致畸六项三项1gm定量十b19什么意思

怀孕5周多,致畸五联检查结果有一项“人类微小病毒B19”呈弱阳性,其余阴性,想问这个病毒严重么?_百度宝宝知道孕妇感染细小病毒B-19-1gM,对胎儿有什么影响吗?_百度宝宝知道灰色模型GM(1,1)与GM(2,1)的改进和探讨--《福建农业大学学报》1999年02期
灰色模型GM(1,1)与GM(2,1)的改进和探讨
【摘要】:修正了 G M (2,1)灰色模型.利用 Z 变换给出 G M (1,1)、 G M (2,1)的时间响应序列,改进了灰色预测模型,同时证明该时间响应序列具有自回归性.
【作者单位】:
【关键词】:
【分类号】:N94【正文快照】:
自“灰色系统”问世以来,灰色系统理论已被人们广泛地应用于农业、经济、生态等各方面.特别是GM(n,1)模型.但也常出现模拟失败的情况.如对于GM(1,1)模型,当参数-a(a<0)较大或进行中长期预测时,模拟误差较大.GM(n,1)模型是应用累加生成序
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硕士学位论文
AAN吸附肉鸭日粮中黄曲霉毒素(B)效果的研究
姓名:齐莉莉
申请学位级别:硕士
专业:动物营养与饲料科学
指导教师:许梓荣;汪以真
Acknowledgement
本论文的设计、实施和撰写是在导师许梓荣教授的悉心指导和全
面关怀下完成的。导师许先生严谨的治学态度、实事求是的科研作
风,给我留下了深刻的印象,并将受益终生。三年来,导师对我的
培养倾注了大量的心血,在生活上、学习上和科研工作上给了我无
微不至的关怀和教诲,弟子永志不忘,谨此对导师表示衷心的感谢
并献上诚挚的敬意!
对动物科学学院缪云根老师给予的大力支持和帮助表示诚挚的
感谢王友明、胡彩虹、夏枚生、施俊轶、孙建义、胥保华、占
秀安、李卫芬、汪以真、钱利纯、刘波静等全体老师在三年学习期
间及本试验中的关心和帮助!感谢李奎、黄海青、亓立峰、王静华、
李红君、顾赛红、韩菲菲、宋保强、孙海香、顾赛红等同学的大力
指导与帮助,在此一并致以衷心感谢!
最后谨向参加本论文评阅和答辩的专家致以诚挚的谢意!
2002年5月于浙江大学
—— 塑兰堂竺丝苎
AAN吸附肉鸭日粮中黄曲霉毒素(B。)效果的研究
(Abstraet)
本课题以商品代樱桃谷肉鸭为对象,首次研究了AAN对玉米一大米
型日粮中黄曲霉毒素B。的吸附效果,并与膨润土的吸附效果进行比较。
~弋试验分前期(0--3wk)和后期(4--6wk)两个阶段进行,150羽公
母比例相等的樱桃谷肉鸭(始重55.7±4.269)按试验要求随机分成5组,
每组3个重复,每个重复10羽,公母各半,进行为期42天的饲养试验。
对照组饲喂基础日粮(采用养殖场实际生产中所用原料,后经测定黄曲霉
毒素B1含量:前期为21.2lgg/kg,后期为16.4899/kg):4个试验组日粮
中的大米均用发酵大米替代,黄曲霉毒素Bl含量前期为41.6999/kg,后
期为40.71pg/kg。此外,试验2组添加0.5%膨润土,试验3组添加0.5
%AAN,试验4组添加O.25%AAN。肉鸭饲养采用地面平养,试验期间
自由采食、饮水,每日更换垫料,光照、温度、湿度等按常规饲养管理进
行。饲养试验结束前一周,以Cr203为外源指示剂进行消化试验。饲养试
验结束后,每组各选体重相近的肉鸭18羽(每个重复6羽,公母各半),
共90羽,按常规方法进行屠宰和胴体分割,测定胴体组成和内脏器官重
量。收集血清测定尿酸、葡萄糖、白蛋白、总蛋白、淀粉酶、谷草转氨酶、
谷丙转氨酶、碱性磷酸酶、胆固醇、甘油三酯和黄曲霉毒素Bl浓度:取
十二指肠内容物测定消化酶活性;取肝脏、肾脏、胸肌测定黄曲霉毒素
饲养试验结果表明:日粮中添加O.5%AAN使日增重分别比对照组、
试验l组、试验2组和试验4组提高3.07%(P>0.05)、32.72%(P<0.05)、
25.5l%(P0.05);添加O.25%AAN使日增重分别比试验
1组和试验2组提高24.47%(P<0.05)和17.20%(P0.05)。
i屠宰试验结果表明:(1)AAN对屠宰率、半净膛率、腿肌率均无明
碗士学位硷文
显影响。(2)添加O.5%AAN组的全净膛率分别比对照组、试验1组、试
验2组和试验4组高1.14%(P>0.05)、3.69%(P<O.01)、2.01%(P<0.011
和1.55%(P<0.05);对照组略低,分别比试验1组、试验2组和试验4组
高2.55%(P0.05)、0.45%(P>0.05);试验1组最低,
均极显著低于其它组。(3)添加0.5%AAN使胸肌率分别比对照组、试验
1组、试验2组和试验4组提高16.77%(P<O.01)、41.90%(P<O.01)、54.24
%(P<0.01)和12.20%(P<O.05),试验l组和试验2组胸肌率最低,均显著
低于其它组。(4)腹脂率以对照组为最高,分别比试验l组、试验2组、
试验3组和试验4组高45%(P<0.01)、37%(P0.05)、
41.5%(P<0.01):试验3组分别比试验1组、试验2组和试验4组高26.7
%(P0.05)、23.6%(P<0.05)。
内脏器官测定结果表明:(1)试验1组肝脏率最高,分别比对照组、
试验2组、试验3组和试验4组高26.6%(P0.05)、24.1%
(P<0.01)、21.7%(P<0.01):试验2组次之,分别比对照组、试验3组
和试验4组高20.5%(P<0。01)、18.1%(P<0.01)、15.7%(P<0.01),其
它各组间差异不显著。(2)肾脏率仍以试验1组为最高,分别比对照组、
试验2组、试验3组和试验4组高21.9%(P0.05)、17.1
%(P0.05),其它各组间均无显著性差异。(3)试验1
组的胰脏率也最高,分别比对照组、试验2组、试验3组和试验4组高
51.4%(P<0.01)、14.3%(P<0.05)、30.2%(P<0.01)、24.4%(P<0.01):
试验2组的胰脏率次之,分别比对照组、试验3组和试验4组高32.4%
(P0.05)、8.9%(P>0.05)。(4)试验1组的心脏、肝
脏、肾脏等器官可见质地脆、出血点、坏死灶等明显病变。吖
消化试验表明:试验1组粗蛋白的消化率最低,分别比对照组、试验2
组、试验3组和试验4组降低9.53%(P0.05)、15.66%
(P0.05)。各组粗脂肪、粗灰分、钙、磷等营养物质的
消化率无显著差异,但添加0.5%AAN使粗蛋白、粗脂肪、钙等营养成分
的消化率均比其它组呈升高趋势;试验l组各种营养成分的消化率均比其
它各组有下降趋势。
舰士学位论文
十二指肠消化酶活性测定结果表明:(1)各组总蛋白酶活性无显著
差异。(2)添加0.5%AAN使糜蛋白酶活性分别比对照组、试验1组和试
验2组低28.25%(P<O.01)、25.48%(P<O.01)、31.80%(P<O.01):添
加0.25%AAN使糜蛋白酶活性分别比对照组、试验1组和试验2组低24.16
%(P<O.01)、21.24%(P<O.05)、27.92%(P<O.01);其它各组间无显著
差异。(3)添加O.5%AAN使胰蛋白酶活性分别比对照组、试验l组和试
验2组低27.32%(P<O.05)、25.83%(P<O.05)、24.08%(P<O.05);添
加0.25%AAN使胰蛋白酶活性分别比对照组、试验1组和试验2组低27.57
%(P<O.01)、26.09%(P<O.05)、24.38%(PO.05)、28.89%(PO.05):试
验4组则分别比对照组、试验1组和试验2组降低10.22%(P>O.05)、18.09
%(PO.05);其它各组间无显著差异。
/血清生化指标测定结果表明:(1)试验1组血清中谷草转氨酶水平分
L/1删照组、试验3组和试验4组高13.45%(P<O.05)、16.66%(PO.05);试验2组谷草转氨酶水平则分别比对照组、试验3组、
试验4组高16.2l%(P<O.05)、16.66.%(P<O.05)、13.76%(P<O.05):
试验1组和试验2组间无显著差异,添加O.5%、O.25%AAN与对照组的
谷草转氨酶水平差异不显著。(2)试验1组谷丙转氨酶的水平分别比对照
组、试验2组、试验3组和试验4组高43.52%(P<O.01)、19.07%(P<O.05)、
