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请教：薄膜过滤法所需的滤器滤膜问题
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因为我本身不是做微生物检测这块的，但是被逼上梁山了没办法，硬着头皮入道了
翻来覆去看了坛子里的很多关于这方面的帖子，知道了密理博这个牌子，但是膜的问题还是没搞清楚，昨天还在想能不能用过滤流动相的水相的滤膜直接拿来用，有点混乱了。。
我想请教有用过的朋友，我想买一台来专门做水质分析的，目前只测菌落总数，霉菌酵母菌而已，而且数量也不大，一个月不到30个样
这样的话，买密理博哪个型号的滤器性价比高，最好钢的方便灭菌，或者有使用国产的也可以赐教。
还有滤膜的话，测菌落总数和霉菌酵母菌而已用什么样的膜，当然喽，有品牌型号的更好，经验至上！
还有，我这本身有一台电动吸引器，是不是就不用滤瓶了。
问题多多啊，劳烦各位不吝赐教，谢谢！
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滤瓶不用你怎么过滤啊
菌落总数真菌检测，不过滤也是可以的呀
独沐秋风，看枫红落英
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0.45um的滤膜就可以了，我们用的是进口的厂家忘记了
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我是用赛多利斯的，三连膜过滤系统
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滤膜是不是用普通的过滤流动相的0.45um的滤膜就可以了？
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whatman&&过滤器，滤膜都有。我们一直用它 哈哈
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滤膜、过滤支架都是密理博的~~~
滤膜：0.45微米的滤膜用于总菌，0.8微米的用于霉酵，是 150个一盒的，每一片都是独立包装的；
过滤支架：&&我们样品不多，用的是独立的支架，不过不是不锈钢的，是塑料的，每次用之前按样品数量拿几个，和空白水样什么的一起灭菌，很方便啊，还是比较耐用的
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电动吸引器 没用过，不知道是什么东西
我们是在超静台旁放一个真空泵，超静台壁上打个孔，引个管子过来跟过滤支架连上
货号：过滤支架~~XX1104700;&&滤膜：0.45微米~~HAWG047S6; 0.8微米~~~AAWG047S6;
对了，都是 47mm的
话说，密理博 被默克合了之后，服务上比以前退步了，不知道是不是还在磨合期
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楼主有需要详细的资料可以私下联系我啊，呵呵
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回复 1# yaohu34
滤膜、过滤支架都是密理博的~~~
为什么霉菌酵母可以使用0.8um孔径的呀，有没有相关标准呢，我们这要写SOP但是找不到根据呀，
(矿山从业人员)
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电动吸引器 没用过，不知道是什么东西
我们是在超静台旁放一个真空泵，超静台壁上打个孔，引个管子过来 ...
电动吸引器是滤膜法微生物检测的“最佳拍档”：
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电动吸引器
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【求助】关于微生物检查中的薄膜过滤法
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这个帖子发布于4年零45天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
请问各位老师：我现在在做药物的微生物限度检查验证，用的是薄膜过滤法，现在有一个问题，就是菌液组过滤时，是在第一次冲洗时就加菌液，然后再冲洗？还是先冲洗而在最后一次冲洗时加菌液呢？谢谢各位师！
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应该是先冲洗滤膜，再过滤菌液，这样才不至于把已吸附在膜表面的细菌冲走，导致结果不准确。
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blowapc edited on
