利普斯50(E50)牛奶抗生素检测试剂操作规范
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&& 7.()(10ppb)
4.50ul50ul2mm2
7PHPH6.6PHPHPHPH
E50加热器（FX Incubator）的功能
&其实ECLIPSE50抗生素检测试剂盒本来就有个专配实验仪器，这个仪器就是加热器FX
Incubator。客户只重视实验的成本，往往放低了对实验效果的要求，使用一般恒温设备来代替。但经过几年市场情况的反馈，我们发现水浴锅和恒温箱在使用过程中出现了很多的问题。如果让我介绍使用加热器的好处，还不如让我告诉大家使用水浴锅盒恒温箱的坏处。
从实验的原理来跟大家申明一下。ECLIPSE50简称E50，是由西班牙引入中国的，并作为国标第二法被纳入乳品的法规。根据以前法规很难或者很长时间才改变的事实，从而可以认定它必将是个长期执行的法规。E50使用的是微生物抑制法，试剂中的杆菌是在65.0℃生长最快的，其他温度都会降低杆菌的生长速度，如果实验者使用了温度不能恒定的水浴锅和培养箱，从而导致客户在最佳培养时间时不能判读结果。
水浴锅是一个潮湿的环境，在实验过程中，水或者水汽可能会进入到试剂单孔中去，有的客户甚至发现了封闭后的单孔在判读时的液面有升高的迹象，就是因为进水或者水汽太多的原因。
市场上的水浴锅和培养箱，它们的温度不能准确恒定在某个温度点上，从而导致它们不能用来做对时间要求高的实验。普通的微生物培养是可以用水浴锅和培养箱的，但E50是要在最佳培养时间判读结果的，按照科学的精神是不能随便更改判读时间的。
总而言之，加热器最大的优点就是温度恒定，能恒定在实验要求的温度上。 优点：恒温65℃ &
& & 体积小 &
& & 分量轻 &
& & 节省时间 &
& & 金属浴没有水汽干扰 &
& & 容量大，96个样可以同时实验
实验中间有打开的，能快速回温
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利普斯50（E50）抗生素检测 牛奶检测抗生素试剂操作规范
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E50抗生素检测试剂盒
ECLIPSE 50 抗生素检测试剂盒
联系人:李先生
北京博恒科创生物科技有限公司
地址:北京市朝阳区三间房西里5号楼2单元101
邮编:100020
利普斯50(E50)牛奶抗生素检测试剂操作规范
一．操作步骤
1．用美工刀切割试剂单孔，先纵向割开一条（8个），再横向割一个或两个、三个……（沿两孔之间缝隙割）。
2．取出割好的检测单孔，做好相应样品标记(可以在侧面用细水笔标记数字)，揭开密封铝箔。
3．使用取样枪按样品顺序吸取样品（50μl），加到相应单孔中。注意：每个取样头对应一个样品，用过的取样头扔掉。
4．全部样品添加完毕后，剪取相应密封条对检测单孔进行密封。（密封条已经对应单条截好，只需用手撕取，检测量不到一条8个
的，再对应剪取）。
5．将密封后的检测单孔放入水浴锅内进行培养，培养时间2小时30分钟左右。
但是具体每批产品的培养时间请按照每盒试剂里面的Product certificate，里面有标明
每批次的具体培养时间，用中文在旁边注明。请操作人员每次打开一盒新的试剂之前先
看product certificate中的最佳培养时间，按照这个时间来培养。
6．取出培养后的检测，从侧面观测单孔颜色，记录检测结果。
&&注：（1）结果判读
& && && & 黄色到浅黄绿色包括绿色为阴性结果范围& &蓝绿色到紫色为阳性结果范围
& &&&（2）当检测结果颜色界于阴性、阳性之间时（可疑结果：上半层为蓝灰色或者淡蓝灰色，下半层为黄色），如果上表层和牛
