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t淋巴细胞、细胞亚群做了个T-淋巴细胞rDNA转录活性分析,检测结果：I.S值5.3% 正常参考值为6%-10%.还有T细胞亚群检测结构为：T细胞总量和T4细胞数量减少,NK细胞数量正常,T4/T8（0.79）比值倒置.
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t淋巴细胞亚群应用cd4和cd8单克隆抗体可将外周淋巴器官或外周血中的t细胞分为cd4+cd8-和cd4-cd8+两个主要的亚群.每个亚群按照某些表面标志和功能又可分为不同的功能亚群.（一）cd4阳性细胞群 1.th1和th2亚群
应用th细胞克隆培养技术和细胞因子产生的不同,已发现小鼠cd4阳性细胞群是一个不均一的亚群,可分为th1和th2,主要区别见表7-6. th1细胞能合成il-2、ifn-γ、,lt、il-3、tnf-α和gm-csf,但不能合成il-4、iil-5、il-6、il-10和il-13；而th2能合成tnf-α、il-3、gm-csf、il-4、il-5、il-6、iil-10（细胞因子合成抑制因子,csif）和il-13,不能合成il-2、ifn-γ和lt.此外th1和th2都能分泌三巨噬细胞炎症蛋白和前脑啡肽原.th1和th2都能辅助b合成抗体,但辅助的强度和性质不同.体外实验表明,il-4明显促进b细胞合成和分泌ige,如使lps刺激小鼠b细胞合成ige能力增强10-100倍.少量ifn-γ能完全阴断il-4对ige合成的促进作用.th2分泌il-4对ige合成有正调节作用,而th1分泌ifn-γ则起负调节作用.此外,th2通过分泌il-4和il-5辅助iga合成,分泌il-10（csif）,抑制th1细胞合成细胞因子,而th1对igg1合成则有抑制作用,但辅助其它几种类型ig的合成.由于th1和th2合成淋巴因子的种类不同,因而介导不同的超敏反应.il-3和il-4均能促进肥大细胞增殖,且相互有协同作用,il-5除辅助b细胞合成iga外,还能刺激骨髓嗜酸性粒细胞的集落形成,因而th2与速发型超敏反应关系密切.th1通过产生ifn-γ阻断ige合成,对速发型超敏反应有抑制作用.th1与迟发型超敏反应有关,可能与il-2、ifn-γ等对巨噬细胞活化和促进ctl分化作用有关,此外lt也有直接杀伤靶细胞作用.两群th克隆均能诱导抗原提呈细胞（apc）表达mhcⅱ类抗原,th1通过ifn-γ诱导mφ表达ia抗原,而th2通过il-4对mφ和b细胞ia抗原表达起正调节作用.在人类th1和th2细胞亚群尚未得到最后证实.从目前发表资料来看,cd4+cd45ro+前体细胞向th2效应细胞分化,而ifn-γ则对前体细胞向th2分化过程起抑制作用,因此il-4和ifn-γ在决定cd4+cd45ro+前体细胞向th1或th2分化过程中起着重要的调节作用.人t细胞经多克隆活化后,在cd4阳性细胞中il-4mrna阳性比便不到5%,而60%的cd4+细胞有ifn-γ和il-2mrna的转录. 表7-6
小鼠th1和th2亚群的比较
th1 th2 合成淋巴因子种类 il-2 + - ifn-γ + - lt + - il-3 + + tnf-α + + gm-csf + + il-4 - + il-5 - + il-6 - + il-10 - + il-13 - + 辅助b细胞
+ ++ 辅助ige合成
- + 促进肥大细胞增殖
- + 介导超敏反应类型
迟发型 速发型 促进ia表达细胞
mφ b,mφ 介导迟发型超敏反应（delayed type hypersensitivity,dth）的t细胞亚群称为tdth,表面标志cd3+cd4+cd8-,可能相当于小鼠的th1亚群.当曾被变应原致敏的tdth再次与变应原相遇后,可释放出多种细胞因子,参与迟发型（ⅳ型）超敏反应的发生. 表7-7
tdth释放细胞因子参与迟发型超敏反应 作用对象 细
生物学活性 巨噬细胞 巨噬细胞趋化因子（mcf） 招引、聚集、活化巨噬细胞,
巨噬细胞移动抑制因子（mif） 增强巨噬细胞吞噬和杀伤功能
巨噬细胞活化因子（maf）
白细胞 白细胞移动抑制因子（lif） 招引、聚集白细胞 淋巴细胞 il-2 淋巴细胞局部浸润、增殖
ifn-γ 增强杀伤功能 皮肤血管 皮肤反应因子（srf） 增加血管通透性 靶细胞 淋巴毒素（lt） 杀伤靶细胞 mcf: macrophage chemotactic factor
