用多聚甲醛固定细胞爬片、甩片或切片&当纯净甲醛在水溶液中溶解时，会自动聚合成长链的多聚甲醛。其长度不一，在水中同时进行聚合与解聚反应。甲醛易溶于脂类物质，因此能穿过细胞膜进入细胞...
用多聚甲醛固定细胞爬片、甩片或切片
当纯净甲醛在水溶液中溶解时，会自动聚合成长链的多聚甲醛。其长度不一，在水中同时进行聚合与解聚反应。甲醛易溶于脂类物质，因此能穿过细胞膜进入细胞内。用多聚甲醛固定细胞时，能使细胞内的自由氨基基团发生化学交联。当不同的分子发生交联时，形成一网状结构，把细胞的各个结构成分连接起来。
单独用多聚甲醛固定细胞不能使进入细胞内，在检测细胞内抗原时，标本经多聚甲醛固定后必须用非离子去污剂透化标本。
*不主张使用商业甲醛溶液作为细胞染色的固定液，因为商业甲醛实际上是甲醛和甲醇（乙醇）的混合物，甲醇和乙醇的作用是防止甲醛分子聚合，使其保持单体状态。使用商业甲醛处理细胞有两个缺陷：不具有多聚甲醛固定细胞的优点；细胞却被甲醇固定。
多聚甲醛固定方法为：①用洗涤玻片或培养皿；如果是单个的载玻片或盖玻片，用镊子镊取，放入装有的中。如果载玻片或盖玻片的数量较多，将其放在专用的支架上。如果是培养皿，将倒入其中洗涤；②倒掉，但勿使标本干燥；③加入4%多聚甲醛临用前配制），室温下静置10min；④用洗涤细胞两次；⑤用含0.2%TritonX-100或-40的溶液透化固定后的细胞2min（室温），有些标本可能需要长达15min，时间视抗原而定；⑥洗涤细胞4次，洗涤时间不少于5min。此时，可加入。
*常见问题 ：用交联剂如多聚甲醛固定蛋白质比用有机溶剂能更好地保持细胞结构，但可能降低某些细胞组分的抗原性。经多聚甲醛固定后，与胞内自由氨基结合的抗体也许不再识别这些抗原。如果抗体在其他实验中效果良好，但在经多聚甲醛固定的标本中不能有效地作用，可以尝试逐步降低多聚甲醛的浓度。这样虽然使细胞内各成分的交联程度降低，但有利于细胞结构的保持，可以使抗体更好地与抗原中的某些结合部位接触。
*注意：①多聚甲醛的固定是不稳定的，标本经多聚甲醛固定后应再经去污剂处理，如果标本在水溶液中浸泡的时间过长，则会使交联结构解体。因此，应避免固定后的标本在水溶液中浸泡的时间过长；②若用多聚甲醛固定悬浮细胞，因为细胞呈悬浮状态，洗涤过程复杂，因此，应注意离心时间不要过长或转速太高。一般用200×g离心5min。
在免疫染色实验中，如果可用的抗体使用效果均不佳，有三种方法可以使之改善。首先建议试用上述两种固定方法，因为这两种方法的固定机制存在很大区别。抗体在一种固定方法中检测效果不理想，有可能在另一种固定方法中工作良好。第二个解决问题的方法是降低固定液的浓度，用系列稀释的固定液进行试验。下面选择的方法虽然简单，但在非常低浓度固定液的情况下，仍能达到良好的固定效果。第三种方法是根据固定方法来制备抗体，先将抗原用固定液固定后，再去免疫动物产生抗体。在这种情况下，所用抗原将和实验中固定后的抗原非常相似，能够获得结合固定抗原的抗体。
技术频道 - 生物实验技术资料库！
最新发布产品
<input type="hidden" name="content" value=" " />
最新图片文章
Copyright &
易生物VIP企业推荐多聚甲醛的固定原理来自:
日分享至 :
用甲醛灌注血管固定活体组织的原理是什么？问题详情：越深刻越好哦，请教哪位大侠帮忙解答一下看到实验室中那么多的标本，搞不清楚都是怎么做成的，做标本固定的方法和原理是什么推荐回答：所以一般就用多聚甲醛代替甲醛，一般在35～40％，原来是个商品名字。甲醛现在有两个形态甲醛可以使蛋白质凝固，formalin，很容易解聚成甲醛。同时，固定标本用的是液态甲醛，医学行业叫福尔马林；液态是甲醛的水溶液，甲醛有防腐作用，固态为多聚甲醛，可以很好地保存标本，在标本制作过程使用甲醛可以使标本固定（蛋白质凝固）聚甲醛的生产原理是什么？推荐回答：堆密度600～800 g/:20000吨/，反应时间5分。 成果水平及主要技术指标，PH3;年的多聚甲醛生产工艺;年、干燥器，然后通过两级降膜真空浓缩得到80%左右的浓甲醛溶液，存在着工业包装要求高，水溶性好，使用不便等弊病。 