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免疫组化从失败到成功
国外对免疫组化确实很重视，老外做的片子也确实很漂亮。我曾请教过一个小日本的，她专做IHC和IF，05年和其他人在NATURE发文章。她们用的PBS和固定液都是Sigma公司生产的，她们从来没有配制过。看过她们的操作，确实很细致也很规范，曾亲眼目睹她们进行心脏灌流的操作，用的器械很简单（固定液都是Sigma的），都是我给她们找的，可做起来，确实令我PF。
我大致说一下，我的体会：
1 这是一项熟练和细致的技术。做切片是做免疫组化的前提，当然有的是公司或医院做的。做出非常好的切片很难，它要求厚薄均匀、切片完整、无褶无刀痕等，这就要求我们的切片技术很熟练。所有操作都要求很细致，包括冲洗（是否充分、是否把片子冲掉了？）、擦片（是否把片子擦掉、片子是否干掉？）、加抗体（是否完全覆盖组织？）等。
2 抗原和抗体是否匹配，二抗的种属选择是否正确？一抗的稀释度和二抗的稀释度是否匹配，需要摸索，我认为这个很重要，其他都确保正确的前提下，肯定是没有摸索好最佳稀释度。对于是单抗好还是多抗好，你手里有什么就用什么，小日本用的也是多抗，人家做的也挺好的，不要在这上面找原因。
3抗原修复也很重要，LS的已经说了，不在多说。破膜，对于在胞浆和胞核里表达的，一定要破膜。对于封闭，一般选择与二抗同种属的正常动物血清，也用过BSA，也行，这个好象影响不大。
4 DAB显色时间、复染时间一定要控制好。
5 对照设置也很重要，不然做出来了也不知道自己做出来的是不是？
本实验心得来自丁香园论坛，
免疫组化的关键还是抗原的修复（修复液的种类及修复的方式），个人认为修复液还是柠檬酸修复比较好，不过也不是万能的，有的要用EDTA,修复方式现在高压修复应用比较广泛，方便且效果较好。一抗的浓度，孵育时间...
heibaolun：免疫组化的关键还是抗原的修复（修复液的种类及修复的方式），个人认为修复液还是柠檬酸修复比较好我也是这么认为，做免疫组化要注意很多细节问题，往往一个细节就决定片子的成功与否。我想跟大...
本人IHC染的肝脏和肝癌的片子比较多，肝细胞的蛋白分泌谱是非常广的，带来的直接后果就是IHC非特异性染色非常重，经我们的很长时间的反复摸索，现在的经验是防止干片，这点最重要了，从一抗加上之后就要有效的...
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乳腺癌，穿刺，免疫组化
问题：
状态：就诊后
门诊/住院患者报到
找赵戈大夫就诊的1***患者，成功报到医生诊断疾病：乳腺癌门诊或住院患者：门诊最近一次就诊时大夫给的处置方案：检查及事项：穿刺，免疫组化
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大夫郑重提醒：因不能面诊患者，无法全面了解病情，以上建议仅供参考，具体诊疗请一定到医院在医生指导下进行！
状态：就诊后
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状态：就诊后
状态：就诊后
赵医你好！今天第七天，第一次换药，
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疾病名称：乳腺癌&&
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疾病名称：乳腺癌&&
希望得到的帮助：还有治疗的可能性吗
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好大夫在线电话咨询服务→ 穿刺和免疫组化完了以后，病理诊断：（
穿刺和免疫组化完了以后，病理诊断：（
健康咨询描述：
穿刺和免疫组化完了以后，病理诊断:（耻骨联合前方）梭行细胞恶性肿瘤，肿瘤细胞局部呈上皮样，免疫组化染色显示:Bcl-2(-),Calretinin(个别细胞+），CD34(-),CD909(-),Ki-67（+50-75%），s-100(-),SMA(局灶+），CD117（个别细胞+），CK（弥漫+），CK5（-），Dog-1（-），B-catenin(局灶+），CD68（-），CK7（+），CK19(+),EMA(-),E-cadherin(-)考虑为:1,、原发性肿瘤————滑膜肉瘤；2、继发性肿瘤——转移性上皮源性肿瘤。普外科医生不给做手术说肿瘤太大建议化疗，然后看肿瘤内科医生也不给手术说建议放疗，减轻疼痛然后肿瘤小了再手术！是不能手术还是怎么着？哪位%
曾经的治疗情况和效果：
想得到怎样的帮助：哪里能够做手术
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帮助网友：3932称赞：61
&&&&&&病情分析：&&&&&&中年男性，病理检查如上所示。&&&&&&指导意见：&&&&&&您好，由于您的病情较重，所以内外科建议您先控制病情后再手术。
疾病百科| 恶性肿瘤（别名：癌症）
挂号科室：肿瘤科
温馨提示：不吃烟熏、火烤、烧焦、油炸的食物;不吃过期或可能受真菌毒素污染的食物
&& & 肿瘤分为良性肿瘤和恶性肿瘤，一般所说的癌即指恶性肿瘤而言。恶性肿瘤从组织学上分为上皮性的癌和非上皮性的肉瘤及血液癌。良性恶性的区别常根据临床的预后加以判定。两者...
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