近两年，国内EPO注射剂年产能力已超过500万支，随着生产工艺的不断改进和产品收率的提高，EPO已从10年前的贵族药沦为普通药。但随着我国社区和农村市场的扩容，EPO在仍有巨大的发展空间　　何为EPO　　EPO（益比奥）为英语erythropoietin的缩写语，中文为“促红细胞生成素”或“促红素”。据国外报道，早在1906年，西方生理学家就已发现人体内存在的EPO主要来源于肾脏（后来有人发现人的肝脏里也能合成少量EPO）。EPO属于“糖蛋白激素类”内源性生理物质，能直接促进红血细胞的生成，对人体来说是一种极其重要的生理物质。正常人体内一般不缺EPO，但如身患某些疾病并引起肾衰时，病人肾脏中EPO分泌量则急剧减少，从而出现贫血现象，故补充外源性EPO能挽救严重肾衰病人的生命。在20世纪80年代基因工程法合成EPO新工艺尚未发明之前，西方制药厂商主要从人尿或绵羊血里提取EPO。这样制取的EPO不仅质量不稳定，而且产量极低，故难以大规模推广应用。随着80年代“重组DNA技术（DNA杂合瘤培养法）”的成熟，包括干扰素、EPO、人胰岛素、人生长激素和形形色色的单克隆抗体等一大批生物工程药品陆续问世，从而开创了生物工程制药的黄金时代。　　1989年6月，美国FDA正式批准由安进生物工程公司研制的rhEPO（重组人促红细胞生成素）上市，主要适应症为治疗因慢性肾衰竭所引起的贫血症。据当时估计，全美国约有数百万人患有肾衰症。医学界随后发现，EPO不仅能治疗肾衰引起的贫血症，而且对其他一系列恶性疾病如晚期肿瘤引起的“恶病质贫血”和艾滋病引起的贫血及其它难治疾病所引起的贫血均有良好的生血效果。而且注射EPO可取代昂贵的输血法，不会引起血液传染疾病。有人认为，EPO的问世极大地推动了肾衰、肿瘤疾病、艾滋病等难治疾病的临床治疗工作。EPO的年销售额也从1990年的2亿美元，高速成长为2004年年销售额达119亿美元的世界第一大生物工程类药物，从而创造了一个医药史上的“神话”业绩。在过去5年里，国际医药市场EPO的年增长率平均达18%，这在世界畅销药物中也不多见。　　我们知道，EPO属于人体固有物质，不能申请专利（但其生产工艺可以申请专利保护），故目前世界各地有不少公司在生产EPO产品。过去几年来，全球EPO产销格局中，美国约占国际市场50%以上的份额，欧洲占22%，日本占8%，而包括中国在内的其他国家和地区合计只占不到20%。　　国产化推动临床　　EPO进入我国市场的时间并不比西方晚多少，大约在1992年即有少量EPO制剂进入我国，但均为美国公司的产品。由于当时国内医生尚未认识到EPO在治疗贫血症上的优势，加上进口EPO制剂（包括美国安进的Epogen、日本麒麟的“利血宝”和德国宝灵家的“生血素”等）价格极其昂贵，故国内市场销路不佳。至20世纪90年代末，全国每年销售的进口EPO制剂总金额始终保持在100万美元以下。在医院用药排名榜上，EPO通常处在70~80名之间，且使用区域主要集中在大城市的大型医院里，广大中小医院难见EPO的踪影。　　这一情况直到90年代末开始有所改观。以南京海军医学专科学校科研人员率先成功研制出国产高效EPO生产工艺为契机，全国各地陆续有多家科研单位先后研制成EPO，从而使EPO的国产化程度大大提高，并一举打破了长期以来外国制药厂商垄断我国促红素市场的局面。　　据了解，截至2007年，全国有20多家企业获准生产EPO制剂，其中销售金额在国内领先的有沈阳三生制药、上海麒麟鲲鹏生物药业、上海罗氏公司等10家企业。　　据悉，在近两年里，国内EPO注射剂年产能力已超过500万支，随着生产工艺的不断改进和产品收率的提高，EPO已从10年前的贵族药品沦为普通药品。有媒体报道，在2007年年末一场国内医院药品招标会上，我国西南地区一家著名大公司的EPO注射剂竟报出每支19元的超低价，使与会的众生产厂家瞠目结舌――正常的EPO报价应为每支50元左右才有一定的利润。同时，由于国内很多企业加入到EPO的生产行列，引起EPO终端销售价猛跌。据悉，包括安进和宝灵家等在内的一些过去直接向我国出口EPO制剂的厂商，因为难以承受中国厂家的低价竞争，只能黯然撤出中国市场，故目前中国EPO制剂市场基本上已被国内生产商所占领。　　新用途或将延续神话　　过去几年来，国外陆续报道了EPO一些令人感兴趣的新用途，如：　　――能促进损坏神经细胞的修复，故今后可望用于治疗包括帕金森氏病、阿尔茨海默病等退行性脑神经病变疾病。　　――能促进运动员增强耐力和提高运动成绩。