dna分子复制的条件性时,哪些键被恢复

变性DNA只要消除变性条件,二条互补链还可以重新结合,恢复原来的双螺旋结构,这一过程称为复性(renaturation)。通常DNA热变性后,将温度缓慢冷却,并维持在比Tm低25~30℃左右时,变性后的单链DNA即可恢复双螺旋结构,因此,这一过程又叫做退火。复性后的DNA,理化性质都能得到恢复。倘若DNA热变后快速冷却,则不能复性(图18-5)。图18-5 热变性过程和两种冷却过程示意图影响复性速度的因素很多,同样条件下,DNA顺序简单的分子复性很快,如polyd[T]和polyd[A]由于彼此互补识别很快,故能迅速复性。但顺序较复杂的DNA分子复性则较慢。因此通过变性速率的研究,可以了解DNA顺序的复杂性。DNA片段的大小也影响变性的速率,因为DNA片段愈大,扩散速度愈低,使DNA片段线状单链互相发现互补的机会减少。因此,在复性实验中,有时将DNA切成小片段,再进行复性。同样条件下,同一种DNA浓度愈高,复性速度也愈快。溶液的离子强度对复性速度也有影响,通常盐浓度较高时,复性速度较快。Doty研究小组是最早对DNA变性过程进行深入研究的。它们所获得的结果表明,在达到Tm值时,两条DNA单链分离开。如果在加热之后慢慢地冷却,则出现部分复性,即DNA的一部分回复到双螺旋结构。复性的程度取决于DNA浓度及信息含量的多少。病毒DNA(信息含量少)比哺乳动物DNA容易复性,而DNA浓度较高时,有利于复性,快速冷却使DNA仍然处于变性状态,这时自由单链成链线团结构。对这种情况,人们称之为螺旋-线团转化过程(helix-coil-transition)。快速冷却时消光系数固然有所下降,但比天然DNA的数值始终要大。细胞核DNA复性的动力学研究指出,DNA内很少片段有重复的或很相似的碱基顺序(所谓重复DNA)。DNA复性的程度和过程与其信息含量的多少等有关;因而病毒DNA比细菌DNA复性得快。Britten发现一种测定和观察复性过程的方法。X轴表示变性DNA原始浓度(Co)和保温时间的乘积,纵轴表示DNA复性部分(重新作为双螺旋结构出现)。DNA比例可以用羟基磷灰石柱的办法加以确定,因为这种柱能够使单链和双链DNA分离开来。DNA复性曲线呈S形,随着信息含量增加,此形状相同曲线往往较高Co.t值处移动。奇怪的是,从细胞核来的DNA在复性时显示出完全不同的情形:这些DNA中的一部分异常快地复性,而另一些DNA只有在极高的Co.t值时才出现预期的复性。对快速复性可以作这样的解释,即在某一DNA之内同时有几个相同或很类似的顺序存在,因而找重复顺序比找DNA内唯一顺序要快得多。后者含有特殊的遗传信息,常被称为独特DNA。与之相反是重复DNA片段。真核DNA自发复性的一种特殊途径是通过发夹结构。对单链而言,要生成这种发夹结构,要求一种特定的碱基顺序,这种顺序称作回文(正读反读都相同)结构。为了构成回文结构,DNA片段的碱基顺序必须在互补链内找到相反的顺序;在具有相反碱基顺序的两个DNA片段之间,显然常常出现短的中间片段由于存在这样的核苷酸顺序,在复性时就能形成发夹结构。如果存在很多重复回文结构,在部分复性时就能通过形成DNA侧链而出现十字结构。DNA回文结构使DNA片段出现回旋对称性。这种结构常常出现在DNA和蛋白质之间相互作用的地方,特别是后者起控制作用时。 奥鹏 17 春 16 秋西交《健康评估》在线作业 一、单选(共 50 道,共 100 分。 ) 1. 作尿常规检查、化学检验以清晨首次尿为好,新鲜尿液最好在多长时间内...  16秋西交《结构检验》在线作业答案_司法考试_资格考试/认证_教育专区。16秋西交《结构检验》在线作业答案满分试卷答案 16 秋西交《结构检验》在线作业标准答案一、...  2016春季西交《生物化学》在线作业_远程、网络教育_成人教育_教育专区。谋学网 ...RNpol 和 Npol 都只能在核苷酸链 3′端加入单核苷酸 正确答案: 16. 下列哪...  16秋西交《药剂学》在线作业答案_电大_成人教育_教育专区。西交《药剂学》在线作业 试卷总分:100? ? ? ?测试时间:--? ? ? ?试卷得分:100 一、单选题(共...  16秋西交《药剂学》在线作业_医学_高等教育_教育专区。奥鹏 17 春 16 秋西...16秋西交《化工工艺学》... 暂无评价 8页 免费 16秋西交《生物化学》在.....  16秋西交《药理学》在线作业答案_电大_成人教育_教育专区。西交《药理学》在线作业 试卷总分:100 测试时间:-试卷得分:100 一、单选题(共 50 道试题,共 100 ...  15春西交《生物化学》在线作业 答案_管理学_高等教育_教育专区。西交《生物化学》在线作业 一、单选题(共 30 道试题,共 60 分。 ) 1. 蛋白质分子中的主要...  16秋西交《电工电子技术》在线作业_远程、网络教育_成人教育_教育专区。谋学网
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>>>在基因工程中,若一个控制有利性状的DNA分子片断为,可利用PCR技..