奶接触面为一圈淡蓝色，下面都是黄色的样品可以判定为阴性。
7. 为了保证每次检测的准确性以及找到错误结果的原因，每次检测必须做一个阴性对照
（用无抗奶作为阴性对照），如果有条件同时也可以做一个阳性对照（10ppb的青霉素样
品作为阳性对照，为了确保试剂是否正常）。
二．试剂保存
1．保存温度：& & 4-12℃ （一般冰箱的保鲜柜即可满足保存条件）
2．避光保存：本产品对阳光敏感，一般不要长时间暴露在阳光下，或者灯光下。
& && &注：试剂不可冷冻保存，经过冷冻的试剂内部成分将被破坏；试剂及样品要恢复到室温后才可开始检测操作，但是需要把剩
余的检测小孔马上放回冰箱，以免重复多次后影响试剂的性能。
三． 注意点
1．培养的工具，可以使用恒温水浴锅，或者生化培养箱，温度严格必须控制在65℃±1℃，
超过此温度条件，检测结果会受到影响，严重的就会有假阳性和假阴性结果出现。使用水浴锅时，在温度恒定65℃以后，必须每隔
10分钟用温度计监控一下，看温度偏差是否在±1℃以内。
2．每板未使用完的试剂一定要马上要放回盒子里面，并在冰箱保存，注意要用原来的塑
料袋继续封好。另外不要把已经撕开的小孔或者不小心弄破铝薄纸的小孔继续放回冰箱
待用，如果不小心弄破小孔后要用粘胶纸封好，并且在最快时间内使用完。
3．在使用恒温水浴锅时，把加好样品后的检测小孔用配备的粘胶纸密封完全，以避免
因为受热而进水。另外，把试剂孔放在框板里面，然后慢慢地放入水浴锅内，使之漂
浮在水面上。不要把框板整个放入水面以下，这样会使胶纸粘性失效或者降低，使水
气或者水进入小孔内，使检测结果发生偏差。
4．加样枪的使用，加样枪有两个档位，以第一个为准，轻轻往下按直到要用较大力往下按为止，这个为一档。要求一挡吸取牛奶样
品，二档添加牛奶样品，这样保证加样量达到50ul。50ul的容量大概是牛奶样品占用了大概2mm左右的高度，或者大概是3滴加样枪
的量，如果超过这个高度，很可能是加样枪使用错误或者加样枪已经不准确。
5．每天都要对水浴锅的温度进行测量（最好连续观察30分钟，确定温度是否还能在正常的范围内），以保证实验的准确性。如果用
恒温培养箱做也需要做温度的确认，不能超过规定范围。
6．刚挤下来的牛奶不能直接检测，需要把牛奶先放在冰箱冷藏室1-2个小时后再开始检测，刚挤下的热牛奶含有很多的抑制微生物
的成分，影响检测结果出现假阳性。
7．样品的PH值要求是和原料奶的PH值一样，即6.6左右。如果PH值过高或过低都可能引起错误的结果，PH值过高则导致假阳性结果
，PH值过低则导致假阴性结果。所以在每次检测之前先测一下样品的PH值。
8．如果加样后，牛奶样渗透到小孔底部（底部厚厚的一层白色）或者这个小孔侧面都有白色的奶样，证明试剂曾经经历过非常低温
度状态（2℃以下的温度），对于这种检测小孔建议再做一次检测来确认结果。
E50抗生素检测试剂盒
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利普斯E50牛奶抗生素残留检测
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ECLIPAS 50/利普斯50 （E50）使用说明
利普斯50 ,也称E50 是一种用于牛奶中的抗生素检测的试剂盒，其检测原理基于微生
物生长抑制实验。这是一种快速简单的检测方法，可用于检查牛奶中所含的抗生素浓度是否
超出欧盟规定残留量（MRL）。此试剂盒主要针对β-内酰胺类，磺胺药物，四环素类药
物，大环内酯物，氨基配糖类等30 多种抗生素，对抗生素检测具有广谱性．此试剂盒不仅
适合乳制品生产工厂对原料及成品半成品中抗生素的检测，更适合牧场和奶站对抗生素的源
头控制，从而更有效地保证了乳品安全，使乳品真正达到＂无抗＂要求。
【产品特点】快速，安全和精确，无需样品前处理，只需一步操作，稳定，灵活的产品规