mif: macrophage migration inhibition factor maf: macrophage activating factor lif: leukocyte migration inhibitory factor srf: skin reactive factor lt: lymphotoxin 2.抑制细胞诱导亚群和辅助细胞诱导亚群 应用cd45ra、cd45ro、cd29和cd31单克隆抗体可将cd4阳性细胞群分为抑制细胞诱导亚群和辅助细胞诱导亚群.两个亚群的表面标志和功能比较见表7-8.（1）cd31：最近发现cd31是一种新的、激活后表达水平不发生明显变化的抑制细胞诱导亚群的表面标记.cd31是一种血小板-内皮细胞胞粘附分子（pecam,gpⅱa）,分子量为140kda,其结构属于免疫球蛋白超家族成员.从外周血新鲜分离的cd4细胞中,cd31mcab主要与cd45ra亚群反应,对b细胞合成igg辅助作用不明显,对cona和自身mhc（自身mlr）反应较为敏感；而cd31-的cd4细胞群中,发现有大量辅助b细胞合成igg的活性和对某些抗原刺激的回忆反应.cd45ra+的cd4细胞大激活后,尽管细胞表面丢失cd45ra,但表面cd31的表达仍不发生明显变化；而cd45ro+cd45ra-的cd4细胞激活后不能获得cd31表达.由于cd31在cd4细胞激活后仍不变化,对于鉴别抑制细胞诱导亚群和辅助细胞诱导亚群是一种有用的标志.迄今为止,许多粘附分子如 cd11a/cd18(lfa-1),lfa-3,cd2和cd29（vlaβ链）主要表达在cd45ro+t细胞表面.而cd31则表达在cd45ra+cd4细胞表面.抗cd31mcab作用于naive t细胞能触发其vla-4介导的粘附作用.内皮细胞表面cd31及其配体与t细胞表面cd31及其配体相互作用很可能触发整合素介导的粘附作用.cd31如何参与cd45ra+cd4+t细胞功能以及诱导抑制性t细胞产生还有待进一步研究.（2）cd45：cd45为异构型分子.cd45细胞膜外部多肽链可由a、b和c三种外显子编码.人幼稚t细胞只表达被抗cd45ra识别的cd45a型；记忆t细胞不表达任何a、b、c外显子产物而被抗cd45ro识别.抗cd45ra和抗cd45ro识别的都是休止型细胞,抗cd45ro所识别的记忆t细胞往往也可低水平表达一系列活化表面标记,如cd25、mhcⅱ类抗原、cd54、cd26等,提示这类细胞可能新近被激活过,由此推论记忆t细胞可能是由于持久性抗原或交叉抗原的低剂量、持续刺激得以维持其长时间存活.体外实验观察到细胞活化后见有从cd45ra向cd45ro的单向性转变,这与幼稚t细胞向记忆t细胞分化相平行.表7-8
抑制细胞诱导亚群和辅助细胞诱导亚群的比较
抑制细胞诱导亚群 辅助细胞诱导亚群 表
cd29 低密度 高密度
cd45 cd45ra cd45ro
粘附分子（lfa、icam） + +++ 增殖功能
cd2mcab + +++
cd3mcab + +++
cona +++ +
抗原刺激再次反应 - +++
同种异体抗原 +++ +++
自身mlc +++ + 诱导和辅助功能
辅助b细胞产生抗体 ± +++
诱导ts +++ -
诱导细胞介导的淋巴细胞溶解作用（cml）
± +++ 细胞发育阶段
天然（naive） 记忆（memory） （3）自身混合淋巴细胞反应：外周血b细胞和单核细胞等非t细胞在体外培养时能诱导某些自身t细胞发生增殖反应,称为自身混合淋巴细胞的应（autologous
lymphocyte reaction
,amlr）.这一部分t细胞称为自身反应性t细胞.作为刺激细胞的b细胞和单核细胞主要是通过其细胞表面的mhcⅱ类抗原来刺激自身反应性t细胞,在体外培养时加入抗mhcⅱ类抗原的抗体可阻断amlr.关玩弄amlr的生理意义尚不清楚,可能是机体的一种免疫调节机制. （2）cd8阳性细胞群根据cd28阳性或阴性可将cd8+细胞分为细胞毒性t细胞（cd8+cd28+）和抑制性t细胞（cd28+cd28-）.cd28mcab能与60-80%t细胞发生反应,包括全部cd4细胞和部分cd8细胞. 1.tc(ctl)
