AGS肝细胞空泡变性求助,黑点or空泡

各位大神帮忙看一下细胞出现大量空泡,这是咋了(空泡,肠上皮,传代,细菌) - 细胞实验 - 生物秀
标题: 各位大神帮忙看一下细胞出现大量空泡,这是咋了(空泡,肠上皮,传代,细菌)
摘要: [各位大神帮忙看一下细胞出现大量空泡,这是咋了(空泡,肠上皮,传代,细菌)] 本细胞是猪肠上皮细胞,在德国经过特殊处理,已传代2年。今年到本实验室,刚开始培养细胞生长良好,传至5代左右,细胞内出现大量大小不等的空泡,培养液里有大量运动的黑点,高倍镜下还出现亮点。做过细菌培养,未发现细菌。请各位大神看一下,这到底是怎么了。不胜感激。附件为细胞形态 关键词:[空泡 传代 肠上皮 细菌 细菌培养 培养液]……
本细胞是猪肠上皮细胞,在德国经过特殊处理,已传代2年。今年到本实验室,刚开始培养细胞生长良好,传至5代左右,细胞内出现大量大小不等的空泡,培养液里有大量运动的黑点,高倍镜下还出现亮点。做过细菌培养,未发现细菌。请各位大神看一下,这到底是怎么了。不胜感激。附件为细胞形态
回复我养293t的经验出现这种情况是的问题,0.22滤膜抽一下培养基试试回复看到能动的小黑点有可能是黑胶虫,问题应该出在培养液。回复哈哈
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电话:021-AGS细胞培养及相关(细胞培养,传代,血清,漂浮) - 细胞实验 - 生物秀
标题: AGS细胞培养及相关(细胞培养,传代,血清,漂浮)
摘要: [AGS细胞培养及相关(细胞培养,传代,血清,漂浮)] 相关疾病:感染幽门螺杆菌感染现在在一新的实验室,前一段时间买了一株AGS细胞,刚拿到的时候细胞状态很好的,开始传代之后感觉越来越差了,很多细胞变得很大,空泡化,消化时间也越来越长,甚至传代后不能贴壁,第二天开始漂浮死亡……之前没有接触过这个细胞,据说应该是比较好养的,请教一下各位会是什么原因啊?
用的培养基是HAM‘s F-12,血清是国产的(四季青),血清的影响会不会很大?
因为实验室条 关键词:[传代 细胞培养 血清 漂浮 空泡 分离培养 四季青]……
现在在一新的实验室,前一段时间买了一株AGS细胞,刚拿到的时候细胞状态很好的,开始传代之后感觉越来越差了,很多细胞变得很大,空泡化,消化时间也越来越长,甚至传代后不能贴壁,第二天开始漂浮死亡……之前没有接触过这个细胞,据说应该是比较好养的,请教一下各位会是什么原因啊?
用的培养基是HAM‘s F-12,是国产的(四季青),的影响会不会很大?
因为实验室条件有限,同一超净台另外有人在用,做的是从胃粘膜分离培养Hp,会不会是细胞实际已经被感染了?哪位在做Hp感染AGS的,能不能传张感染后细胞形态的照片给我看看?因为我这里的细胞已经丢掉了,没有留下照片。万分感谢!
之前不是我在养的,他传代时消化之前都用加了双抗的PBS洗一遍,我以前养细胞都不用这一步的,个人认为双抗之类的能不用还是先不要给细胞接触为好,这个不知道有没有影响的?
年后细胞要交给我,可能可以去买细胞那里再要一次,但不知道问题出在哪里可能还是会出现这种问题,手上又没有细胞来试验找出问题所在,在这里求助各位了!
如果哪位有这株细胞的话能否赞助我一些?谢过先!