32.37%(P<O.01)和45.76%(P<O.01);而试验2组谷丙转氨酶水平也分
别比对照组、试验3组和试验4组高20.53%(PO.05)、
22.4l%(P<O.05);添加O.5%、O.25%AAN与对照组间的谷丙转氨酶水
平差异不显著。(3)各组碱性磷酸酶的水平差异不显著。(4)试验1组淀粉
酶的水平分别比对照组、试验2组、试验3组和试验4组高21.94%
(P<O.05)、9.52%(PO.05)、10.23%(P<O.05):对
照组淀粉酶水平分别比试验3组和试验4组低12.61%(P<O.05)、9.61%
(P<O.05)。(5)血清总蛋白水平的测定结果表明,试验4组总蛋白水平较
低,分别比试验2组和试验3组低9.78%(P<O.05)和8.96%(P<O.05);
—— 竺_兰篓堡丝苎
其它各组差异不显著。(6)血清白蛋白的测定结果表明,试验2组和试验3
组分别比试验1组高lO.85%(P<o.05)和9.45%(P<o.05),其它各组无
显著差异。(7)试验4组尿酸浓度比试验2组高40.17%(P<o.05),其它各
组之间差异不显著。(8)试验3组、试验4组葡萄糖水平分别比对照组低
17.22%(P<O.05)和l8.57%(P<o.05),分别比试验1组低12.60%(P<0.05)
和14.02%(P<O.05),试验2组比对照组和试验1组分别低10.10%
(P0.05)。(9)血清胆固醇的测定结果表明,对照组、
试验1组、试验2组分别比试验3组降低24.58%(P<0.01)、25.60%
(P<0.01)、18.81%(P<o.01),比试验4组分别降低20.7%(P<0.01)、
21.78%(P<0.01)、14.64%(P<o.01)。(1o)甘油三酯的测定结果表明,试
验1组甘油三酯含量最低,分别比对照组、试验2组、试验3组和试验4
组低15.75%(Po.05)、15.75%(P<0.05)、13.71%
(P0.05)、10.24%(P>0.05)、8.04%(P>0.05)。
血清微量元素浓度测定结果揭示:各组血清中铜、铁、锌的含量无显
著差异。添加O.5%AAN使血清中铜、铁、锌浓度均比对照组略有升高。
但试验1组血清中镁的含量均显著高于对照组、试验3组和试验4组
(P0.05)、69.23%(P<0.05)、84.62%(P<0.01)、88.46%
(P<0.01)。(2)对照组、试验2组、试验3组和试验4组肾脏中黄曲霉毒
素B1的含量分别比试验l组降低26.32%(P<0.05)、56.14%(P<0.01)、
71.93%(P<0.01)、70.18%(P<0.01):试验2组、试验3组和试验4组
分别比对照组低40.48%(P<0.05)、61.9%(P<0.01)、59.52%(P<0.01)。
(3)试验3组胸肌中黄曲霉毒素Bl含量分别比对照组、试验1组和试验2
组低40.54%(P<0.05)、48.84%(P<0.01)、56%(P<0.01),试验4组则
比对照组、试验1组和试验2组低64.86%(P<0.01)、69.77%(P<0.01)、
74%(P<0.01)。(4)试验3组和试验4组血清中黄曲霉毒素Bl的含量分
硕士学位论文
别比试验1组低66.94%(P<0.01)和49.59%(P<0.01),分别比对照组
低60.40%(P0.05),分别比试验2组低61.90%
(P<0.01)/和41.90%(PGl>B2>G2。从化学结构
上看,各种黄曲霉毒素彼此十分相似,都有一个双呋喃环和氧杂萘邻酮
(coumarin,又叫香豆素)。其中,双呋喃环结构是产生毒性的重要结构,
而氧杂荼邻酮可能与致癌作用有关。结构中c2一c3间双键的缺乏,导致
B2、G2的毒性显著降低。呋喃环的羟化作用对其毒性无明显影响,如B·
经羟化作用生成Ml,其毒性仅次于Bl。分子上的去甲基作用,可导致低
毒性的衍生物如Pl的生成。Bl在体内的生物转化过程中,经酶的环氧化
——堡兰竺丝丝苎
可生成Bt一2,3·环氧化物,这是一种与大分子核酸作用时具有高度活性的
物质。研究发现,任何物质在代谢过程中,分子结构中环氧化反应性强,
生成的环氧化代谢产物多,它的致癌性就强。那么,从黄曲霉毒素B.、
Gl和Ml的代谢途径可见二呋喃双键极易发生环氧化反应,形成2,3一环氧
化物,这就充分说明黄曲霉毒素为什么具有强烈的毒性和致癌作用。还有
人研究指出,黄曲霉毒素致癌性强,主要是它的致癌作用具有双重性。~
方面黄曲霉毒素环氧化性强,另一方面,它可在体内将非致癌物质硝酸盐
转变成亚硝酸盐和亚硝胺,从而发挥协同的致癌作用。
1.2.5黄曲霉毒素的的毒性作用
1.2.5.1对核酸合成的毒性作用
黄曲霉毒素B1可抑制DNA的复制,其抑制程度取决于毒素的量和动
物种的敏感性。黄曲霉毒素BJ还抑制RNA聚合酶本身的活性,核糖体前
体的生成,45SRNA的合成及高分子RNA到核糖体这个过程,从而抑制
RNA的合成。Vishwana等(1986)在巨大芽孢杆菌上的试验发现,黄曲
霉毒素还通过抑制嘧啶的基本合成来抑制核酸的合成。
1.2,5.2对蛋白质合成的毒性作用
黄曲霉毒素能够抑制RNA的合成,而RNA在蛋白质的生物合成中起
着极为重要的作用。因此,它必然影响蛋白质的合成。实际上,黄曲霉毒
素对RNA合成的抑制作用和对蛋白质合成的抑制作用,这两者之间很难
区分开。Bl在大鼠肝中对蛋白质的抑制过程,表现为两个阶段:早期阶
段,从给药开始到作用5小时,Bl直接作用于多聚核糖体,在2小时作
用达到顶点。Bl在体内作用7小时后,主要抑制转录过程,减少rRNA和
mRNA的合成。
1.2.5.3基因毒性作用
黄曲霉毒素Bl在生物转化过程中,经环氧化作用生成的B1.2,3一环氧
化物与DNA中鸟嘌呤残体的B1.7原子共价结合,生成了BI—DNA结合物,
导致DNA的损伤。在埃希氏大肠杆菌上发现,环氧化Bl对DNA模板的
直接作用,受损伤的DNA无法修复或错误地修复,基因受到了破坏,致
使遗传信息发生改变,从而产生了相应的致畸性、诱变性和致癌性。动物
~丝兰兰丝丝墨
体内谷胱甘肽可与环氧化B1结合,抑制B1-DNA络合物的生成,保护DNA
免受Bl的损害,缓解了Bl的基因毒性。因此,对于大多数动物来说,谷
胱甘肽是Bl的基因毒性的敏感性不同的决定因素。
1.2.5.4畸变性、诱变性和致癌性
由于黄蓝霉毒素具有基因毒性,引起基因的突变,从而引起动物细胞
发生畸变、诱变及癌变。到目前为止,已发现有几十种真菌毒素具有致癌
性。其中,以黄曲霉毒素B1的致癌性最强。许多人都认为,Bl是人初期
肝癌的病因之一。Hsieh(1986)和Yourteo(1986)等发现,黄曲霉毒素
M-和Q也有致癌性。
1.2.6黄曲霉毒素在畜牧生产中的危害
1.2.6.1降低生产性能
畜禽采食黄曲霉毒素后,可导致体增重和采食量下降,其影响程度与
蓄禽品种、日龄、接触黄曲霉毒素的剂量和时间长短、环境等因素有关。
给1日龄肉鸡饲喂含0.75mg/kg黄曲霉毒素的曰粮,28d后即发现体增重
和采食量显著下降。给肉鸡饲喂含1mg/kg黄曲霉毒素的日粮,饲喂期为
7d(21~28日龄)或14d(14~28日龄)时,肉鸡生长未受到明显影响,
饲喂期为21d(7~28日龄)时,体增重和采食量显著下降(Reddy等,
1984)。可见,致死量水平以下的黄曲霉毒素,对肉鸡生长的影响,是长
期连续摄入毒素在体内蓄积的结果(Reddy等,1984:Tuckam等,1994)。
肉种鸡的饲料中含有O.05~O.2mg/kg的黄曲霉毒素时,产蛋率和孵化率均
受影响(分别降低2%)(Afzali&Devegowda,1997)。
1,2.6.2抑制免疫反应系统
黄曲霉毒素对于家禽和哺乳动物均具有免疫毒性。黄曲霉毒素能引起
免疫器官发育受阻。美国家禽保健手册(1988,E.3)记载,饲料中的黄曲
霉毒素含量为2.5mg/kg时,可引起法氏囊的萎缩。组织学变化为法氏囊
皮质部淋巴细胞的变性和坏死,囊内滤泡数量显著增加,囊的相对重量显
著降低。黄曲雷毒素对畜禽的细胞免疫和体液免疫功能均有明显抑制作
用。免疫抑制效应表现在降低血液单核细胞的运动性和吞噬活性,抑制补
体活性f抑制调理素作用和吞噬细胞的活性)和增加绵羊红细胞(SRBC)的
——丝兰堂竺丝墨.