冲洗完滤膜后，最后加入菌液过滤方法考察的是按方法过滤冲洗处理完后，滤膜上是否还残留样影响验证菌生长的东西目前中国药典验证的不是整个方法过程，而是前处理方法是否把抑菌成分去掉了，所以菌液最后加
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这是我们的方法1.菌液制备取已活化的金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌、黑曲霉，用0.9%无菌氯化钠溶液洗下菌苔（生孢梭菌直接稀释），吸入样品比浊管内，用0.9%无菌氯化钠溶液稀释适宜浓度制成均匀菌液，再将菌液稀释至与细菌标准比浊管相同浓度，用0.9%无菌氯化钠溶液制成每1ml含菌数小于100CFU的菌悬液（可用生物显微镜计数）。在试验的同时各取1ml稀释好的金黄色葡萄球菌，枯草芽孢杆菌，铜绿假单胞菌，白色念珠菌，黑曲霉菌液涂布营养琼脂平板（金黄色葡萄球菌，枯草芽孢杆菌，铜绿假单胞菌30-35℃培养3天，白色念珠菌，黑曲霉20-25℃培养5天后计数）。2.灵敏度抑制试验步骤取X支供试品(按你们的检量,我们的是安瓿瓶小容量,所以要加生理盐水)，加入适量0.9%无菌氯化钠溶液，混匀，各取(用几个滤筒就取几分之几)与1ml含菌量少于100CFU的的菌液(所有菌)混匀,按薄膜过滤法过滤至一次性使用全封闭集菌培养器内，再将硫乙醇酸盐流体培养基加至滤有金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、生孢梭菌培养器内,改良马丁培养基加至滤有白色念珠菌、黑曲霉的培养器内.另取一套全封闭集菌培养器，不加供试品，其他操作同上，作为阳性对照；再取一套全封闭集菌培养器，只过滤生理盐水、不加菌，加入培养基后作为阴性对照,含有生孢梭菌供试品阳性、阳性对照，阴性对照的硫乙醇酸盐液体培养基放置30-35℃，培养3天.装有金黄色葡萄球菌，枯草芽孢杆菌，铜绿假单胞菌、阴性对照、阳性对照的硫乙醇酸盐流体培养基放置20-25℃培养3天.所有改良马丁培养基置20-25℃培养5天.每天进行观察并记录结果。重复以上试验三次，并记录各次结果.(实验顺序:阴性-阳性对照/供试品+菌,先做阴性避免染菌,出现假阳性)3.标准:在三次的试验中，阳性对照应生长良好，阴性对照应不长菌；与阳性对照管比较，若供试品阳性各容器中的试验菌均与相应的阳性对照一样生长良好，则验证合格并可照此检查法和检查条件进行供试品的无菌检查。如含供试品阳性的任一容器中微生物生长微弱、缓慢或不生长，则供试品的该检验量有抑菌作用，验证不合格。验证不合格后应调整方法，重新验证。
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云淡风情 这是我们的方法1.菌液制备取已活化的金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌、黑曲霉，用0.9%无菌氯化钠溶液洗下菌苔（生孢梭菌直接稀释），吸入样品比浊管内，用0.9%无菌氯化钠溶液稀释适宜浓度制成均匀菌液，再将菌液稀释至与细菌标准比浊管相同浓度，用0.9%无菌氯化钠溶液制成每1ml含菌数小于100CFU的菌悬液（可用生物显微镜计数）。在试验的同时各取1ml稀释好的金黄色葡萄球菌，枯草芽孢杆菌，铜绿假单胞菌，白色念珠菌，黑曲霉菌液涂布营养琼脂平板（金黄色葡萄球菌，枯草芽孢杆菌，铜绿假单胞菌30-35℃培养3天，白色念珠菌，黑曲霉20-25℃培养5天后计数）。2.灵敏度抑制试验步骤取X支供试品(按你们的检量,我们的是安瓿瓶小容量,所以要加生理盐水)，加入适量0.9%无菌氯化钠溶液，混匀，各取(用几个滤筒就取几分之几)与1ml含菌量少于100CFU的的菌液(所有菌)混匀,按薄膜过滤法过滤至一次性使用全封闭集菌培养器内，再将硫乙醇酸盐流体培养基加至滤有金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、生孢梭菌培养器内,改良马丁培养基加至滤有白色念珠菌、黑曲霉的培养器内.另取一套全封闭集菌培养器，不加供试品，其他操作同上，作为阳性对照；再取一套全封闭集菌培养器，只过滤生理盐水、不加菌，加入培养基后作为阴性对照,含有生孢梭菌供试品阳性、阳性对照，阴性对照的硫乙醇酸盐液体培养基放置30-35℃，培养3天.装有金黄色葡萄球菌，枯草芽孢杆菌，铜绿假单胞菌、阴性对照、阳性对照的硫乙醇酸盐流体培养基放置20-25℃培养3天.所有改良马丁培养基置20-25℃培养5天.每天进行观察并记录结果。重复以上试验三次，并记录各次结果.(实验顺序:阴性-阳性对照/供试品+菌,先做阴性避免染菌,出现假阳性)3.标准:在三次的试验中，阳性对照应生长良好，阴性对照应不长菌；与阳性对照管比较，若供试品阳性各容器中的试验菌均与相应的阳性对照一样生长良好，则验证合格并可照此检查法和检查条件进行供试品的无菌检查。如含供试品阳性的任一容器中微生物生长微弱、缓慢或不生长，则供试品的该检验量有抑菌作用，验证不合格。验证不合格后应调整方法，重新验证。这是无菌方法好吧，有个疑问，你们用显微计数法能确定菌液浓度，开玩笑吧.死的岂不是也算进去了，验证过吗?