万分期盼大家的帮忙,希望能有好消息可以让我安心回去过年了,
回复顶...有相关经验的朋友帮忙指点一下吧!回复我养的AGS空泡化也很严重我用的1640培养液血清也是四季清的有高手指点一下吧回复我的AGS也是这样 刚买的时候很好养长得快状态好 冻存复苏后 就长得很慢 传代后飘得很多 空泡化 我用的1640培养基 真拿他没办法 有高手吗指点一下吧!!回复我们养的AGS空泡化也严重,后面我每次换液的时候用PBS吹几下,后面状态又好转了我们用的是Hams-F12和进口的胎牛回复楼主,我的AGS一直都有空泡,听别的老师说,空泡是传的代次太多,细胞老化的缘故,可是,就在昨天,我的AGS传啊用啊,快一个月,竟然破天荒的一个空泡都没有了,我很诧异,是不是细胞在应激状态下会自我修复?因为前段时间培养箱的二氧化碳没了,AGS在这种状态下生活了2小时。。。回复楼主,我的AGS一直都有空泡,听别的老师说,空泡是传的代次太多,细胞老化的缘故,可是,就在昨天,我的AGS传啊用啊,快一个月,竟然破天荒的一个空泡都没有了,我很诧异,是不是细胞在应激状态下会自我修复?因为前段时间培养箱的二氧化碳没了,AGS在这种状态下生活了2小时。。。然后呢?建议你设计个实验研究研究回复楼主,就在我满心欢喜用没有空泡的AGS去做病毒转染后,发现病毒一转入空泡又出现了,但是没转的对照组仍然没有空泡~~我想空泡可能确实是一种应激反应~
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电话:021-& [求助]细胞中的小黑点到底是什么
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[求助]细胞中的小黑点到底是什么
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[求助]细胞中的小黑点到底是什么
我的细胞样品今天拿到现在的实验室
但是里面有很多小黑点
据说传代的第二天就出现,不会运动,也不影响细胞的状态
但是这边是实验室的工作人员担心会影响其他lab的细胞
叫我先搞清楚才可以culture
我的实验又不知道要拖到什么时候
各位能否给点意见 那些小黑点可能是什么污染呢
私下认为应该不是支原虫,低倍镜下看得到的黑色杂质
多谢各位大虾
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我所知道的有两种情况
第一种是你的培养基的问题,配培养基时最好选择孔径小的滤膜或者增加过滤次数。
第二种是因为同一培养瓶培养次数多了之后,死细胞的沉淀。解决方法是换新培养瓶。
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lz为什么要夹杂着一些英文单词呢,这个从输入法上考虑好像不太方便吧。
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最好能传张图片上来,我两年前养细胞时,也发现过黑色的点,有时还会发现它在动,
养了一两天后发现肯定不是细菌,也不是支原体,但细胞长的越来越慢,而黑点越来越多,放在同一培养箱后,其他细胞瓶里也会有了。然后就是实验室大规模的出现。细胞长到四五天后就死掉了,据说这是黑胶虫,又有人说是原生动物,好象也没个统一的说法。如果出现这种情况,建议清理无菌室所有物品,重新灭菌,用KMnO4熏蒸,按首次使用无菌室做,细胞重新复苏,这样基本就OK了。
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我们实验室最近也出现了这样的情况。胞浆内出现很多小黑点,但是请了高手过来也没鉴别出到底是什么东西。照楼上的意思,还是属于污染,那真要加倍小心了。几天后细胞死掉很多,而且细胞内出现比较大的空泡,不知道这属于什么现象?
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是在细胞内还是在细胞外,细胞外有可能是代谢物啊
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有的说是血清在灭活过程中产生的,置于370C时因为温度的原因黑点会增多。我的细胞前两天才从外地入本实验室,也出现这种情况,我个人觉得勤更换新鲜培养液,在此之前用PBS或D-hank‘s漂洗会好些。不知对否?
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同意楼上的,有可能是血清不好造成的,勤换medium养一段时间试试。
我觉得也有可能就只是细胞碎片。我有时候在subculture混合新medium和trypsin时太用力吹的话,在显微镜下观察,里面就会出现好多小黑点,师兄说那个是细胞的碎片,后来注意了这个问题,情况就好多了。
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如果是细胞内的话,可能是线粒体
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自己的一点思考:我做的过程中也发现这样的问题,估计是死亡细胞破碎后形成的,以前很少发现这样的问题,主要是现在细胞放进抚育箱时瓶口没有松到一定程度(空气能进瓶中,每次放瓶的时候不是我放的,做细胞前拿出来时发现瓶盖有点紧几乎没有打开,就发现这样的黑点问题,而且越来越多)。君,已阅读到文档的结尾了呢~~
【精品论文】幽门螺杆菌空泡毒素诱导细胞凋亡相关研究进展
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幽门螺杆菌对人胃癌细胞株AGS侵袭力的影响
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