抗体应答,使SRBC抗体滴度降低。黄曲霉毒素可在自然条件下通过母体
传递给子代,影响子代鸡的免疫力。Qureshi等(1998)的试验表明,经
由母体转移至胚胎的黄曲霉毒素残留或其代谢物影响了胚胎细胞的分化
和成熟过程,从而降低了淋巴细胞和巨噬细胞的活性。同时,对抗胸腺依
赖性抗原和非胸腺依赖性抗原的抗体产生受到抑制。
1.2.6.3对生殖功能的影响
黄曲霉毒素中毒后母猪流产,产弱仔、死胎,产仔数减少和胎儿木乃
伊。母猪的卵巢畸形,子宫粘膜对雌性激素感受性受到抑制;公猪则性欲
降低,黄曲霉毒素可破坏公鸡的睾丸功能,使睾丸萎缩,曲精细管发育不
良,妨碍精液产生。Jagakunmar等(1988)报道,公鸭采食黄曲霉毒素BI
(251xg/只·d)后,睾九萎缩,重量降低,精子生成量减少,繁殖力和受
精率下降。此外,还可引起母鸭卵巢囊肿,降低雌性激素的分泌量,使其
产蛋率降低。但试验表明,黄曲霉毒素中毒引起的生殖器官的损害具有可
1.2.6.4对造血功能的影响
Tung等(1975)报道,黄曲霉毒素可引起鸡溶血性贫血,其特征为红
细胞数减少,红细胞压积降低、血红蛋白水平下降,骨髓增生。Huff等(1986)
认为引起这种贫血的原因是,毒素使骨髓造血功能受损,红细胞脆性增加。
1.2.7黄曲霉毒素对人类健康的间接危害
黄曲霉毒索可使人发生肝中毒、肝硬化、肝癌。亚洲和非洲一些地区
人群因为食用黄曲霉毒素污染的食品和较高的肝癌发病率之间的关联,使
国际癌症研究会(InternationlAgencyResearchonCancer,IARC,1993)
确定黄曲霉毒素是一A类致癌因子。1997年,FAO/WHO食品添加剂联
合委员会(JointFAO/WHOExpertCommitteeonFoodA ditive,JECFA)
提交了有关黄曲霉毒素的定性和定量信息,认为黄曲霉毒素应作为食品致
癌物来考虑,并尽可能减少摄入量(JECFA,1997)。在美国,法律规定
牛奶中黄曲霉毒素Ml的含量不得高于0.5I.tg/kg;欧洲的法律更加严格,
规定牛奶中的黄曲霉毒素含量不得高于O.05I.tg/kg(Boutrif和Canet,1998)。
但是,饲料中的黄曲霉毒素不仅直接对畜禽有害,而且残留在畜禽产
——.丝兰兰丝丝苎
品中,危害人类健康。动物接触日粮中超过2099/kg的黄曲霉毒素,可在
肉乳和蛋中出现残留物。奶牛饲料中的黄曲霉毒素从向牛奶中的转移比例
为65~100:1。研究表明,泌乳奶牛黄曲霉毒素B1摄入量的1.7%分泌
到乳中,成为黄曲霉毒素M1(Frobish等,1986),Bl/Ml为66:l。饲喂
0.4mg/kg黄曲霉毒素Bl连续4周,可导致猪体内B】的积蓄,肝、肌肉和
肾中的残留量为1.04~1.51I_tg/kg。试验表明,饲喂含0.Img/kgBl的饲料
后,能在鸡肝脏、肌肉和蛋白中残留。因此,如果动物采食被黄曲霉毒素
污染的饲料,毒素残留在产品中的可能性是很大的,这些产品将严重威胁
人类的健康。
1.3霉变饲料的去毒方法
为了预防饲料在储藏过程中被霉菌及其毒素污染,饲料应储藏在低温
干燥的理想环境中。另外,饲料中添加化学防霉剂也是目前饲料中防霉的
常规措施。但是,防霉剂虽有助于防止饲料中霉菌毒素的产生,但不能将
饲料中存在的霉菌毒素消除掉。因此,抑霉剂对于已被霉菌严重污染的谷
物或饲料是无能为力的。
由于种种原因,饲料被霉菌污染的情况很普遍。特别是我国南方春夏
之交,气候受西南暖湿气流的影响,环境温度高,湿度大,饲料在贮存和
运输过程中,往往因水分含量过高而容易受霉菌侵袭污染。饲料的霉变去
毒对饲料工业和畜牧业的经济效益的影响具有重要意义。对于严重霉变的
饲料必须废弃,绝不可用于饲喂畜禽。但对于轻度霉变的饲料,如果一概
废弃不用,则会造成很大的经济损失。为此,应根据饲料原料与产品的不
同情况,对轻度霉变的饲料进行去毒处理与合理利用。已被污染的饲料,
一般不能直接用于饲喂家畜,而需要通过采取一定的措施将其中的毒素破
坏或消除后才能利用。
1.3.1物理去毒法和化学去毒法
物理去毒法包括:剔除霉粒法、加热处理法、紫外线辐射法、以及溶
剂提取法等;化学去毒法利用霉菌毒素遇碱能分解而失活的性质来去除。
例如碱可水解黄曲霉毒素的内酯环,形成邻位香豆素纳,香豆素溶于水,
————————————笙生巡苎
从丽可用水洗去。
盖.3。2吸附法
瞪前控制霉菌毒素的最常见的方法是通过在目粮中添加营养惰性吸
附剂来降低霉菌毒素对动物的危害。霉菌毒素吸附荆通过吸附毒索后降低
其效价发挥作用。吸附剩如果能与霉菌毒素形成稳定的复台物,动物肠道
对毒素的吸收就会大大减少,从雨减少毒素对动物的危害以及产品中毒素
的残留。目前测试的无枫霉菌毒素吸附荆育:水台硅镪酸钙钠盐(hydrated
sodiumcalciumaluminosilicate,HSCAS)、沸石(zeolite)、膨润土
(bentonite)、粘土(clay)和活性炭血清样品:屠宰时用培养双取矗样,予37。C水浴中静置,待析漱
血清时吸取血清于离心管中,于3000rpm/min下离心10分钟,上清液分
装于eppendorf管中,立即浸入液氮,然后鬻一30。C低温冰箱中保存,待
(2)Jl千脏、肾脏、胸肌样品:各取同~部位约209,装入塑料袋中,
置。30。C低湛冰箱中保存,待分析用。
(3)十二指肠内容物:将十二指肠内容物挤入塑料袋中,立即浸入液
氮中,然后置。30。C低瀑冰籍中保存,待分析用。
2.2.S血清生理生他指标分析
谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、碱性磷酸酶(ALP)、尿酸
(UA)、胆圃醇(CHL)、甘油三酯(TG3)、白蛋白(Alb)、总蛋自《TP)、
葡萄糖(Glu)、淀粉酶(AMY)
主要仪器:CHEM一5半囱动生化分析仪、TDL80.2B型离心机、DK.600B
型电热恒温水槽。
测定方法:采爝宁波慈城生化试剂厂生产的试剂盒测定。
2.2.6盘清微量元素测定
铁(Fe)、铜(Cu>、锌(Zn)、镁(Mg)
主要仪器:曰率岛津AA6501型原子吸收仅。
样品处理:所用坩锅和容量瓶均用双蒸水冲洗多次,使不含任何微量
元素。取lml皿清放入坩锅中,置于烘箱中烘干,表面用纸覆盖,防止杂
——————————————————■!主兰丝丝苎
半净膛率(%)=(半净膛重/屠体重)×100%
腹脂率(%)=(腹脂重/屠体重)×100%
胸肌率(%)=(胸肌重/全净膛重)×100%
腿肌率(%)=(腿肌重/全净膛重)×100%
各器官的相对重量(%)=(该器官重/活重)×100%
2.2.4.2内脏器官观察
胴体分割过程中,对肝脏、一Ii,脏、肾脏、胰脏、肌胃、腺胃、胸肌、
腿肌、肠道进行肉眼观察,记录病变情况。
2.2.4.3样品收集与保存
(1)血清样品:屠宰时用培养皿取血样,于37。C水浴中静置,待析出
血清时吸取血清于离心管中,于3000rpm/min下离心10分钟,上清液分
装于eppendorf管中,立即浸入液氮,然后置.30℃低温冰箱中保存,待