早在20世纪90年代中，西方运动员就已发现：在比赛前几天注射EPO可增加体内红细胞数量，改善耐力和促进运动成绩提高，故使用EPO在当时的欧洲和美国已成为体育界公开的秘密。据估计，至少有数十万运动员私下注射过EPO，所以，国外有人认为，EPO在体育界的这一新用途也是促使该药品销路剧增的原因之一。因为全世界运动员总数至少有上千万人，只要有1/10的运动员注射EPO，这就是一个不小的数字。虽然国际奥委会已明令禁止运动员注射EPO，但谁能保证运动员平时不注射EPO？注射该药品有助于提高比赛成绩，且EPO在注入人体后其半衰期极短，普通仪器也难以测出运动员是否使用过EPO。　　――最新研究表明，EPO还能与体内EPO受体反应，从而诱发一系列保护性细胞反应，其中包括线粒体生成、新血管生成、抑制细胞凋亡和促进血管内皮细胞再生等。这一新发现将大大拓宽EPO的医疗用途。　　另外，美国厂商早在几年前就已开发出EPO“预充式注射器”，它是一种药械合一的方便型注射器，病人可在家里自行注射而省却上医院的麻烦，故可大大节约时间与费用。预充式注射器的发明将EPO销售额又大大推进了一步。　　值得注意的是，美国最早开发上市EPO的安进公司已开发出第二代EPO制剂“Aranesp”（即α-促红素），因其半衰期比第一代EPO延长2倍，故上市后受到医院和病人的欢迎，现在Aranesp的年销售额已达10亿美元以上，并超过第一代EPO的市场年增长率。由于Aranesp每周只需注射1次（或每隔一周注射1次），且该药品的性价比远高于Epogen，故有关方面估计，今后几年，国际市场上第二代促红素将取代第一代产品成为后起之秀。另外，美国厂商正在开发一只“拟促红素多肽”新产品――Hematide，该产品已进入Ⅱ期临床试验，预计一两年后有望上市。据介绍，Hematide是一种“聚乙二醇化促红素”，能大大延长促红素在体内的作用时间，从而可使更多的红血细胞生成。　　此外，新研制中的Hematide能抵御令医生头痛的病人长期注射促红素所引起的体内产生“促红素抗体”的现象发生，从而可更有效地治疗贫血症。　　由于促红素的关键生产工艺专利已在2004年到期，目前包括诺华等跨国制药公司在内的大公司和德国最大通用名药生产商Ratiopharm等均在积极开发第一代促红素制剂销往亚洲、非洲和拉丁美洲这些发展中国家市场，因为这些地区至今连第一代产品都尚未真正普及使用。由于这些大型跨国公司拥有强大的科研力量，故预计今后几年，国际市场上第一代促红素产品的竞争将更加残酷和激烈。　　相关　　我国EPO市场前景分析　　目前，我国慢性肾衰竭病人总数已超过500万，其中需要定期接受肾透析治疗的约有70万~80万。如按肾透析病人每3天使用1支EPO，则在理论上推算，我国医院每年至少需要消耗七八千万支EPO注射剂，但实际上，由于国内绝大多数病人收入并不高，难以承受自费使用EPO的压力（加上透析本身已很花钱），故不少病人放弃使用EPO来改善贫血状况的机会。有专家认为，EPO必须自费注射的规定是限制该药销路扩大的最大瓶颈。近悉，对此，已有包括京、津、沪等部分国内大中城市的社保局将EPO注射剂列入到医保药品报销范围内，这对生产商来说无疑是一大利好。国内专家普遍认为，厂家如能将EPO的出厂价降至每支30元人民币左右（随着产品收率的不断提高，相信这是应该做得到的），则今后全国EPO的总销量可比目前销量至少增加5~6倍（由于占我国人口80%的广大农村地区居民至今仍必须自费注射EPO，所以农村的用量大大低于城市，故该药品实际用量仅为理论用量的15%）。如果EPO的费用纳入医保报销，则毫无疑问，我国的EPO用量肯定会大大增加。据我国有关部门估计，全国医院EPO每年销售额大约在5.75亿~7亿元之间（测算数据）。　　由于国际国内EPO市场看好，国内多家企业均在加大EPO的产量。其中山西威奇达药业公司犹如一匹突然加速的“黑马”。据国内媒体报道，山西威奇达药业公司的EPO注射剂“宁红欣”去年全年产销量已达100万支，约占国内EPO市场的15%，但沈阳三生、上海麒麟鲲鹏药业和华北制药厂仍为国内EPO生产的三大主力军，这3家公司的年产销量约占国内EPO市场的75%左右。但从总体上看，我国的EPO市场与国外相比仍处于初级阶段。　　与国外轰轰烈烈的第二代促红素新药开发上市热潮相比，国内药企至今仍停留在第一代EPO产品上，且远未达到普及使用和市场饱和的程度。相信随着我国国民经济的迅猛发展和国民收入的不断提高，以及全民医保政策的实施，促红素类抗贫血药物在我国将拥有巨大的市场增长空间。
(责任编辑：江大红)