技术原理及流程，灰分含量≤100ppm，性质活泼、连续干燥得到96%左右的多聚甲醛成品、喷射造粒和连续干燥等技术，天津大学石化技术开发中心参考国外当前最先进的生产技术。2001年我国进口3，高质量的多聚甲醛具有纯度高:将37%或55%的甲醛水溶液先解聚。 吨产品消耗指标: 37%甲醛2，该工艺采用两级降膜浓缩，溶解性(在100℃水中10分钟)95%.8%，被誉为理想的纯甲醛源，电260 kwh、耙式或刮片式干燥工艺所带来的生产规模小: 甲醛含量≥95%.5%，远远不能满足市场的需求，聚合度8～30，颗粒均匀等特点.0吨，解聚完全:多聚甲醛作为甲醛的理想代用品有着广阔的市场.5～5:10000 m2，使多聚甲醛生产的各项质量和消耗指标均达到了国外的先进水平、造粒塔;L，甲醇含量≤0，但国内的多聚甲醛总产量不足6000吨/.8吨。 所需厂房占地面积，运输困难。我国目前虽有多家多聚甲醛生产厂，贮存稳定性差。 主要原材料及来源，酸度≤0，原材料消耗高，难与国外产品竞争，蒸汽3甲醛是一种重要的基本有机化工原料，熔点120～175℃，但由于沸点低。 市场分析及效益预测，克服了国内釜式浓缩。 根据国内需要，但生产规模小、聚合反应器，产品质量差:甲醛:产品质量指标，产品质量差等缺点:解聚釜，在调聚剂的作用下发生聚合反应后，因此每年需要从国外进口大量高质量多聚甲醛。 主要设备、吸收塔和冷却器等.0。 生产规模及产量、降膜蒸发器，冷却水200吨;年，开发了20000吨/，而且还在以超过25%年均速率增长，原材料消耗高，产品疏松.75万吨多聚甲醛，再通过喷射造粒。多聚甲醛是工业甲醛极好的代用品多聚甲醛固定组织在常温下能保存多长时间推荐回答：想长期保存，最好在多聚甲醛中24小时后，转入75%乙醇里经多聚甲醛固定的冰冻切片要做抗原修复吗？推荐回答：水煮加热法等，酶消化法；(2)甲醛在保存过程中会形成羧甲基。对于冰冻切片用丙酮或甲醛固定效果较好，方法如下。也有人用蒸馏水修复抗原冰冻切片一般不需要抗原修复，常用的修复液是pH6.01mol/。因此在染色时为取得良好的染色效果，一常用的抗原修复方法有微波修复法。修复抗原的方法很多。事实上经甲醛固定的部分组织细胞。因为你是用4%PFA固定还是要考虑做抗原修复的；(3)在用固定剂固定时。目前进行的常规石蜡切片标本，必须对有些抗原进行预先修复，也可能会封闭抗原决定族：将脱蜡水洗过的切片放入盛有蒸馏水的容器中，而封闭抗原决定族，石蜡切片需要抗原修复，其原因为，一般均用甲醛固定，中低火维持沸腾状态10 min，会使蛋白与蛋白之间发生交联：(1)在用甲醛固定过程中形成醛键而封闭了部分抗原决定簇，免疫组化标记敏感性明显降低，高压加热法.0的0，置微波炉内高中火5 min煮沸;L的柠檬酸盐缓冲液分享至 :
下一篇：上一篇：相关文章相关帖子---多聚甲醛的固定原理多聚甲醛 解聚温度来自:
日分享至 :
多聚甲醛如何解聚！推荐回答：水溶液中的游离态及聚合态的甲醛进行定量分析比较难，8-100，再请问一下您所说的低聚合度高聚合度是以多少为界限的？多谢，加热也难溶的是高聚合度的，杜邦公司Delrin系列的聚甲醛树脂聚合度都有好几百。多谢了人生即选择(站内联系TA)，试试GC低温吹扫的方法;100。hm2006(站内联系TA)三聚甲醛在水溶液中是微溶的，看来您对聚甲醛方面有不少了解，您完全可以与华东师大化学系侯博士取得联系，是不是可以说里面没有不可溶的甲醛聚合物，这样的可溶性的聚甲醛应该如何解聚？您有这方面的文献吗？hm2006(站内联系TA)而且有一些聚合度很低，反应温度100度以上）。还有一个问题是它会在水相中形成一个新的平衡？可否再指教一二，同时应该如何对水溶液中的游离态及聚合态的甲醛进行定量分析呢:P 您好，比如聚合度为2 。不好意思再麻烦请教一下，老是麻烦你，得到也是一个复杂的混合体系，我的反应得到的是澄清的水溶液（我是以水作反应溶剂。hm2006(站内联系TA)To！呵呵，她有这方面的经验？多谢，如更稳定的三聚甲醛，高聚合度的如Delrin系列的聚甲醛树脂即便在高温下也难解聚？没有三聚甲醛吧！真是遇到高手了，甚至上千！cjg820(站内联系TA)加热下可以溶于水的肯定是低聚合度的，也就是甲醛以甲二醇的形式存在于水溶液中。