格：可以独立分拆的96 孔微孔板。对β-内酰氨类(青霉素类)、四环素类、磺胺类等药物有
极高的敏感性。定性方法，结果直观易懂拟检测物质进入被检样本的途径
【饲料、兽药使用方向】ECLIPSE 50 是一种用于牛奶中的抗生素和抑制剂检测的，其检测
原理基于微生物生长抑制实验。这是一种快速简单的检测方法，可用于检查牛奶中所含的抗
生素浓度是否超出残留量（MRL）。
【检测原理】ECLIPSE 50 是一种微孔板，每个微孔中含有散播了芽孢杆菌的琼脂培养基和
PH 指示剂。当在65℃下培养微孔板时，孢子发育生长，进而降低了培养基的PH 值，在PH
指示剂的作用下，原来的蓝（紫）色将会变为绿－黄色。如果牛奶中的抗生素浓度高于的检
测限，微生物的生长和酸的生产将会受到抑制，由于没有酸生成，颜色将不会改变。
【检测程序】确定所需微孔数量，用介刀沿微孔外侧划开金属薄膜。注意不要剪开剩余的微
孔板上的金属薄膜，因为这会使微孔挥发以致干结。
从塑料框上取下已剪开的微孔条。只需简单地用指尖向上压微孔条，微孔条即可分离出
来。剩余的微孔板需立即放回塑料袋中密封以防止微孔干结。同时在6-15℃下储存。
将要使用的微孔板（条）安放到另一个空的白色塑料架上，剥开微孔上的胶粘金属膜，在每
个微孔中加入50μl 牛奶样品。建议使用自动微量取样枪移送样品。
用胶粘纸小心地密封微孔板（条），将其垂直放入到已经预热到65℃的水浴或培养器中。必
须确保微孔已经完全密封。若在培养过程中有水滴落到微孔中，将会产生错误的检测结果。
培养时间按出厂报告上的时间培养。做的时候做阴性和阳性的控制样。
从微孔侧面观察结果。绿-黄色或者黄色表示抗生素不存在（阴性），蓝-紫色表示抗生素存
在（阳性），绿-蓝色表示抗生素浓度接近的检测限。此时建议重做检测。
【标准配置】可分拆的微孔板（96 个独立检测），粘胶薄膜。裁剪刀具和塑料架（可选，需
另购）、使用说明书、培养装置（可选，需另购）。22-80℃控温，适用于微孔板和微管物超
所值。附加工具（自备）：微量取样枪（带取样头）、水浴或培养器（65℃）、无抗奶（用于
阴性控制）
【检测样本类型及残留限量】
抗生素检测限MRL
青霉素G 2-4 4
氨比西林0-5 4
阿莫西林0-5 4
苯甲异恶唑青霉素5-25 30
氯洒西林25-40 30
头孢氨苄25-75 100
头孢匹林5-8 10
磺胺塞唑20-75 100
磺胺甲嘧啶100-200 100
磺胺100-600 100
土霉素50-150 100
四环素50-150 100
红霉素200-400 40
泰乐菌素20-100 50
【储存条件和保质期】
储存条件：2-8°C 冷藏，避光。保质期：12 个月（自生产日起）
【注意事项】
1.我们推荐使用阴性控制样品(无抗奶)和阳性控制样品(含有较高浓度的抗生素如10mg/L
青霉素-G 的牛奶)来确定加热培养所需的最佳时间
2.本试剂盒对抗生素和其他抗菌物质如清洁剂和消毒剂异常敏感。必须防止样品被此类物质
3.微孔板需密封在塑料袋中以防止微孔干结，并在4-8℃下冷藏存放
4.牛奶中少量的天然抑制剂不会影响到试剂盒的检测结果。但初乳、哺乳期末期和乳腺炎牛
奶中的抑制物质将会有所增加，此时检测结果将会受到影响。
5.如果要分析含有防腐剂的牛奶，培养时间需适当延长几分钟
6.正确的结果判读要看小孔的侧面。
以上是利普斯E50牛奶抗生素残留检测的详细信息，由自行提供，如果您对利普斯E50牛奶抗生素残留检测的信息有什么疑问，请与该公司进行进一步联系，获取利普斯E50牛奶抗生素残留检测的更多信息。
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利普斯50(E50)牛奶抗生素检测试剂操作规范