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　　　　促红细胞生成素（Erythropoiefin，EPO）原为人体内固有生理物质,为能够刺激红细胞生成(即红细胞的再生)的重组激素。在疾病治疗中，促红细胞生成素增加红细胞的生成，用于由慢性肾衰、多发性骨髓瘤.、骨髓异常增殖综合征和艾滋病引起的贫血。　　▲整体规模扩大　　目前，EPO是世界范围内临床疗效最显著、销售额最可观的一种生物技术产品。EPO最早由美国安进生物工程公司在上世纪90年代初开发上市。该品1989首次引入临床后迅速被广大患者所接受。EPO与干扰素（α与β型）.、人胰岛素、人生长激素等合称为美国生物工程药品中的“四大金刚”。近年来，促红素（EPO）已上升为世界头号畅销生物工程药品。估计该药我国的年市场容量为20亿~30亿元，但目前年销售额还停留在5亿元左右。　　全国医药经济信息网的统计数据显示，2006年3季度~2007年2季度血液系统药物销售中，以血浆代用品和输注液购药金额最高，占据该大类65.40%的医院市场份额。抗贫血制剂的购药金额较低，但已经从2004年的最后一位上升到了第二位，市场份额为7.30%，且增长速度较快，仅次于抗血栓形成药，以19.59%的增长率排序在第二位。　　图1：2006年3季度~2007年2季度血液系统药物亚类购药金额气泡图　　EPO是抗贫血制剂中的重点品种，2007年上半年，其购药金额约占抗贫血制剂购药金额26.33%的份额，医院购药金额达到5116万元。EPO在临床上的广泛应用主要得益于两方面：一是EPO可代替常规输血法用于肾衰竭（肾透析）病人或化疗病人的贫血治疗，促进其体内新红细胞生成，从而可大大节省昂贵的输血费用。二是重组人红细胞生成素作为治疗肾性贫血治疗药时，已经进入医保目录报销范围，患者的负担得以减轻，这推动了该药的临床应用。　　图2：2007年上半年抗贫血药小类购药金额份额　　2004年~2007年2季度，信息入网样本医院购入EPO的购药金额和数量一直呈上升状态。2006年3季度~2007年2季度，EPO医院购药金额较上一滚动年增加11.09%，销售数量增长16.04%。2004年~2007年2季度，购药数量增长速度快于购药金额增长速度，说明近三年多来EPO价格在逐渐下降。　　图3：2004年~2007年2季度样本医院购入促红细胞生成素金额、数量　　目前，医药市场销售的EPO主要包括溶液剂和粉针剂两种剂型，其中溶液剂购药金额要远远高于粉针剂购药金额。2004年~2007年2季度，两者购药金额比例虽然仍维持在8∶2左右，但粉针剂的市场在逐渐扩大。2006年，粉针剂销售金额份额仍处于劣势，但已从%的份额上升到22.47%的份额。　　图4：2004年~2007年2季度促红细胞生成素剂型销售情况　　▲企业竞争激烈　　国内已有20多多家单位获准生产红细胞生成素。沈阳三生和上海麒麟鲲鹏（中国）生物药业股份有限公司的产品在国内医院市场销售额位居前两位。　　表1：2006年3季度~2007年2季度购药金额排序前10位企业　　沈阳三生制药股份有限公司是一家以生物制品为主的医药企业，自1998年成立以来一直以低价策略抢占EPO市场。2006年3季度~2007年2季度，其生产的“奥比益”在样本医院的购药金额持续增加，约占入网医院购入EPO总金额的37.75%。2007年上半年，“奥比益”的样本医院购药金额已超过2400万元。沈阳三生生产的EPO包括溶液剂和粉针剂两种剂型的多种规格，0.01MIU/ML为其主力品种，近年来该规格的“奥比益”占据沈阳三生EPO全部销售金额的80%左右。　　上海麒麟鲲鹏（中国）生物药业股份有限公司于1997年成立，由日本麒麟啤酒株式会社和上海鲲鹏投资发展有限公司共同投资组建，今年来其生产的“利血宝”的入网医院销售金额一直紧随沈阳三生的“奥比益”，排在第二位。“利血宝”只有注射剂，包括多种规格，其中ML和3000IU1ML为其主力品种，2006年3季度~2007年2季度这两种规格销售金额占据“利血宝”总销售金额83.86%的份额。　　在中国EPO上市早期，销售占主导地位的厂家为美国安进公司和日本东凌公司，该领域的主要利润被规模化生产的外资企业所获取。经过几年的发展，目前国产EPO虽成功地占据市场主导地位，但由于产品技术不具备垄断性，生产厂家众多，价格竞争激烈。在北京市政府主办的一次药品招标采购会上，成都某知名制药企业为争取入选，竟拍出令业界哗然的低价――19元/支。在这种情况下，企业难以依靠技术垄断市场，以高利润来促进其自身的发展壮大。　　▲新产品势头强劲　　目前，国外药厂暂时退出我国EPO市场激烈的竞争，但这并不意味着国内药厂获得胜利。随着基因工程药物的发展，安进公司于2001年6月推出第二代重组促红细胞生成素类药物阿法贝泊汀（Darbepoetin Alfa），该品在美国和欧洲的商品名分别为Aranesp和Nespo。其结构与EPO的重要差异在于它带有两个含烃链唾液酸，故无论是静脉注射，还是皮下注射，其半衰期都延长了2倍，这有利于简化给药方案，临床上可每2周~3周用药1次。上市第二年，阿法贝泊汀的全球销售额已达4.16亿美元，逐渐成为第一代EPO的换代产品，这势必瓜分促红细胞生成素的现有市场，对国内制药企业造成威胁。