在人类ctl表型为cd3+cd4-8+cd28+.小鼠ctl表型为thy-1+、lyt-1+、lyt-2+/lyt-3+.（1）ctl的分化：静止的ctl以前体细胞（precursor）(ctl-p)形式存在,外来抗原进入机体被抗原提呈细胞（apc）加工处理,形成外来抗原与apc自身mhc i类抗原的复合物,被相应ctl克隆细胞膜表面tcr/cd3所识别,抗原刺激信号和apc释放il-1共同存在的条件下,ctl-p被活化,并表达il-2r、il-4r、il-6r等多种细胞因子受体,在il-2、il-4、il-6、ifn-γ等细胞因子诱导下,迅速增殖,并分化为成熟的效应杀伤性t细胞（effector ctl）.ctl具有识别抗原的特异性,即能杀伤具有特定的外来抗原（如病毒感染靶细胞膜表面的病毒抗原）与自身mhc i类抗原结合的复合物的靶细胞.有关ctl杀伤靶细胞受到mhc i类抗原的限制,参见第五章“主要组织相容性复合体”第四节.从肿瘤组织周围分离获得的ctl称为肿瘤浸润淋巴细胞（tumor infiltrating lymphocyte , til）.til在体外加il-2培养后,具有很高的杀伤肿瘤作用,目前已用于临床的肿瘤治疗. （2）ctl的识别机制：多种粘附分子参与ctl对靶细胞的识别和粘附,主要有：①lfa-1/icam-1、icam-2、icam-3,可溶性icam-1（sicam-1）可抑制ctl杀伤肿瘤细胞；②cd2/lfa-3（cd58）,抗cd2 mcab或抗cd58 mcab均可抑制ctl效应细胞对靶细胞的杀伤；③cd8/mhc i类抗原的非多态性结构域. （3）ctl的杀伤机制：tcl杀伤靶细胞的机理目前认为主要通过释放多种的介质和因子介导的. ①穿孔素（perforin）:又称成孔蛋白（pore-foming protein,pfp）、c9相关蛋白（c9 related protein）或溶细胞素（cytolysin）,贮存于电子稠密胞浆颗粒（electron-densecytoplasmic granules）,成熟的穿孔素分子由534个氨基酸残基组成,分子量为56-75kda,ip为6.4,穿孔素分子中央部位170-390之间的氨基酸序列与c9 328-560氨酸酸序列约有20%同源性,这个区域与穿孔素和c9的多聚化和以管状形式插入到细胞膜有关.在杀伤相时,ctl细胞脱颗粒,穿孔素从颗粒中释放,在ca2+存在下,插入靶细胞膜上,并多聚化形成管状的多聚穿孔素（polyperforin）,约含12-16个穿孔素分子,分子量可达1000kda.多聚穿孔素在靶细胞膜上形成穿膜的管状结构,内径平均16nm.这种异常的通道使na+、水分进入靶细胞内,k+及大分子物质（如蛋白质）从靶细胞内流出,改变细胞渗透压,最终导致细胞溶解.此过程与补体介导的溶细胞过程类似,溶解细胞过程比较迅速.ctl本身可能释放a型硫酸软骨素蛋白聚糖（proteoglycans of chondroitinsulphate a type）、硫酸软骨素a限制因子（homologous restriction factor,hrf）,因此可避免穿孔素对ctl自身细胞的攻击. 图7-3
ctl释放穿孔素杀伤靶细胞机理示意图 ②丝氨酸酯酶（serine estersse）:活化ctl释放多种丝氨酸酯酶,如ctla-1（又称ccp1或granzyme b）、ctla-3（又称h因子或granzyme a）,其作用可能类似补体激活过程中的酯酶作用,通过活化穿孔素而促进杀伤作用. ③淋巴毒素（lymphotoxin,lt）:又称肿瘤坏死因子-β（tnf-β）,lt可直接杀伤靶细胞,但杀伤过程较慢,其杀伤机理参见第四章“细胞因子及其受体”第二节中肿瘤坏死因子. 2.ts和ts亚群 抑制性t细胞（suppressor t lymphocyte,ts）对免疫应答有重要的负调节功能,抑制性t细胞功能的异常,常与t自身免疫性疾病、第i型超敏反应等疾病发生有关. （1）抑制性t细胞的证实：绵羊红细胞（sheep red blood cell , srbc）对于小鼠是良好的免疫原,合适剂量的srbc可诱导小鼠产生高效价的抗srbc抗体.当过高剂量srbc免疫小鼠时,则抗体合成水平反而明显下降,称为高剂量免疫耐受.动物实验研究发现,将高剂量免疫耐受小鼠脾细胞转移到免疫原剂量刺激的小鼠体内时,则小鼠抗体应答水平明显下降.如高剂量免疫耐受小鼠脾细胞经抗thy-1和补体处理后再转移到免疫原剂量免疫的小鼠体内,则高剂量免疫耐受小鼠脾细胞的抑制作用消失.实验证明了在高剂量免疫耐受小鼠的脾细胞中存在有抑制作用的t细胞.