在基因工程中,若一个控制有利性状的DNA分子片断为,可利用PCR技术使其数量增多,复制时应给予的条件是①ATGTG、TACAC模板链 ②A、U、G、C碱基 ③A、T、C、G碱基 ④脱氧核苷酸 ⑤脱氧核糖 ⑥DNA聚合酶 ⑦ATP ⑧DNA水解酶 ⑨引物
A.①③④⑦⑧⑨B.①③④⑤⑥⑦⑨C.①②⑤⑥⑦⑧D.①④⑥⑦⑨
题型:单选题难度:中档来源:期中题
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据魔方格专家权威分析,试题“在基因工程中,若一个控制有利性状的DNA分子片断为,可利用PCR技..”主要考查你对&&多聚酶链式反应扩增DNA片段&&等考点的理解。关于这些考点的“档案”如下:
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多聚酶链式反应扩增DNA片段
多聚酶链式反应扩增DNA片段:1、PCR原理:在解旋酶作用下,打开DNA双链,每条DNA单链作为母链,以4中游离脱氧核苷酸为原料,合成子链,在引物作用下,DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链,即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物,其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。2、PCR反应过程是:变性→复性→延伸
3、结果:上述三步反应完成后,一个DNA分子就变成了两个DNA分子,随着重复次数的增多,DNA分子就以2n的形式增加。PCR的反应过程都是在PCR扩增仪中完成的。细胞被DNA复制与PCR技术的比较:
知识点拨:1、DNA分子复制的人工控制解开螺旋:在80~100℃时,DNA双螺旋打开,形成两条DNA单链,称为变性。恢复螺旋:在50~60℃左右时,两条DNA单链重新形成双螺旋结构,称为复性。复制条件:缓冲液,DNA模板、四种脱氧核苷酸、热稳定DNA聚合酶、两种引物。控制仪器:PCR仪(温度周期性自动调节仪)。2、PCR的含义是多聚酶链式反应。3、PCR技术反应的条件:①稳定的缓冲溶液环境;②DNA模板;③合成引物;④四种脱氧核甘酸;⑤DNA聚合酶;⑥温控设备4、PCR技术最突出的优点是快速、高效、灵活、易于操作。5、TaqDNA聚合酶的特点是:耐高温。知识拓展:1、DNA含量的测定——分光光度法
2、DNA聚合酶不恩能够从头合成DNA,只能从DNA的3'端开始延伸DNA链,因此DNA复制需要引物。
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84363875088086083593729721045691,蛋白质变性时去除变性因素后可以复原的说法是错误的,请问复性和复原有什么区别呢?-_星空见康网
1,蛋白质变性时去除变性因素后可以复原的说法是错误的,请问复性和复原有什么区别呢?
1,蛋白质变性时去除变性因素后可以复原的说法是错误的,请问复性和复原有什么区别呢?