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药典确实是要求在最后一次冲洗液中加菌.我想不通，验证时应该模拟样品中的菌，在前面加才能证明冲洗过程不会对菌造成损坏才对啊
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minzhengli 药典确实是要求在最后一次冲洗液中加菌.我想不通，验证时应该模拟样品中的菌，在前面加才能证明冲洗过程不会对菌造成损坏才对啊我觉得happyleaf朋友说的对，中国药典验证的不是整个过程，而是前面的方法是否把抑菌成分去掉了，所以菌液最后加。minzhengli，同志，我觉得我们曾经是不是思路问题，我也曾经一直那么想的来着。
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侯亚亚 我觉得happyleaf朋友说的对，中国药典验证的不是整个过程，而是前面的方法是否把抑菌成分去掉了，所以菌液最后加。minzhengli，同志，我觉得我们曾经是不是思路问题，我也曾经一直那么想的来着。恩，肯定是有道理的
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侯亚亚 我觉得happyleaf朋友说的对，中国药典验证的不是整个过程，而是前面的方法是否把抑菌成分去掉了，所以菌液最后加。minzhengli，同志，我觉得我们曾经是不是思路问题，我也曾经一直那么想的来着。恍然大悟
所以无菌检查后用注射器加阳性对照是可以说的通的
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原理：负压抽滤适用对象：制药-疾控-食品饮料-化工、化妆品、电子行业等过滤处理样式：台式品牌：GEEVO吉沃型号：C6用途：微生物过滤性能：精密过滤、 高效过滤滤料类型：不锈钢/合金适用对象性质：弱腐蚀性、 腐蚀性、 低温物料、 高卫生要求物料有效过滤面积：12.5c处理能力：强,多用途产品类型：全新设备重量：3.5外形尺寸：宽 x 高： 105mm x 135mm适用范围：化工、 石油、 制药、 食品、 选矿、 水处理、 染料规格：另有单联, 二联, 三联供选择
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水中微生物膜过滤系统&&&&专门为微生物检测和颗粒分析而设计。滤膜支撑垫保证微生物或颗粒在滤膜表面均一分布。操作简单。滤器底座带有独立开关，可于根据需要打开或关闭，在抽滤过程中随时控制真空度。可配合不锈钢和PP滤杯使用.特点-滤头可独立拆卸，方便关键部位的灭菌-多滤头装置可同时或单独控制使用&-更大的过滤面积和更快的过滤速度-可使用47mm和50mm直径滤膜-滤头可用火焰快速灭菌-独特的取膜口，取膜方便快捷-过滤装置可整体采用湿热灭菌&技术参数PP滤杯体积：270ml滤杯刻度：50、100、150、200、250ml，&虚线与实线交替环形容积刻度标识滤膜尺寸：直径47mm&和&50mm&均可使用有效过滤面积：12.5&cm2宽&x&高：&105mm&x&135mm滤杯材质：PP和不锈钢过滤装置：316不锈钢滤头：可拆装，&与滤柱头螺纹式连接滤头配置选择：六头不锈钢滤杯规格：SS100(100ml),&SS250(300ml),&SS500(500ml)选配:&PP滤杯,&不锈钢滤杯(100ml,&300ml,&500ml),&不锈钢杯盖(300ml),&不锈钢杯夹具,&隔膜真空泵,&无菌滤膜,&火焰灭菌枪,&镊子,&镊子架,&抽滤瓶组件.&使用领域1．疾控：军团菌检验，公共场所用水、食品等微生物检测2．制药：制药用水、药品和原辅料的微生物限度检查、化学分析3．食品饮料：瓶装水、桶装水、啤酒、饮料和生产过程中用到的液体原料4．化工、化妆品、电子行业等微生物过滤检测5．质量监督检验6．水厂、城市排供水
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