中国药学会科技开发中心
日期：日 - 来自[]栏目&&&&&&&&在美国纳斯达克上市的我国生物制药企业三生药业（Nasdaq:&&SSRX）于日公布了第二财政季度季报，销售总额较去年同期增长49.2%达到570万美元。
&&&&&&&&最畅销药为重组人促红细胞生成素益比奥Epiao，占我国重组促红素EPO市场的37%。全球最大的生物制药企业安进（Nasdaq:&&AMGN）的同类产品由日本麒麟公司在华销售，商品名为Espo占有15%的市场份额；瑞士制药巨人罗氏Roche较小的EPO片断（在我国的商品名为Recormon）占有10%的份额。三生药业的EPO产品能够超越国际大型制药商的主要策略是价格，即使现在价格仅是麒麟和罗氏的三分之一，仍然有90%的利润空间。益比奥占三生药业销售额的70%，每年销售增长为30%。从1999年以来，益比奥已售出700万支。公司认为益比奥仍有很大的市场潜力，因为70%的化疗癌症患者罹患贫血，但是使用促红素的患者仅为2%。现在益比奥Epiao在我国800家大型医院销售，今年底可能增至921家。三生瞄准了我国超过100张床位以上的医院共约4000家。第二大药为特比奥Tpiao（重组人血小板生成刺激因子）于2006年在我国上市，销售较去年同季增长263%达到130万美元。目前，我国还没有同类产品，所以特比奥Tpiao也没有受到任何价格竞争压力。三生药业的高管娄静（音译）说：我们可以确定任何我们认为合适的价格。
&&&&&&&&公司的研发线除新一代的益比奥和特比奥之外，还有HPV疫苗共6个新药候选者。2011年三生的益比奥Epiao将进入欧洲市场。10月26日三生药业（Nasdaq:&&SSRX）的收盘价为16.02美元/股，市值为3.48亿美元，股价峰值为21.37美元/股。日期：日 - 来自[]栏目　　诺华的山德士在8月31日宣布，强生的Epoietin仿制药产品已得到欧洲委员会的批准。考虑到今年6月，该产品已经获得正面的回音和推荐，这一消息本为预料中事，并非大惊喜。事实上，早在去年，山德士已有一个生物技术仿制产品生长激素omnitrop上市，它是首个获得欧洲批准的生物仿制药。
　　然而，我们不得不承认，Epoietin仿制药产品的确是个大突破。因为它的仿制对象正是造就安进的重磅炸弹药物，全球销售额高达70亿美元的贫血治疗药物。EPO（促红血细胞生长因子）在许多医院的药物名录中是最昂贵的药物，它占据了付款人很大一部分开支，其原因之一就是没有仿制药竞争，价格居高不下。所有生物仿制药公司早就盯上了它，这已是目前为止最贵的生物技术重磅炸弹药。
　　山德士只是少数有资源和恒心追求生物仿制药事业的公司，许多规模较小的公司因为惧怕繁重的临床试验和监管要求而中途退出。
　　生物仿制药的产业化和市场推广并不像扣篮那么潇洒而轻松，即使有20%的价格折扣也未必能保证仿制药可以像化学仿制药那样长驱直入。化学小分子仿制药光凭价格就可以打入市场，且有FDA的免费广告、公开力挺等促销活动。生物仿制药在上市初期是得不到如此优厚待遇的。&&
　　在生物仿制药的成长过程中，各个国家有权决定是否由医生用生物仿制药代替原创药，而原研药厂商也必定会游说各界人士，让人们相信仿制药的等效互换是无法保证和确定的。
　　人们对于生物仿制药质量和安全性的担心，意味着生物仿制药公司将要走一条艰苦的市场营销和医患教育之路。据了解，山德士的EPO将以3种不同的品牌身份出现，主要是为了在整个欧洲市场得到各国承认，并利用当地可信赖的品牌。
　　另一家生物仿制公司Stada虽然也生存了下来，但在去年11月，它决定把EPO仿制药的商品化交付给美国雅培下属专门经销医院药品和注射制剂的Hospira公司，这么做的原因可能还是出于规避财务风险的考虑。该公司的EPO仿制药的批准目前还是乐观地定在今年年底，或是明年的某个时间。
　　去年，Mayne医药制药终止了与克罗地亚药厂的市场营销协议（该药厂现已成为Barr制药的一部分），原因是该公司生产的EPO产品已于2005年在克罗地亚批准上市，但一直没有得到过欧盟监管机构的认可。