    &&&&&&&&利普斯50(E50)牛奶抗生素检测试剂操作规范一．操作步骤&1.&& 用美工刀切割试剂单孔，先纵向割开一条(8个)，再横向割一个或两个、三个……(沿两孔之间缝隙割)。&2.&& 取出割好的检测单孔，做好相应样品标记(可以在侧面用细水笔标记数字)，揭开密封铝箔。&3.&& 使用取样枪按样品顺序吸取各样品(50μl)，加到相应单孔中。注意：每个取样头对应一个样品，用过的取样头扔掉。&& 4．全部样品添加完毕后，剪取相应密封条对检测单孔进行密封。(密封条已经对应单条截好，只需用手撕取，检测量不到一条8个的，再对应用剪刀剪取)。&& 5．将密封后的检测单孔放入水浴锅或者恒温培养器内进行培养，培养时间2小时30分钟左右。&6．取出培养后的检测，从侧面观测单孔颜色，记录检测结果。&&&&&&&&&&& 注：结果判读&&&&&&&&&&&&&&& 黄色到浅黄绿色包括绿色为阴性结果范围&& &&&&&&&&&&&&&&& 蓝绿色到紫色为阳性结果范围&&& && 7.为了保证每次检测的准确性以及找到错误结果的原因，每次检测建议做一个阴性对照(用无抗奶作为阴性对照)，如果有条件同时也可以做一个阳性对照(10ppb的青霉素样品作为阳性对照，为了确保试剂是否正常)。&二．试剂保存&& 1．保存温度： 4-12℃ (一般冰箱的保鲜柜即可满足保存条件)&& 2．避光保存：本产品对阳光敏感，一般不要长时间暴露在阳光下，或者灯光下。&&&&& 注：试剂不可冷冻保存，经过冷冻的试剂内部成分将被破坏；试剂及样品要恢复到室温后才可开始检测操作，但是需要把剩余的检测小孔马上放回冰箱，以免重复多次后影响试剂的性能。三． 注意点& 1．培养的工具，可以使用恒温水浴锅，或者生化培养箱，温度必须严格控制在65℃±1℃，超过此温度条件，检测结果会受到影响，严重的就会有假阳性和假阴性结果出现。2.每板未使用完的试剂一定要马上要放回盒子里面，并在冰箱保存，注意要用原来的塑料袋继续封好。另外不要把已经撕开的小孔或者不小心弄破铝薄纸的小孔继续放回冰箱待用，如果不小心弄破小孔后要用粘胶纸封好，并且在最快时间内使用完。3.在使用恒温水浴锅时，把加好样品后的检测小孔用配备的粘胶纸密封完全，以避免因为受热而进水。另外，把试剂孔放在框板里面，然后慢慢地放入水浴锅内，使之漂浮在水面上。不要把框板整个放入水面以下，这样会使胶纸粘性失效或者降低，使水气或者水进入小孔内，使检测结果发生偏差。4.加样枪的使用，加样枪有两个档位，以第一个为准，轻轻往下按直到需要用较大力往下按为止，这个为一档。要求一挡吸取牛奶样品，二档添加牛奶样品，这样保证加样量达到50ul。50ul的容量大概是牛奶样品占用了大概2mm左右的高度，或者大概是2滴半加样枪的量，如果超过这个高度，很可能是加样枪使用错误或者加样枪已经不准确。5.定期要对水浴锅的温度进行测量(最好连续观察30分钟，确定温度是否还能在正常工作范围内)，以保证实验的准确性。如果用恒温培养箱做也需要做温度的确认，不能超过规定范围。专用的FX加热器不需要做温度确认。6.刚挤下来的牛奶不能直接检测，需要把牛奶先放在冰箱冷藏室1-2个小时后再开始检测，刚挤下的热牛奶含有很多的抑制微生物的成分，影响检测结果出现假阳性。7．样品的PH值要求是和原料奶的PH值一样，即6.6左右。如果PH值过高或过低都可能引起错误的结果，PH值过高则导致假阳性结果，PH值过低则导致假阴性结果。所以在每次检测之前先测一下样品的PH值。8.如果加样后，牛奶样渗透到小孔底部(底部厚厚的一层白色)或者这个小孔侧面都有白色的奶样，证明试剂曾经经历过非常低温度状态(2℃以下的温度)，对于这种检测小孔建议再做一次检测来确认结果。&&&&&&&&上海亿欣生物科技有限公司
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