抑制性t细胞的证实 （1） 免疫原剂量---→抗体应答+++
srbs免疫小鼠 （2）高剂量srbc---------------------------------→抗体应答+
免疫耐受小鼠 （3）高剂量免疫-→转移未处理脾细胞-→免疫原剂量-→抗体应答+
免疫小鼠 （4）高剂量免疫-→转移抗thy-1+ ----→免疫原剂量-→抗体应答+++
补体处理脾细胞
免疫小鼠 进一步研究证明,这种抑制细胞的表型为cd3+cd4-cd8+（小鼠cd8单抗常用lyt-2）.人的抑制性t细胞表型为cd3+cd4-cd8+cd28-.ts细胞不仅对b细胞合成和分泌抗体有抑制作用,而且对th辅助作用、迟发型超敏反应以及tc介导的细胞毒作用都有负调节作用.
(2)ts细胞的亚群：ts细胞还可分为ts1、ts2和ts3不同亚群,分别起着诱导抑制、转导抑制和发挥抑制效应的作用.它们之间相互作用的确切机理还不十分清楚,可能是通过释放可溶性介质相互作用的.ts1（tsi,抗原特异性抑制性t细胞）分泌tsf1（tsif,抑制诱导因子）→作用于ts2（tst,抑制转导细胞）,分泌tsf2（tst
f）→作用于ts3（tse,抑制效应细胞）,分泌ts3f（tsef）,作用于th细胞,通过对th的抑制作用,从而对各种免疫功能起负调节作用.ts细胞群具有高度异质性,除ts1 、ts2、ts3亚群外,还有一群反抑制性t细胞亚群（contra-suppressor t cel,tcsl）.tcs活化后分泌反抑制性t细胞因子tcsf,直接作用于th细胞,解除ts细胞的抑制作用,使th细胞恢复辅助活性.
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作者：管理员
来源：旷博生物 发布时间： 00:00
四色T细胞亚群检测试剂是由四种不同荧光素标记的单克隆抗体组成：CD3-FITC/ CD4-APC/ CD8-PE/ CD45-PerCP。本产品配合流式细胞仪可用于确定人外周血中成熟的T淋巴细胞总数（CD3+），杀伤性T淋巴细胞亚群（CD3+ CD8+）和辅助性T淋巴细胞亚群（CD3+ CD4+）。
1.产品概述四色T细胞亚群检测试剂是由四种不同荧光素标记的单克隆抗体组成：CD3-FITC/ CD4-APC/ CD8-PE/ CD45-PerCP。本产品配合流式细胞仪可用于确定人外周血中成熟的T淋巴细胞总数（CD3+），杀伤性T淋巴细胞亚群（CD3+ CD8+）和辅助性T淋巴细胞亚群（CD3+ CD4+）。如与BD TruCOUNT(TM)（目录号：340491）同时使用，可以获得这些细胞亚群的绝对计数。2.应用杀伤性T淋巴细胞是T淋巴细胞（CD3+）中的CD8+亚群细胞，辅助性T淋巴细胞是T淋巴细胞（CD3+）中的CD4+亚群细胞。在临床上，可通过确定CD3+CD8+和CD3+CD4+的比例或数量来监控免疫缺陷病和自身免疫性疾病。确定CD3+CD4+辅助性T淋巴细胞的比例或数量在监控人类免疫缺陷性病毒（HIV）感染的人群上也具有及其重要的指导意义。随着病情的发展，感染HIV人群的辅助性T淋巴细胞数量通常会逐渐减少。在一些自身免疫性疾病病人中，CD3+CD8+抑制/杀伤性T淋巴细胞的比例不在正常范围内。在许多先天性或获得性免疫缺陷病人中，如重症联合免疫缺陷症（SCID）和获得性免疫缺陷综合症（AIDS）病人，CD8+亚群T淋巴细胞的相对比例会增加。目前，许多国家疾病控制中心（CDC）都建议使用含有CD3抗体的免疫试剂盒来检测HIV感染人群中T淋巴细胞各亚群的比例。检测CD3/CD4/CD8/CD45的免疫试剂盒可用以区别CD3+CD4+辅助性T淋巴细胞和CD3-CD4+单核细胞，并计数辅助性T淋巴细胞的数量。3.试剂参数：使用规格：50 T（20μl/T），1mL缓冲液：1mL PBS（pH 7.2），0.09%NaN3，0.2%BSA4. 产品说明本试剂所含四种单克隆抗体均通过亲和层析法纯化分离，并在最适条件下标记相应荧光染料。