　　这些EPO仿制药的批准上市，短期内并不会对强生构成太大威胁，其对安进的负面影响则更小，它销售的是EPO-alfa。但不管怎么说，销售EPO的生物仿制药至少象征了EPO垄断期的结束。
　　山德士生物制药部负责人侯赛因告诉媒体，一旦生物仿制药得以起飞并稳步发展，必将是一个很有前途的行业，目前山德士的EPO产品已得到批准，距离最终上市指日可待，这是生物仿制药产业很重要的里程碑，因为它是仿制最热销的生物技术药物。
　　据了解，欧洲市场的EPO相当热闹而拥挤，美国上市公司Shire已经得到了EPO延伸产品Dynepo的批准，罗氏的Micera临床试验结果良好，现在又加上诺华的EPO仿制药上市，将形成“三国鼎立”的竞争局面。日期：日 - 来自[]栏目
&&&&&&&&日，美国FDA的一个专家委员会通过投票否决了对重组人促红细胞生成素EPO处方加以限制的提议，关于EPO安全性的争论终于画上了句号。今年初，有几个临床研究说明促红细胞生成素在用于非化疗癌症患者时导致肿瘤生长加速和患者死亡率增高。EPO造成癌症患者死亡高风险的事实使其安全性受到全面质疑，很多主要的健康保险商从报销药品名单中撤销了EPO，社会各阶层对此事高度关注。实际上，EPO的适应症只是肾衰到治贫血的纠正和化疗癌症患者贫血的治疗。但是在美国，允许医生开具非适应症处方。美国FDA为此专门召开了专家委员会，结果排除了对批准适应症安全的怀疑。但这一决定仅适用于批准的适应症。安进公司（Nasdaq:&&AMGN）和强生（NYSE:&&JNJ）是生产销售重组人促红细胞生成素的主要公司，尤其是安进的最畅销药Epogen和Aranesp均为促红素，也均为“重磅炸弹”。
&&&&&&&&FDA委员会的决定对安进公司的股价影响很大，9月12日的收盘价上升了1.76美元或3.27%为55.64美元/股。同日的美国股票交易药物指数（DRG）基本没有变动，收盘于339.37点，生物技术指数（BTK）略有下降收于808.67点。日期：日 - 来自[]栏目&&&&&&&&日，瑞士大型制药企业诺华（NYSE:&&NVS）宣布将于下周在英国和德国上市重组促红细胞生成素EPOα的仿制药版本。这是继2006年欧洲批准生物仿制药（biosimilar）以来上市的第三个药，前两个是人生长激素，其中Omnitrope也是诺华生产的。诺华版的EPOα的商品名为Hexal。
&&&&&&&&EPOα是全球最大的生物技术制药公司安进（Nasdaq:&&AMGN）的最畅销药，虽然已失去专利保护，全球销售额仍能达到25亿美元/年。诺华版的EPO比品牌药的价格低25-30%，将对安进的EPOα销售霸主地位形成有力挑战。同时对同类药物的生产商Roche（产品为&&Epoβ）和Shire&&（Epoδ）形成竞争。&&
&&&&&&&&诺华公司以某种方式说明了生物仿制药的安全性和有效性，但没有像专利新药那样实施严格和完整的临床研究。安进公司警告说生物仿制药很难达到品牌药的效果，从这一点上说明生物仿制药的复杂性。由于在欧洲上市生物仿制药不需要进行复杂的临床研究，所以开发费用相对较低。诺华开发Omnitrope花费了1亿美元，因为是第一个生物仿制药的缘故。而开发EPO的经费只是几千万美元。美国还没有对生物仿制药进行立法，据说FDA也没有相应的指南。生物仿制药是否需要进行完整的临床研究在美国是立法辩论的焦点。
&&&&&&&&生物仿制药的时代终于到来了。可以预计，美国参众两院将冲破一切阻力加速生物仿制药的立法。否则，市场将逐渐被欧洲人占领。日期：日 - 来自[]栏目&&& 美国生物技术巨头――安进公司的促红细胞生成素刺激剂遭受了一连串的挫折，然而略感欣慰的是，波士顿的美国联邦地区法院判决罗氏的贫血病药Mircera侵犯了安进EPO的专利权。
&&& 法院判决，罗氏的Mircera（持续促红细胞生成素受体激活剂）将侵犯安进的EPO（促红细胞生成素）的医药合成专利权，并在受到提讼的专利案件中，做出有利于安进的即决判决。
&&& 此案将于9月4日开庭审理。安进表示依然认为其专利是合法的，而罗氏的peg-EPO（聚乙二醇化促红细胞生长素)将侵犯重组促红细胞生成素及其产品的专利，并补充说，与安进的ESAs，Aranesp (darbepoetin alfa) 及 Epogen (epoetin alfa)相比，Mircera“不具备临床和医疗方面的优势”。
&&& 由于Aranesp的销售额减少而遭受损失，安进宣布裁员14%，但由于改变标签、ESAs的安全问题以及美国补贴政策的变动，情况并未好转。因此，阻止新竞争者进入市场，就帮了安进的大忙。