(2)肝脏、肾脏、胸肌样品:各取同一部位约209,装入塑料袋中,
置-30。C低温冰箱中保存,待分析用。
(3)十二指肠内容物:将十二指肠内容物挤入塑料袋中,立即浸入液
氮中,然后置.30。C低温冰箱中保存,待分析用。
2.2.S血清生理生化指标分析
谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、碱性磷酸酶(ALP)、尿酸
(UA)、胆固醇(CHL)、甘油三酯(TG3)、白蛋白(Alb)、总蛋自(TP)、
葡萄糖(Olu)、淀粉酶(AMY)
主要仪器:CHEM。5半自动生化分析仪、TDL80.2B型离心机、DK.600B
型电热恒温水槽。
测定方法:采用宁波慈城生化试剂厂生产的试剂盒测定。
2.2.6血清微量元素测定
铁(Fe)、铜(Cu)、锌(Zn)、镁(Mg)
主要仪器:日本岛津AA6501型原子吸收仪。
样品处理:所用坩锅和容量瓶均用双蒸水冲洗多次,使不含任何微量
元素。取1ml血清放入坩锅中,置于烘箱中烘干,表面用纸覆盖,防止杂
——翌:查兰竺鳖墨
质进入样品中;再将坩锅置于电炉上灼烧,待无烟后取下,置于茂福炉中,
550。C灰化5h;坩锅冷却后,加入10ml6mol/LHCL,在电炉上小一心煮沸,
溶解:然后过滤到50ml容量瓶中并用双蒸水定容至刻度。
测定方法:用日本岛津AA650I型原子吸收仪测定。
2.2.7十二指肠消化酶活性测定
主要仪器:SP一2000UV型紫外可见分光光度计、CHEM一5半自动生化
分析仪、TDL80—2B型离心机、DK.600B型电热恒温水槽。
样品处理:称取O.2~0.39十二指肠内容物,加入4,0ml生理盐水,匀
浆,4"C放置24h,6000rpm/min离心15rain,上清液用于测定各种消化酶
2.2.7.1总蛋白水解酶活性测定
(1)试剂配制
磷酸盐缓冲液(pH7.6)、10%三氯乙酸(TCA)、0.1%酪蛋白溶液
(2)酶活性测定
取O.4ml提取酶液加入0.1%酪蛋白的磷酸盐(pH7.6)缓冲液2.0ml,
37"C水浴上精确反应lO分钟后,加入2.0ml10%的TCA中止反应,45009
离心20rain,上清液于275nm波长下测定酪氨酸的吸光度A。取0.4ml生
理盐水按相同步骤处理作空白对照。酶活性单位定义为:每克内容物每分
钟每增加0.1个吸光度为一个活性单位(U)。
2.2.7.2糜蛋白酶活性测定
(1)试剂配制
(1)二甲基亚砜(分析纯)
(2)Tris—HCL缓冲液:pH7.8,内含0.02mol/LCaCl2的0.2mol/LTris—Hcl
(3)底物溶液配制:称取底物N—Glutanyl-phenyl—alanine—P-nitroanilide
50mg(从Sigma公司订购),加1.0ml二甲基亚砜溶解,然后加50ml缓冲
f4)30%的醋酸溶液
(2)酶活性测定
——一丝兰堂竺丝苎
参照ErJanger(1964)的方法稍经修改。
取1.9ml缓冲液加酶液0.1ml,25。C放置5rain,加入底物溶液1.0ml,
34*C反应10rain后加入1,0ml30%醋酸中止反应,405nm处比色。酶活性
定义为:每克内容物每分钟内每增加O.01个吸光度为1个活性单位fu)。
2.2.7.3胰蛋白酶活性测定
(1)试剂配制
(1)二甲基亚砜(分析纯)
(2)Tris—HCL缓冲液:pH8.2,内含0.02mol/LCaCl2的0.05mol/L
Tris—HCL缓冲液。
(3)30%的醋酸溶液
(4)底物溶液配制:将43.5mgDL—BAPABenzoyl-DL—arginine—P—
Nitroanalide(购自Sigma公司)溶解在1.0ml二甲基亚砜中,再
用上述缓冲溶液定容至100ml,底物保存不得低于25℃。
(2)酶活性测定
参照Erlanger(1966)的方法稍经修改。
取O.9ml水加到5.0ml底物溶液中,混和液于25℃水浴中平衡5rain,
随后加入0.1ml提取酶液,精确反应10rain,加入1.0ml30%的醋酸终止
反应。在波长410nm处读取吸光度。酶活性定义为:每克内容物每分钟
内每增加0.01个吸光度为1个活性单位(u)。
2.2.7.4淀粉酶活性测定
采用宁波慈城生化试剂厂生产的试剂盒进行测定。
在测定管和空白管中分别加入已在37℃预温5min的底物缓冲液
1.0ml,然后在测定管中加入0.02ml提取酶液,混匀后在37"C水浴7.5min
(需准确);分别在测定管和空白管加入碘贮溶液0.1ml,蒸馏水7.0ml混
匀后在660nm波长处读取测定管和空白管的吸光度A。(空白管A-测定管
a)/空白管A×800=淀粉酶活力单位(U)。
2.2.8肝脏、肾脏、胸肌、血清中黄曲霉毒素Bl含量测定
主要仪器:550型酶标测定仪、HZ-C型台式恒温振荡器。
测定方法:采用无锡生物技术公司生产的测试盒进行测定。
硕士学位论文
肝脏、肾脏、胸肌匀浆后,分别称取29、2g、3g左右,血清o.5ml,
于三角瓶中,准确加入提取液25ml(甲醇:水为1:1),血清加入5ml
提取液,振荡5~10rain,过滤,滤液待分析用。用洗涤液清洗包被抗体
的反应板2次,洗涤液不得溢出,每次间隙1分钟,甩掉洗涤液,放在吸
水纸上拍干。反应板得1~3号孔为标准对照孔,依次加入501,tl样品稀释
液、黄曲霉毒素B1标准溶液(1ng/m1)、黄曲霉毒素Bl标准溶液(0.1
ng/m1),其余孔为样品孔,依次加入50u1样品滤液。反应板摇匀后,1号
孔加入509l酶标抗原稀释液,其余孔分别加入501,tl酶标抗原溶液,摇匀,
反应板于恒温振荡器中37"C静置30min。取出反应板,用洗涤液洗板5
次,洗涤液不得溢出,每次间隙2分钟,甩掉洗涤液,拍干。每孔分别加
入显色底物液a和显色底物液b各50u1,恒温振荡器中37℃静置l5min。
每孔加终至液501,tl,在酶标测定仪450rim波长处测定各孔吸光度A值。
黄曲霉毒素Bl含量按以下公式计算:
lgX=((A3号孔~A样品孔)/(A3号孔一A2号孔))一1
黄曲霉毒素B】含量(1.tg/kg)=XX25/样品质量(g)
黄曲霉毒素B1含量(ng/m1)=XX5/0。5(m1)
2.2.9数据处理
结果以殛SD表示,数据处理与分析采用SAS(6.12版)GLM程序
进行单因素方差分析。
——————————————————-笪兰兰丝丝苎
3.试验结果
3.1生长性能和饲料利用率
生产性能结果见表4。
表4AAN对肉鸭生长性能和饲料利用率的影响
Table4EffectsofAANonaveragedailygainandfeedefficiencyinducks
注:同行中标注大写字母不同者表示差异极显著(P<0.01),小写字母不同者表示差
异显著(PO.05)、35.4%(P<0.05)、24.74%(P0.05):
其次为对照组,分别比试验1组、试验2组和试验4组高31.50%(P<0.05)、
21.10%(PO.05);再次为试验4组,分别比试验1组和
