⅢNT&ELISA试剂盒& & &兔子凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA试剂盒 & & Rabbit&coagulation&factor&Ⅱ,FⅡ&ELISA试剂盒& & &兔子C反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒 & & rabbit&C-Reactive&Protein,CRP&ELISA试剂盒 & &兔子内皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA试剂盒 & & Rabbit&Endothelial&nitric&oxide&synthase&3,eNOS-3&ELISA试剂盒& & &兔子胆固醇酯转移蛋白(CETP)ELISA试剂盒 & & Rabbit&cholest&erolester&transfer&protein,CETP&ELISA试剂盒& & &兔子可溶性粘附分子(Sam)ELISA试剂盒 & & Rabbit&soluble&adhesion&molecules,Sam&ELISA试剂盒& & &兔子抗中性粒细胞颗粒抗体(ANGA)ELISA试剂盒 & & Rabbit&anti-neutrophil&granules&antibody,ANGA&ELISA试剂盒& & &兔子孕激素/孕酮(PROG)ELISA试剂盒 & & Rabbit&Progesterone,PROG&ELISA试剂盒& & &兔子胶原酶II(Collagenase&II)ELISA试剂盒 & & Rabbit&Collagenase&Type&II&ELISA试剂盒 & &兔子胶原酶I(Collagenase&I)ELISA试剂盒& & & Rabbit&Collagenase&I&ELISA试剂盒 & &兔子肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体3(TRAIL-R3)ELISA试剂盒 & & 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