&&& 不过，此次胜诉并没能阻止罗氏。尽管5月份美国食品药品管理局（FDA）拒绝Mircera在美国上市，只发布了可批准函，但是上个月，欧洲委员会却批准Mircera治疗慢性肾病。
&&& 罗氏就专利战发表声明说，“罗氏坚信安进的专利不合法，因此并无侵权一说。虽然我们不同意，但判决没有确定安进专利的根本合法性。”（中国医药123网）
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　　Effect of allograft kidney tissue mass implantation on EPO of rats with chronic renal failure
　　Liu Rongyao1, Wang Dongwen2
　　(1. Department of Urology, the Peoples Hospital of Lüliang, Lüliang 03300; 2. Department of Urology, First Hospital of Shanxi Medical University, Taiyuan 030001, China)
　　ABSTRACT: Objective& To study the effect of kidney tissue mass implantation into the capsule of rat kidney on EPO of rats with chronic renal failure. Methods& After the models of chronic renal failue (CRF) induced by adriamyucin were set up in Wistar rats, the kidney tissue mass (1mm3) of newborn Wistar rats were located under the capsule of kidney of the models. During the process of treatment, EPO level in the serum was tested by EPO ELISA kit. Renal pathological changes were observed, and the expression of EPO in transplantation tissue was examined by Immunohistochemical method. Results& ① The levels of EPO (1.160±0.324mU/mL) in the control group were lower than those of the other groups, with the difference being significant (P&0.05). ② The grafts survived and increased in size from 1mm3 to 4mm3 in 60 days, around which there were plenty of newborn blood vessels. Histological examination showed that the grafts had normal structure of glomerule and uriniferous tubules. ③ Immunohistochemical study demonstrated EPO positive grains were located in the region of uriniferous tubules and there were more positive grains in renal tissue of the graft than in that of CRF (P&0.05). Conclusion& Allograft transplantation of kidney tissue mass can ameliorate renal anemia caused by chronic renal failure and might be a new therapeutic means to treat CRFinduced anemia.