试验2组提高26.84%(P<0.05)和16.84%(PO.05)、32.72%(P<0.05)、
25.5l%(PO.05);对照组的日增重则分别比试验1组、
试验2组和试验4组高28.77%(P<O.05)、21.78%(P0.05);
碗士学位论文
试验4组的日增重分别比试验1组和试验2组提高24.47%(P<005)和17.20
%(P<O.05);试验3组再次,试验l组的日增重最低。从饲料效率来看,
试验l组的饲料效率最低,其料重比比对照组、试验2组、试验3组和试
验4组分别高17.97%(P<0.05)、8.75%(P<0.05)、14.85%(P<0.05)、11.18
%(P<0.05);试验2组的饲料效率也较低,其料重比比对照组、试验3组
和试验4组分别高8.47%(P0.05)、2.24%(P>0.05),对
照组的饲料效率最高,但统计表明,它与试验3组无显著差异。
3.2胴体组成
肉鸭胴体组成见表5。
表5AAN对樱桃谷肉鸭胴体组成的影响
Table5 EffectsofAANoncarcasscompositionsinducks
由表5可见,各组间的屠宰率和半净膛率没有显著差异。就全净膛
率而言,试验3组最高,分别比对照组、试验1组、试验2组和试验4
组高1.14(P>0.05)、3.69(P<0.01)、2.Ol(P<0.01)、1.55(P<0.05)个百分点;
对照组次之,分别比试验1组、试验2组和试验4组高2.55(P0.05)、O.45(P>0.05)个百分点;试验1组最低,均极显著低于其它
组。试验3组的胸肌率最高,分别比对照组、试验1组、试验2组和试验
4组提高16.77(P<0.01)、41.90%(P<0.01)、54.24%(P<0.01)和12.20%
fP<O.051,试验1组和试验2组鸭的胸肌率最低,均显著低于其它组。各
——一 堡兰兰丝丝苎
组鸭的腿肌率之间没有显著差异,但腹脂率有明显差别,腹脂率以对照组
为最高,分别比试验1组、试验2组、试验3组和试验4组高45%(P<O.01)、
37%(PO.05)、41.5Voo(P<O.01);其次为试验3组,
分别比试验1组、试验2组和试验4组高26.7%(P0.05)、
23.6%(P<0.05):试验l组的腹脂率最低。
3.3内脏器官病变观察
内脏器官病变观察结果见表6。
表6内脏器官病变观察结果
Table6 Resultsofpathologicalchangesofvisceralorgansinducks
3.4内脏器官重量
内脏器官相对重量见表7。
由表7可见,试验1组的肝脏率最高,分别比对照组、试验2组、试
验3组和试验4组高26.6%(PO.05)、24.1%(P<O.01)、
21.7%(P<O.01);试验2组次之,分别比对照组、试验3组和试验4组
高20.5%(P<O.01)、18.1%(P<O.01)、15.7%(P<O.01),其它各组间差
异不显著。各组鸭心脏率差异不显著。肾脏率仍以试验1组为最高,分别
比对照组、试验2组、试验3组和试验4组高21.9%(P0.05)、17.1%(PO.05),其它各组问均无显著差
颟士学靛论文—————————————————————————————————————————————~_H_ __一 ~一
缀鸭的腿肌率之间没有显著差异,但腹脂率有明显差别,腹脂率以对照组
为最高,分剐比试验1组、试验2组、试验3组和试验4组高45%(P<O.01)、
37%(P0.05)、4l。5%(P<0。01);其次为试验3组,
分别比试验1组、试验2组和试验4组高26.7%(P0.05)、
23,6%(P<0.05);试验1组的腹腊率最低。
3。3内脏器官病变观察
内脏器官病交观察结粟觅表6。
表6内脏器官病变观察结果
Table6 Resultsofpathologicalchangesofvisceralorgansi ducks
3.4内脏器官重量
内脏器宫相对重量见表7。
由表7可见,试验l组的JI干脏率最高,分别比对照组、试验2组、试
验3组和试验4组高26.6%(P0.05)、24+l%(P<0.01)、
21.7%(P<O。01);试验2组次之,分别比对照缎、试验3组和试验4组
高20。5%(P<0。01)、18.1%(P<O。01)、15。7%(P<O.01),其它各组间差
异不显蔫。各组鸭心脏率差异不显著。肾脏率仍以试验1组为最高,分别
比对照组、试验2组、试验3组和试验4组高21。9%(PO。05)、17。l%(PO+05),其它各组阈均无显蓑差
——一 堡兰兰丝丝苎
组鸭的腿肌率之间没有显著差异,但腹脂率有明显差别,腹脂率以对照组
为最高,分别比试验1组、试验2组、试验3组和试验4组高45%(P<O.01)、
37%(PO.05)、41.5Voo(P<O.01);其次为试验3组,
分别比试验1组、试验2组和试验4组高26.7%(P0.05)、
23.6%(P<0.05):试验l组的腹脂率最低。
3.3内脏器官病变观察
内脏器官病变观察结果见表6。
表6内脏器官病变观察结果
Table6 Resultsofpathologicalchangesofvisceralorgansinducks
3.4内脏器官重量
内脏器官相对重量见表7。
由表7可见,试验1组的肝脏率最高,分别比对照组、试验2组、试
验3组和试验4组高26.6%(PO.05)、24.1%(P<O.01)、
21.7%(P<O.01);试验2组次之,分别比对照组、试验3组和试验4组
高20.5%(P<O.01)、18.1%(P<O.01)、15.7%(P<O.01),其它各组间差
异不显著。各组鸭心脏率差异不显著。肾脏率仍以试验1组为最高,分别
比对照组、试验2组、试验3组和试验4组高21.9%(P0.05)、17.1%(PO.05),其它各组问均无显著差
——一一竺兰兰竺塑苎
表7AAN对肉鸭内脏器官相对重量的影响
Table7 EffectsofAANonrelativeorganweightsofducks
试验1组鸭的胰脏率也最高,分别比对照组、试验2组、试验3组和试验
4组高51.4%(P<0.01)、14.3%(P<0.05)、30.2%(P<0.01)、24.4%(P<0.01):
试验2组的胰脏率次之,分别比对照组、试验3组和试验4组高32.4%
(P0.05)、8.9%(P>0.05)。
3.5饲料养分表观消化率
饲料养分表观消化率结果见表8。
由表8可见,试验1组粗蛋白的消化率最低,分别比对照组、试验2
组、试验3组和试验4组降低9.53%(P0.05)、15.66%
(P0.05)。粗脂肪、粗灰分、钙、磷等营养物质的消化
率没有显著差别,但试验3组的粗蛋白、粗脂肪、钙等营养成分的消化率
均比其它组有升高的趋势,其粗灰分和磷的消化率比对照组略有降低:试
验1组各种营养成分的消化率均比其它各组有下降趋势。
——一一一 研i4擎舷静立——————————————————————————————————————o=_二_——一一..