请问为什么错了,老师没有说过这个。另外,关于蛋白质分子三级结构叙述有误的是亲水基团多聚集在三级结构内部2,我选择是不一定具有生物学活性,请讲解一下
这种现象称为蛋白质变性、蛋白质分子三级结构中亲水基团多聚集在三级结构的表面,这种现象称为蛋白质的复性(renaturation),在适当条件下变性蛋白质可恢复其天然构象和生物活性,说明蛋白质分子内部结构的变化不大。  如果变性条件剧烈持久。   2、  蛋白质变性(protein denaturation)是指蛋白质在某些物理和化学因素作用下其特定的空间构象被改变,要变性条件剧烈不剧烈。如果变性条件不剧烈,复性就不一定啦,这种变性作用是可逆的,从而导致其理化性质的改变和生物活性的丧失,但许多有生物活性的蛋白质由两条或多条肽链构成,如果除去变性因素。这时,蛋白质的变性是不可逆的。  复原是指回到初始状态,因此只具有三级结构的多肽链并不一定具有生物学活性。  蛋白质的三级结构具有一条多肽链的蛋白质,必须具有三级结构才有生物学活性  1
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DNA变性与复性
DNA变性与复性
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DNA变性与复性
DNA的三维空间构象即超螺旋结构主要靠一些非共价键如氢键折叠形成,这些非共价键都是键能较低的键,很容易在外来作用的影响下断裂,使双螺旋解开,导致空间结构破坏,使规则的DNA变成不规则的线团,因而发生性质改变,称为DNA变性(denaturation)。变性的DNA为单链。加热接近100℃、改变pH(&10或&3)以及某些化学试剂(如乙酸、尿素和酰胺等)的作用,均可使DNA变性。
如果通过加热使变性,根据DNA变性的程度与温度的关系可绘制熔解曲线。使50%DNA分子发生变性的温度称为变性温度,由于这一现象和结晶的熔解相似,故变性温度又称熔解温度(melting temperature,Tm)。Tm值不是一个固定的数值,它与下列因素有关:
1.DNA的均一性
均一DNA如病毒DNA,解链发生在很窄的Tm值范围,而不均一DNA如动物细胞DNA,其Tm值的范围较宽。
2.DNA分子中(G+C)的含量
一定条件下,DNA的Tm值由(G+C)含量所决定,因G和C之间有三个氢键。所以(G十C)含量较高的DNA的Tm值较高。实验表明,DNA的Tm值的高低与其(G+C)的克分子含量呈直线关系。
3.溶剂的性质
Tm不仅与DNA本身性质有关,而且与溶液的条件,如离子强度、pH及变性剂的浓度等有关。在低离子强度时,Tm值较低,反之则较高,因此DNA制剂不应保存在离子强度过低的溶液中;pH值在5―9范围内,Tm值变化不明显,在高pH值下,碱基可失去形成氢键的能力,当pH值大于儿3时所有氢键均被破坏,DNA完全变性;变性剂可以于扰碱基堆砌力和氢键的形成,因此可降低Tm值,如50%的甲酰胺可使Tm值降低30℃。
变性的DNA只要消除变性条件,两条互补链还可以重新结合,恢复原来的双螺旋结构,这一过程称为复性(renaturation)。在DNA热变性后,将温度缓慢降低而使DNA逐渐冷却,并维持在低于Tm值的一定范围内,变性后的单链DNA即可恢复双螺旋结构,因此复性过程又叫作退火。复性后的DNA,其理化性质都能得到恢复。倘若DNA热变性后快速冷却,则不能复性。
DNA的复性速度受到多种因素的影响:
温度过高,有利于DNA变性而不利于复性;而温度过低,不利于双键间随机形成的错配氢键的断裂。易造成两条非互补单链间的非特异性结合。复性的适宜温度一般低于Tm值25℃左右。温度过高如接近变性温度,复性则难以进行;温度过低,产生非特异性复性。
2.DNA的浓度
DNA的浓度直接影响到DNA单链间碰撞的几率。DNA浓度越高,复性速度越快。
3.DNA片段的大小
大分子的DNA扩散速度较慢,发现互补的机会少,难以形成正确配对,因此复性较慢。
4.DNA分子的复杂性
DNA总量一定时,基因组越复杂,其中特定序列的拷贝数就越少,互补序列的浓度就越低,因此复性速度越慢,而序列简单的DNA分子复性较快。
5.离子强度
溶液的离子强度较高时,可有效中和DNA双链间的磷酸基团的静电斥力,因此复性速度较快。
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