　　KEY WORDS: renal ti c anemia capsule of kidney
　　摘要：目的& 研究鼠婴肾组织移植于肾包膜下对促红细胞生成素的调节作用，为临床应用治疗肾性贫血提供理论依据。方法& 以Wistar雄性大鼠建立慢性肾功能衰竭动物模型为受体，将鼠婴肾组织块多点植入受体肾包膜下。治疗期间用EPO酶联免疫(ELISA)试剂盒测定血清EPO水平；观察肾组织病理改变,用免疫组化方法检测EPO在移植物中的表达。结果& ①60d时D组血清促红细胞生成素(1.768±0.140)mu/mL高于B组(1.160±0.324)mu/mL(P&0.01)，与C组(2.329±0.125)mu/mL也有差异 (P&0.05)。②移植后60d，移植物的体积由1mm3增至3-4mm3大小，表面血管网丰富，光镜下见肾小球、肾小管结构正常；③移植物EPO免疫组化，发现移植物EPO着色颗粒主要分布于肾皮质的肾小管，明显多于病例对照组大鼠肾组织(P&0.05)。结论& 通过对移植物的形态观察和功能测定，证明肾组织移植是一种有效的治疗手段，有可能为慢性肾性贫血提供一种新的途径。
　　关键词：肾组织移植；慢性肾功能衰竭；促红细胞生成素；肾包膜
　　慢性肾衰所引起的贫血(肾性贫血)常常难以改善。其临床重要性越来越受到人们的关注。其主要原因为促红细胞生成素(EPO)分泌不足。目前应用EPO存在价格高、副作用等问题，因此肾性贫血的治疗日益引起人们的重视。此研究采用同种鼠婴肾组织为供体，慢性肾衰雄性大鼠为受体，进行同种肾组织移植的实验。现报告如下。
　　1& 材料与方法
　　1.1& 实验动物& Wistar健康雄性大白鼠，体重(200±20)g，共80只，Wistar鼠婴20只，出生3-4d，雌雄不分，供移植用(由山西医科大学实验动物中心提供，按清洁级标准饲养)。
　　1.2& 主要试剂& 重组人类促红细胞生成素(2000u/mL，山东阿华医药公司，批号99435；大鼠用量按文献方法折算)。EPO免疫组化试剂(天津TBD生物工程有限责任公司)。F12培养基(Sigma公司)。肌酐和尿素氮试剂盒(北京化康泰公司)。
　　1.3& 主要仪器& LD42A台式离心机(北京医用离心机厂)、KJB快速旋涡混匀器(江苏省姜堰市健康医疗器具有限公司)、DK(cu600)电热恒温水温箱(上海医用恒温设备厂)、ELX800酶标仪(美国BIOTEK公司)、UV760紫外可见分光光度仪(上海分析仪器总厂)、OLYMPUS图象分析仪(上海分析仪器总厂)。
　　1.4& 实验动物分组与给药& A组：正常对照组(n=20)。B组：病例对照组(n=20)。C组：rHuEPO治疗组30u/kg，腹腔注射，1周3次，连续6周(n=20)。D组：肾组织移植治疗组(n=20)。
　　1.5& 动物模型制备& 经鼠尾静脉注射盐酸阿霉素6.5mg/kg，三周后行右肾切除，制成稳定的慢性肾功能衰竭大鼠(CRF)模型。
　　1.6& 移植方法& 用引颈法处死鼠婴，然后把整个小鼠浸入盛有75%(体积分数)酒精的烧杯中；2-3s后取出拭去酒精放入碟皿中，继之在动物腹部用尖刀纵行切开皮肤取婴肾；置入盛有Hanks液的消毒青霉素小瓶中，反复剪切组织至1mm3大小为止(成糊状)；静置使组织下沉，弃上清液，加入37℃的F12培养基待用\[1\]。受鼠用10%(体积分数)水合氯醛4mL/kg体重麻醉后，俯卧并将四肢固定，剪去背部毛发；手术野消毒后切开皮肤、肌肉至显露肾脏，于左侧肾脏腹面横形切口长约3mm；之后用睫状体分离器分离肾包膜使之成囊袋，取10-15块肾组织置于左肾包膜下，小块相互距离为0.5cm，之后用尼龙线缝合包膜，逐层缝合切口。移植后不用免疫抑制剂\[13\]。
　　1.7& 标本采集& 分别于实验0、15、30、45、60d经大鼠内眦静脉采血做指标检测，60d时处死动物摘除肾脏，观察大体外观，沿肾门纵切，置10g/L甲醛固定，送病检。
　　1.8& 观察指标& 血清EPO的测定： 分别于实验0、15、30、45、60d经大鼠内眦静脉采血，采用ELISA法直接测定。
　　1.9& 统计学处理& 采用 SPSS 11.5统计软件，实验的结果采用(±s)表示，各实验组与对照组均数间比较采用混合模型重复测量资料的方差分析。　　　　2& 结&&& 果