表7AAN对肉鸭内脏器官相对重量的影响
Table7 EffectsofAANonrelativeorganweightsofducks
试验l组鹦的胰脏率也最离,分别比对照组、试验2组、试验3组鞠试验
4组高5l。4%(P<0。01)、14.3%<P<0。05)、30.2%(P<0。01)、24。4%(P<0。01):
试验2组的胰脏率次之,分别比对照组、试验3组帮试验4缀高32,霹%
(P0.05)、8.9%(P>0.05)。
3.5饲料养分表观消化率
饲料葬分表观消化率结果见表8。
由表8可见,试验l组粗蛋骞的消化率最低,分别比对照组、试验2
组、试验3组和试验霹组降低9。53%(P《O.05)、4.49%(p>0.05)、15.66麓
(PO.05)。粗脂肪、粗灰分、钙、磷等营养物质的消化
率没有显著差别,但试验3组的粗蛋白、租脂肪、钙等营养成分的消化率
均比其它组有升高的趋势,其粗灰分和磷的消化率比对照组略有降低;试
验l组各种营养成分的消化率均比其它各组有下降趋势。
表8AAN对饲料养分表观消化率的影响
Table8EffectsofAANontheapparentdigestibilitiesofeednutrients
—————————————————■_=二r————————————————————————————————————一一对照组 试验1组 试验2组 试验3组 试验4组
3.6盘清生化指标
血清生化搬标结果见表9。
统计表明,试验l组鸭血清中谷草转氨酶水平分别比对照组、试验3
组秘试验4组离13。45%(P<0+05)、16。66%(P0,05):
试验2组谷草转氨酶水平则分别比对照缀、试验3缀、试验4组离16.2l
%(P<0.05)、16。66%(P<O.05)、13.76%(P<0.05);试验l组和试验2
组间没有显著差异。试验l组鸭血清中谷丙转氨酶的水平分别比对照组、
试验2组、试验3组和试验4组高43.52%(P<0.01)、19.07%(P<0.05)、
32.37%(P<0.01)和45,76%(P<O.01);而试验2组的血清谷丙转氨酶水
平也分别比对照组、试验3组和试验4组分别高20。53%(P0。05)、22。41%(P<O,05);对照组、试验3组、试验4组之间的血
清中答爵转氨酶熊水平差异不显著。各组阀鸭血清中碱性磷酸酶的差异不
显著。从上表可以看出,试验l缀鸭盘清中淀粉酶的水平分别毖对照组、
试验2组、试验3组和试验4组高2l。94%(P<0。05)、9.52%(P0.05)、lO.23%(P<0.05);除对照组淀粉酶数值比试验3组较
低外(P<0。05),其余各组间投有显著差别。对各组血清总蛋自水平的测
定表明,试验4组总蛋白水平较低,分别比试验2组和试验3组低9.78
%(P<0。05)和8。96%(P<0.05);其它各组差异不显著。
————————————皇兰兰一丝堕苎
表8AAN对饲料养分表观消化率的影响
Table8EffectsofAANontheapparentdigestibilitiesofreednutrients
ii:_=——旦堕生——旦一 !! !! !!
专雾尸∞63.71+6.21a57。.引64。-t-60.35±_9.13ab6嚣■i
鼍嚣踞84.06±4.5481,.朋83-1-85.76±3.178繁
慧急,44.72+_4.6831蚋.04,+40.53±4.1639。.彤42±
钙Ca(%)46.54±1.77
磷P(%) 73.08±0.56
48.47-t-4.74
66.99±2.06
8I.92±I.46
54.18±274
3.6血清生化指标
血清生化指标结果见表9。
统计表明,试验1组鸭血清中谷草转氨酶水平分别比对照组、试验3
组和试验4组高13.45%(P<0.05)、16.66%(P0.05):
试验2组谷草转氨酶水平则分别比对照组、试验3组、试验4组高16.21
%(P<0.05)、16.66%(P<0.05)、13.76%(P<0.05);试验1组和试验2
组间没有显著差异。试验1组鸭血清中谷丙转氨酶的水平分别比对照组、
试验2组、试验3组和试验4组高43.52%(P<0.01)、】9.07%(P<0.05)、
32.37%(P<0.01)和45.76%(P<0.01);而试验2组的血清谷丙转氨酶水
平也分别比对照组、试验3组和试验4组分别高20.53%(P0.05)、22.4l%(P<0.05);对照组、试验3组、试验4组之间的血
清中谷丙转氨酶的水平差异不显著。各组间鸭血清中碱性磷酸酶的差异不
显著。从上表可以看出,试验1组鸭血清中淀粉酶的水平分别比对照组、
试验2组、试验3组和试验4组高21.94%(P<0.05)、9.52%(PO.05)、10.23%(P<0.05):除对照组淀粉酶数值比试验3组较
低外(P<0.05),其余各组间没有显著差别。对各组血清总蛋白水平的测
定表明,试验4组总蛋白水平较低,分别比试验2组和试验3组低9.78
%(P<0.05)和8.96%(P<0.05);其它各组差异不显著。
耻恐硝抱加以8
——丝兰堂竺丝墨:
表9AAN对肉鸭血清生化指标的影响
1ableyEffectsoIAANoncontentsofbiochemicindexesinserumirlducks
!!!!!!! !!T2 T3 T4
谷GO草T转(I氨U/酶1)44.17±8.5。8;0.9.21。1。±51.33__+9.56c:4.5.800。±:.54.,12。±
G谷P丙T转(I氨U/酶1)16.27±4.79a";.3,.,3。5。4。-19.614-3.79Acb:7.,.。64。。4-:6.。.。02。。4-
A碱L性P磷(I酸U/酶1)530.2±137.5;:4:5..。4±432.14-130.8;。1,3..,0±;:0。4..。3±
A篇‰,㈣肚saa8筹8+,ss:触:,中i;鬻±筹8+
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血清白蛋白的测定结果表明,试验2组和试验3组分别比试验1组高10.85
%(P<0.05)和9.45%(P<0.05),其它各组无显著差异。从表中可以看
出,除试验4组血清尿酸浓度比试验2组高40.17%(P<0.05)外,其它
各组之间差异不显著。试验3组、试验4组血糖水平分别比对照组低17.22
%(P<0.05)、18.57%(P<0.05),分别比试验1组低12.60%(P<0.05)、
14.02%(P<0.05),试验2组也比对照组和试验l组分别低10.10%
(P0.05)。对各组鸭血清中胆固醇的测定表明,对照
组、试验1组、试验2组分别比试验3组降低24.58%(P<0.01)、25.60
%(P<0.01)、18.81%(P<0.01),对照组、试验1组、试验2组也分别比
试验4组低20.7%(P<0.01)、21.78%(P<0.01)、14.64%(P<0.01),而
————丝兰兰丝丝苎
其它各组之间没有显著差异。甘油三酯的测定结果表明,试验1组的血清
甘油三酯含量最低,分别比对照组、试验2组、试验3组和试验4组低
15.75%(PO.05)、15.75%(P<O.05)、13.71%(PO.05)、lO.24
%(P>O.05)、8.04%(P>O.05)。
3.7十二指肠消化酶活性
消化酶活性测定结果见表lo。
表10AAN对十二指肠消化酶活性的影响
Table10 EffectsofAANondigestionenzymeactivitiesinduodenal
contentsinducks
统计表明,各组间十二指肠总蛋白酶的活性没有显著差异。试验3
组糜蛋白酶的活性分别比对照组、试验l组和试验2组低28.25%
(P<0.01)、25.48%(P<0.01)、31.80%(P<0.01);试验4组糜蛋白酶的
活性分别比对照组、试验1组和试验2组低24.16%(P<0.01)、21.24%
(P<0.05)、27.92%(P<O.01);其它各组间没有显著差异。试验3组胰蛋
白酶的活性分别比对照组、试验1组和试验2组低27.32%(P<0.05)、25,83
%(P<0.05)、24.08%(P<0.05);试验4组胰蛋白酶的活性分别比对照组、
试验1组和试验2组低27.57%(P<0.01)、26.09%(P<0.05)、24.38%