hm2006(站内联系TA)多谢：是否可以说加热下可以溶于水的应该是低聚合度的，所以即使GC可行，或许能不破坏聚合的醛: cjg820谢谢您！cjg820(站内联系TA)低聚合度的多聚甲醛（如市售试剂级）加热即可解聚？真是不好意思！cjg820(站内联系TA)低聚合度的多聚甲醛聚合度怎样加工才能使聚甲醛产品更耐磨？推荐回答：1.物理方法：主要添加填充体系；2.化学方法：主要从改变橡胶基体来提高耐磨性，比如说可以引入耐磨的基团。聚甲醛（IUPAC命名Polyoxymethylene，POM）（或称多聚甲醛；聚缩醛），为甲醛的聚合物（高分子量聚甲醛），一般结构长度有八到一百个单位。长链多聚甲醛常用制作于耐热塑胶， 又称聚甲醛塑胶（POE，杜邦出产之Derlin）。多聚甲醛因为分解快速而稍具臭味，可用于熏烟消毒、杀菌，也可用于制备纯甲醛（可制福马林）。低温储存甲醛溶液便会缓慢生成多聚甲醛，以白色不溶物沉淀出来。聚甲醛的合成方法问题详情：RT 关于其合成方法 最好再有参考文献谢谢 分的话很有很有推荐回答：聚甲醛的合成方法是将37%的甲醛在减压下蒸发,经催化缩合得到固体甲醛,过滤,用水洗涤,经真空干燥制得成品。聚甲醛全名聚甲醛树脂，简称聚甲醛，热塑性结晶聚合物。被誉为“超钢”或者“赛钢”，英文缩写为POM。通过甲醛聚合所得之聚合物，聚合度不高，且易受热解聚。聚甲醛是一种没有侧链，高密度，高结晶性的线性聚合物，具有优异的综合性能。聚甲醛是一种表面光滑，有光泽的硬而致密的材料，淡黄或白色，可在-40-100°C温度范围内长期使用。它的耐磨性和自润滑性也比绝大多数工程塑料优越，又有良好的耐油，耐过氧化物性能。很不耐酸，不耐强碱和不耐太阳光紫外线的辐射。聚甲醛的拉伸强度达70MPa，吸水性小，尺寸稳定，有光泽，这些性能都比尼龙好，聚甲醛为高度结晶的树脂，在热塑性树脂中是最坚韧的。具抗热强度，弯曲强度，耐疲劳性强度均高，耐磨性和电性能优良。聚甲醛的分子是一种没有侧链的高密度、高结晶性的线型聚合物。由于C-O键的键长小于C-C键，因此聚甲醛链轴方向的填充密度大。与聚乙烯相比，聚甲醛的碳氧键短，内聚能密度高，密度大。多聚甲醛熔融温度、气化温度分别是多少？推荐回答：；相对密度(空气=1)1：稳定危险标记，溶于稀酸：不溶于乙醇：相对密度(水=1)1：70℃熔点。：2-8°C以上由北京大元环境检测技术研究中心为您解答： 120～170℃溶解性;25℃闪点.03稳定性.39： (30)n蒸汽压,n=10-100外观与性状，具有甲醛味分子量，谢谢采纳：HO-(CH2O)n-H，微溶于冷水：8(腐蚀品)存储条件.19kPa/：低分子量的为白色结晶粉末、稀碱密度：0多聚甲醛化学结构式分子式多聚甲醛解聚成甲醛的条件是什么呢 谢谢各位推荐回答：hm2006(站内联系TA)To，看来您对聚甲醛方面有不少了解: cjg820 谢谢您，高聚合度的如Delrin系列的聚甲醛树脂即便在高温下也难解聚！cjg820(站内联系TA)低聚合度的多聚甲醛（如市售试剂级）加热即可解聚呵呵，再请问一下您所说的低聚合度高聚合请问聚甲醛固体颗粒，注塑过程中，温度未达到热解温度，那么会产生什么废气推荐回答：想知道到底有什么废气、二氧五环等等，此外还有甲醇。实际上在聚甲醛的生产中，这个不是分解产生的，而是合成过程中的残留、甲酸、二氧五环、三聚甲醛，会有什么气体。但事实上还有其它反应，从这个情况看、甲醛，聚甲醛没有到分解温度，水溶液可不行。现在大体上可以回答这个问题了、甲烷，我们常见的甲醛是它的35-40%水溶液、三聚甲醛，甲醛只是一个中间体，不过说一下它的俗名你可能更了解些？肯定有甲醛，在有氯情况下甚至可能反应生成二氯甲醛、二氧化碳等、一氧化碳，甲醛的过度氧化反应还会产生甲酸。但是要合成聚甲醛，因为甲醛不易储存：光气--最早使用的军用毒气。工业合成路线 甲醇--氧化→甲醛--浓缩→合成三聚甲醛--精制+二氧五环+催化剂聚合→聚甲醛这个是正常的反应，一定要高浓度的甲醛原液才行，学名叫福尔马林，还是先从聚甲醛是怎么合成的说起吧，这个大家听起来可能有点陌生，聚甲醛中残留的小分子物质有 甲醇分享至 :
下一篇：上一篇：相关文章相关帖子---多聚甲醛 解聚温度}