　　2.1& 血清BUN Scr测定结果& 表1显示实验前病例组、rHuEPO组、肾组织移植组已出现较明显的肾功能减退，与正常组两两比较有显著性差异(P&0.05)，而病例组、rHuEPO组、肾组织移植组两两比较无显著性差异(P&0.05)。
　　表1& A、B、C、D组血清BUN Scr的含量(略)
　　2.2& 血清EPO变化& 见表2。实验0d B、C和D组EPO水平稍高于正常组，但尚无统计学意义(P&0.05)。30d C和D组的EPO水平比B组显著升高(P&0.01)，随着病程迁延，45和60d C和D组的EPO水平仍高于B组(P&0.05)，但C和D组EPO水平较30d下降(P&0.05)，实验60d C组EPO水平高于D组(P&0.05)。
　　表2& A、B、C、D组血清EPO含量(略)
　　2.3& 肾组织EPO免疫组化结果观察& 见表3。EPO抗原阳性反应为位于移植物、肾组织的肾小管细胞胞浆内的棕黄色均匀细颗粒，正常组内表达呈强阳性；对照组呈弱阳性或不表达，在移植物中呈强阳性。&&&&
　　表3& EPO半定量分析比较　略
　　3& 讨&&& 论
　　经鼠尾静脉注射盐酸阿霉素6.5mg/kg，三周后行右肾切除，移植前测血清BUN显著升高，即造成典型的肾功能衰竭动物模型\[1\]。动物死亡或术后60d处死取肾脏，进行组织病检。HE染色可见局灶性节段性肾小球硬化，肾小管透明管型说明慢性肾功能衰竭模型成功建立\[23\]。实验结果显示30d和60d C和D组EPO水平高于B组。60d C和D组的血清EPO水平低于30d血清EPO水平，也就是在30d达最高值，说明在移植治疗前血红蛋白比较低，通过反馈性调节促进移植组织分泌较多的EPO所致。随着贫血的改善，组织供氧的增加及细胞对氧的适应，产生EPO细胞的数量将发生逆转相应减少\[4\]。D组低于同期C组血清EPO水平，即肾组织移植治疗组大鼠血清EPO水平增高，没有rHuEPO治疗血清EPO水平高，说明肾组织移植治疗是一个持续的给药系统，可能并不需要达到应用重组EPO治疗时的血清EPO水平。这也正是肾组织移植治疗的特点。肾包膜下作为体内的“免疫特许区”或免疫弱反应部位能明显减轻移植物的排斥反应并延长其存活时间。其优点表现在：①肾组织作为供体容易得到、免疫原性降低、培养后可生长、增殖。②肾包膜移植透明性便于观察及标本采取、不干预肾脏的结构和功能、血运丰富容易存活、操作简单。与 rHuEPO疗法相比，同种肾组织移植具有操作简单，可多次进行，价格低以及移植物所分泌的EPO为天然型等优点\[56\]。如选择大动物可借鉴成熟的临床腹腔镜技术较容易地将移植物移植于肾包膜下。综上所述，鼠婴肾组织移植于同种成年鼠的肾包膜下，是一种有效的治疗手段，有可能为慢性肾性贫血提供一种新的途径。
　　参考文献：
　　\[1\]Marc R. Transplantation of embryonic kidneys \[J\]. Clinical Science, 9612.
　　\[2\]Rogers SA, Talcott M, Hammerman MR. Transplantation of pig metanephroi \[J\]. ASAIO J, ):4852.
　　\[3\]Rogers SA, Hammerman MR. (2001) Transplantation of metanephroi after preservation in vitro \[J\]. Am J Physiol, 281, R661R665.
　　\[4\]赵竹玲，白云安. 应用促红细胞对慢性肾功能衰竭长期血液透析患者的疗效观察 \[J\]. 潍坊医学院学报, ):319332.
　　\[5\]詹炳炎，章 重. 同种肾组织移植治疗慢性肾功能衰竭性贫血的实验研究 \[J\]. 中华器官移植杂志,):207209.
　　\[6\]王 强,孙淑清.大鼠肾组织包膜下与皮下种植治疗肾性贫血的实验研究 \[J\]. 山西医科大学学报, ):204205.
　　作者简介：刘荣耀(1974)，男(汉族)，硕士，主治医师.Email: &&&
　　1.吕梁市人民医院泌尿外科，山西吕梁& 033000；
　　2. 山西医科大学第一医院泌尿外科，山西太原& 030001
　　(编辑& 钱春梅)
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