(P0.05)、28.89%(P0.05):而试验4组则分别比
对照组、试验1组和试验2组分别低10.22%(P>0.05)、18 9%(P0.05);其它各组间无显著差异。
3.8血清微量元素水平
血清中微量元素浓度测定结果见表11。
表1lAAN对肉鸭血清微量元素水平的影响
Table11EffectsofAANonleveloftraceelementsi serum
通过对血清中微量元素水平的测定,可以看出,各组鸭血清中的铜、
铁、锌的含量没有显著差异。从表中可以看出,试验3组血清中的微量元
素铜、铁、锌均比对照组略有升高。但试验1组鸭血清中镁的含量均显著
高于对照组、试验3组和试验4组(P0.05)、69.23%(P<0.05)、
84.62%(P<0.01)、88。46%(P0.05)、62.5
%(P>0.05)。对照组、试验2组、试验3组和试验4组肾脏中黄曲霉毒
碗士学位论R-
素Bl的含量分别比试验1组下降26.32%(P<0.05)、56.14%(P<0.01)、
71.93%(P<0.01)、70.18%(P<0.01):试验2组、试验3组和试验4组
分别比对照组低40.48%(P<0.05)、61.9%(P<0.01)、59.52%(P<0.01):
其它各组间差异。从上表可以看出,试验3组和试验4组血清中黄曲霉毒
素B1的水平分别比试验1组低66.94%(P<0.0I)和49.59%(P<0.01),
分别比对照组低60.40%(P0.05),分别比试验2
组低61.90%o(P<0.01)和41.90%(P<0.05)。对胸肌中黄曲霉毒素B1含
量的测定表明,试验3组分别比对照组、试验1组和试验2组低40.54%
(P<0.05)、48.84%(P<0.01)、56%(P<0.01),试验4组则比对照组、
试验1组和试验2组低64.86%(P<0.01)、69.77%(P<0.01)、74%(P<0.01),
试验3组也比试验2组低56%(P<0.05)。
表12AAN对血清及组织器官黄曲霉毒素Bl含量的影响
Table12 EffectsofAAN011_theconcentrationofaflatoxinB1in
organsandserum
肝脏 O.15±O.14AB”0.26+--0.25“0.08+-0.08“”0.04-----0.03”
(I_tg/kg)
0.42+-0.20ABb0.57±0.13“40.25±O.118。0.16±O.04。。
O.744-0.21AcaO.864-0.1.33“O.44±0.198。。
(I_tg/kg)
血清 2.02-----0.69Ac”2.42+-0.80“82.104-1.22“。1O.80_+0.23”
(ng/m1)0.568。6。
(Discussion)
4.1添加AAN对樱桃谷鸭生长性能的影响
生产实践中,畜禽黄曲霉毒素中毒所表现出的最普遍的症状就是生长
速度下降以及生产性能降低。肉仔鸡日粮中的黄曲霉毒素水平达到
3.5mg/kg时,28日龄的体增重比对照组下降10%。Goswami(1997)报道,
给3月龄卡其肯拜耳(KhakiCampbell,K.C.)鸭每天饲喂10“g/kg黄曲
霉毒素Bl,鸭体重显著下降。Ostrowski(1983)报道,28日龄的阿拉伯
(Alabio)鸭采食50I-tg/kg黄曲霉毒素Bl后,鸭的体增重和饲料蛋白质利
用率显著下降。Lindemann等(1993)用不同黄曲霉毒素水平的日粮对断
奶仔猪的饲养试验结果表明,随着黄曲霉毒素含量的增加,猪的体增重、
采食量和饲料转化率显著下降。Shane报道,当雏鸡喂以含黄曲霉毒素
Bi7.5mg/kg的日粮时,生长受到严重抑制,21日龄的体重只有310克,
而对照组则达到480克。由此可见,黄曲霉毒素可以明显抑制动物的生长,
正是由于黄曲霉毒素对动物的强烈毒害作用,人们在解毒方面进行了大量
的研究,也提出了很多种解毒方法。Harvey等(1988)报道,在含黄曲
霉毒素Bt的肉仔鸡、生长猪日粮中分别添加0.5%水合硅铝酸钠钙
(HSCAS),可以明显减轻黄曲霉毒素B1对鸡、猪的生长抑制作用。邓跃
林(1992)指出,在含500¨g/kg黄曲霉毒素的猪日粮中添加几种不同的
粘土或沸石,结果猪的采食量、日增重提高。但是由于天然的粘土、沸石
等矿物质的结构并不完全一致,对黄曲霉毒素的吸附效果差别很大,也就
是说并不是所有的膨润土或沸石等都是一样有效的。本研究表明,添加
0.5%膨润土可以显著提高饲料效率,肉鸭的日增重也有升高的趋势,但
差异不显著;添加O.25%、O.5%AAN均能够显著提高肉鸭的曰增重和饲
料效率:添加0.25%、0.5%AAN,鸭的日增重比添加0.5%膨润土显著提
高:饲料效率也有提高趋势,但差异不显著。本研究消化试验测定的各种
养分的消化率也表明,添加AAN组肉鸭对各种养分的消化率较高,而试
验1组对各种养分的利用率最低,这说明添加AAN后各种养分的沉积率
————一翌兰堂丝丝苎
增加,促进了鸭的生长。对血清中生化指标的测定结果也表明,添加AAN
组血清中总蛋白、白蛋白、胆固醇、甘油三酯的浓度升高,表明该组鸭的
同化作用增强,肝脏合成蛋白质、脂肪的能力提高,从而提高了其生长速
4.2添加AAN对樱桃谷鸭内脏器官的影响
大量研究表明,肝脏是黄曲霉毒素的靶器官,动物摄入黄曲霉毒素后,
毒素会在肝脏内积累,导致肝脏肿大、苍白、变脆、胆管上皮增生等(Huff
等,1986:Tuckam等,1994)。由于黄曲霉毒素会抑制肝脏的脂肪合成功
能,影响脂类从肝脏的运输,使脂肪在肝脏沉积,引起肝脏脂肪浸润、肥
大(Reddy等,1984)。Reddy等(1982)的研究指出,家禽黄曲霉毒素
中毒后,可引起细胞内质网的功能受损,脂蛋白合成能力降低,导致脂肪
肝综合症。Carnaghan(1965)报道,低剂量的黄曲霉毒素饲喂鸭雏,导
致鸭肝脏损伤,并产生结节。Abo—Norag等(1994)的研究表明,用含黄
曲霉毒素3.5mg/kg日粮饲喂肉仔鸡时,其肝脏率(肝脏重与活体重的比
值,下同)比对照组显著提高;在添加O.5%水合铝硅酸纳钙(HSCAS)
后,其肝脏率没有降低。本研究的剖检结果表明,不添加膨润土和AAN
而饲喂添加黄曲霉毒素B1日粮的肉鸭肝脏均出现上述病变,而饲以添加
膨润土日粮的鸭也出现较严重的中毒症状,而饲喂添加0.25%和0.5%
AAN日粮的肉鸭中毒较轻。屠宰试验结果表明,饲喂含0.25%和0.5%
AAN日粮的肉鸭的肝脏率比试验l组显著降低,这说明AAN可以降低黄
曲霉毒素Bl对肝脏的毒害作用,从而降低其肝脏肿大增生的程度。饲喂
添加AAN日粮肉鸭的肝脏率也比添加膨润土组显著降低,这说明添加
AAN的效果明显好于添加膨润土。屠宰试验的结果还表明,添加膨润土
组鸭肝脏率低于不添加组,这说明膨润土也会在一定程度上降低黄曲霉毒
素的毒性。
Reddy等(1982)、Norag等(1994)的研究表明,肉鸡采食含有黄曲
霉毒素的日粮后,肾/体比、脾/体比、胰/体比均有不同程度的升高。本研
究中饲喂不添加任何吸附剂日粮的肉鸭肾脏率、胰脏率均比其它组显著升
硕士学位论文
高,这跟Reddy等人的报道一致。日粮添加O.25%、0.5%AAN和O.5%
膨润土均能显著降低肉鸭的胰脏率和肾脏率,其中以添加0.5%AAN效果
最好,但没有显著差异。
屠宰试验的结果还表明,饲喂添加O.5%AAN日粮的肉鸭腹脂率显著
高于不添加吸附剂组,也显著高于添加膨润土组和添加O.25%AAN组,
这可能是由于黄曲霉毒素会抑制肝脏脂肪合成,从而降低了肉鸭体内脂肪
的含量,导致腹脂率下降。饲喂添加0.25%和O.5%AAN的日粮还会使肉
鸭的胸肌率极显著地高于不添加吸附剂组和饲喂添加0.5%膨润土组,这
可能是由于黄曲霉毒素会严重损害动物肝脏机能,影响动物体内能量、物
质代谢,造成动物营养不良,蛋白合成不足,从而降低胸肌的重量。饲以
O.5%AAN日粮的肉鸭全净膛率也极显著地高于不添加吸附剂组和添加膨
润土组,饲以含O.25%AAN和添加0.5%膨润土日粮的肉鸭全净膛率也极
显著地高于不添加吸附剂组,这可能是由于添加0.25%、0.5%AAN和0.5
%膨润土均能明显减轻鸭体内器官肿大的程度,改善肉鸭的营养状况,促
进肌肉生长,从而提高了鸭的全净膛率。
4.3添加AAN对樱桃谷鸭消化机能的影响
很多研究表明,黄曲霉毒素会影响动物的消化机能,降低饲料养分的