所有抗体中均不含游离的荧光染料及未标记抗体。本产品是按四种抗体最佳浓度配方组成的混合液。5. 样本收集和制备室温储存（20-25℃）的抗凝外周血，必须在48小时内染色，并在染色后24小时内上机检测。无菌采集血液并按下列免疫染色方法染色细胞：1.使用移液器采用反向移液技术吸取50μl全血样本，放入12×75mm的流式管中2.在管底加入20μl 该试剂抗体3.轻柔混匀后放置室温（20-25℃）孵育15-30分钟，避光4.每管加入450μl 1×流式细胞仪用溶血剂（目录号：6910001）5.轻柔混匀，室温避光孵育15分钟6.充分混匀样本后用流式细胞仪分析样品不同辐射剂量损伤后T淋巴细胞亚群,CD3、CD4、CD8、TH1和TH2变化观察--《第十四届中国科协年会第17分会场：环境危害与健康防护研讨会论文集》2012年
不同辐射剂量损伤后T淋巴细胞亚群,CD3、CD4、CD8、TH1和TH2变化观察
【摘要】：目的观察不同辐射剂量损伤对小鼠T淋巴细胞功能亚群的影响,探讨辐射所致的免疫系统损伤在细胞学和分子水平上的机制。方法 C57BL/6j小鼠采用60COγ射线照射诱导辐射损伤模型。总照射剂量分别为0.7、1.4、2.8、和5.6Gy。应用细胞表面标志和细胞内因子标记,流式细胞仪检测分析不同剂量组小鼠脾T淋巴细胞功能亚群CD3,CD4,CD8改变及Th1和Th2的变化。结果1.小鼠脾T-淋巴细胞功能亚群CD3,CD4和CD8在照射后均有明显降低,降低幅度与受照剂量明显相关。2.CD4/CD8比值显示照射后均有明显升高。3.照射后Th1和Th2均有明显降低,其中Th1降低明显高于Th2。受照剂量大于2.8Gy组Th2/Th1比值较空白对照组明显升高。结论不同照射剂量对T淋巴细胞功能亚群CD3,CD4,CD8和CD4/CD8有明显影响,Th1和Th2和Th2/Th1功能亚群的失衡在辐射所致的免疫损伤中具有较重要作用。
【作者单位】：
【关键词】：
【分类号】：R142【正文快照】：
核事故病人、长期接触射线或肿瘤病人接受放疗时常伴随严重的免疫功能低下已成为临床常见的棘手问题。淋巴细胞是对辐射最敏感的细胞族群之一,是放射损伤早期诊断和受照剂量估算的重要参考指标。随着辐射免疫学的飞速发展,电离辐射对免疫系统,尤其是对淋巴系统的影响越来越受
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孙晶星;[D];北京协和医学院;2011年
杨珂;[D];山东大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库
王小康;[D];山东大学;2010年
李志明;[D];浙江大学;2009年
苏锋;[D];苏州大学;2010年
汪海燕;[D];暨南大学;2012年
严恺;[D];新疆医科大学;2012年
邓云鹏;[D];河北医科大学;2012年
战宁;[D];吉林大学;2012年
张晓懿;[D];苏州大学;2013年
张宏霞;[D];吉林大学;2010年
冯俊;[D];安徽医科大学;2012年
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京公网安备75号→ T淋巴细胞亚群CD3CD4CD8偏低该怎样治疗？
T淋巴细胞亚群CD3CD4CD8偏低该怎样治疗？
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0.16这是什么原因造成的,如何治疗?恳求,谢谢!
第一次补充提问
怎样提升正气?谢谢
发表于 9:07:42
第二次补充提问
贞芪扶正胶囊 可以吗?注射用胸腺五肽可以吗?谢谢
发表于 16:28:56
第三次补充提问
贞芪扶正胶囊 可以吗?注射用胸腺五肽可以吗?谢谢
发表于 16:29:02
majian2150
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