利用率。黄曲霉毒素可以刺激家禽胃肠道前段,特别是腺胃和肌胃,发生
炎症(Huff和Doerr,1981)。肌胃比腺胃对黄曲霉毒素更为敏感,这是
由于家禽肌胃和腺胃的组织成分不同造成的,同时也反映了腺胃和肌胃的
组织中黄曲霉毒素及其代谢产物的浓度不同(Huff等,1986)。Giambrone
等(1985)把提纯的黄曲霉毒素Bl以胶囊的形式饲喂给火鸡,结果发现
火鸡拉血痢,病理剖检发现小肠粘膜有出血点。本试验也发现,不添加任
何吸附剂、含黄曲霉毒素B1401ag/kg的日粮饲喂的肉鸭的小肠粘膜有出血
现象,这就明显影响了肉鸭对营养物质的消化吸收,降低了养分的消化率。
Meissner(1983)用阿拉伯(Alabio)和Tegal雏鸭做试验,当日粮中黄曲霉
毒素浓度达到30"g/kg时,饲料净蛋白质利用率即显著下降。李有业(1998)
报道,在黄曲霉毒素BI的影响下,雏鸡对蛋白质的利用率比对照组降低
————一一堡兰堂竺堑苎
9.05%。本研究表明,饲喂不添加任何吸附剂目粮、含黄曲霉毒素B。
40“g/kg的肉鸭对粗蛋白的表观消化率显著低于饲喂添加AAN0.5%时的
消化率,其粗脂肪、粗灰分、钙、磷的消化率均较其它组低。卿中全等(2000)
认为,黄曲霉毒素BI对饲料蛋白质消化的影响不仅会导致动物蛋白质营
养缺乏,而且与黄曲霉毒素Bl对动物的全身毒害作用有关。
本试验还研究了添加o.5%膨润土、0.25%AAN、o.5%AAN吸附黄曲
霉毒素对肉鸭十二指肠消化酶活性的影响。各种处理间总蛋白酶的活性没
有显著差别。饲喂含有O.25%AAN和0.5%AAN日粮肉鸭十二指肠糜蛋
白酶、胰蛋白酶的活性均比其它组低,差异显著;该两组肉鸭十二指肠淀
粉酶的活性也比不添加任何吸附剂的试验1组低,差异显著,这与Victor
等(1993)的报道并不一致。这可能是与饲料中所含的黄曲霉毒素的量、
动物中毒的阶段与程度有关。我们推测,饲喂含有O,25%AAN和O.5%
AAN日粮肉鸭十二指肠消化酶活性之所以比其它组低主要是由于AAN降
低了胰脏受损害的程度,减少了胰腺细胞内酶原的释出。Largmani(19901
报道,动物发生怠慢性胰腺炎时,由于胰腺细胞膜破裂,导致细胞内的酶
原大量释出,这些酶原在激酶的作用下成为具有活性的消化酶,从而导致
血清及消化道内的酶活升高,这是判定动物胰腺受损程度的一个重要指
标。从营养物质的消化率来看,尽管对照组、试验1组和试验2组鸭十二
指肠各种消化酶的活性比较高,但对营养物质的消化率并不高,这也说明
消化酶活性的升高是病理性的,是黄曲霉毒素影晌了胰腺及肠道粘膜的正
常功能,而导致这些消化酶活性异常升高。
4.4添加AAN对肉鸭不同组织器官黄曲霉毒素含量的影响
黄曲霉毒素主要是在动物的小肠被吸收,被吸收的毒素一部分又随
胆汁回到小肠,剩余的一小部分进入体循环,经不完全代谢后,随尿液排
除体外。进入血液的黄曲霉毒素会随着血液循环到达动物全身各器官、组
织,从而对这些器官、组织造成危害。为了更为直观地了解不同吸附剂对
黄曲霉毒素的吸附效果,本研究测定了黄曲霉毒素Bl在鸭血清、肝脏、
肾脏、胸肌中的含量。
硕士学位论文
4.4.1血清
黄曲霉毒素必须通过血液循环才能到达动物体内各组织器官,然后
在组织器官内代谢降解,因此本研究首先测定了血清中黄曲霉毒素的水
平。结果表明,饲喂添加O.25%和0.5%AAN日粮的试验鸭的血清黄曲霉
毒素的水平均低于对照组、试验1组和添加O.5%膨润土组,这表明AAN
可以显著降低血清中黄曲霉毒素的水平,而膨润土则没有降低肉鸭血清中
黄曲霉毒素的水平。从试验结果还可以看出,对照组血清中黄曲霉毒素的
水平也很高,由此推断对照组日粮中也含有黄曲霉毒素B,。经测定表明,
尽管对照组日粮不含有发酵大米,但其中黄曲霉毒素B,的含量也达到了
2099/kg,这就更充分表明了饲料中添加黄曲霉毒素吸附剂的必要性。
4.4.2肝脏
肝脏是最易受黄曲霉毒素毒害的器官,黄曲霉毒素在肝脏内代谢,最
终生成B-.还原型谷胱甘肽络合物,其毒性被中和,随后从胆汁、尿液排
除体外。Sadi等(2000)研究指出,黄曲霉毒素在死鸡的肝脏中的残留量
的平均值为0.5199/kg。本研究中,试验1组鸭肝脏中黄曲霉毒素Bl的残
留量为0.26p,g/kg,添加0.25%和0.5%AAN可使肝脏中黄曲霉毒素B1的
残留量降低84.62%、88.46%(P0.05),32.72%(P<0.05),25.51%(PO.05),ascomparedwithcontrol,T1,T2,T4,respectively.Adding
o.25%AANincreasedADGby24.47%(P<0.05)and17.20%(P0.05),3.69%(P<O.01),2.01
%(P<0.01),1.55%(P<0.05)higherthanthatncontrol,T1,T2,T4,
respectively.IncontrasttoT1,T2andT4,PDECincontrolwasincreasedby
2.55%(P0.05),0.45%(P>0.05),respectively.Theaddition
ofO.5%AANimprovedPDBby16.77%(P<0.01),41.90%(P<0.01),54.24%
(P<O.01)and12.20%(P<0.05),ascomparedwithcontrol,T1,T2and4,
respectively.PDBinT1andT2weresignificantlylowerthanother
groups.PDAFincontrolwasthehighest,andby45%(P<0.01),37%
(P0.05),41.5%(P<0.01),ascomparedwithTl,T2,T3
andT4,respectively.PDAFinT3washigher26.7%(P0.05),23.6%(P<0.05)thanT1,T2andT4,respectively.PDAFinT1was
thelowestinallgroups.
TheresultsofselectedvisceraindicatedthatPDLinT1washigher26.6
%(P0.05),24.1%(P<0.01),21.7%(P<0.01)than
control,T2,T3,T4,respectively.PDLinT2washigher20.5%(P<0.01),18.1
%(P<0.01),15.7%(P<0.01)thancontrol,T3,T4,respectively.Similarly,PDK
inT1washigher21.9%(P0.05),17.1%(P0.05)thancontrol,T2,T3,T4,respectively.Thevaluesntheother
groupswerenotsignificant.PDPinT1washigher51.4%(P<0.01).14.3%
(P<0.05),30.2%(P<0.01),24.4%(P<0.01)thancontrol,T2,T3,T4,
respectively.PDPinT2washigher32.4%(P0.05),8.9
%(P>0.05)thancontrol,T3,T4,respectively.PDHinfivegroupswerenot
significant.
—— 丝兰兰堡丝苎
Theresultsofdigestiverialwereasfollows.Theapparentdigestibilities
ofCPwasdecreasedby9.53%(PO.05),15.66%(P0.05),ascomparedwithcontrol,T2,T3ans 4.Therewerenot
significantdifferecesoftheapparentdigestibilitiesofEE,A h,CaandPin
fivegroups.However,consumptionofO.5%AANroducedaupwardtendency
oftheapparentdigestibilitiesofCP,EEandCa.Theapparentdigestibilitiesof
allnutrientsi T1 werethelowest.
Theresultsofdigestenzymesactivitiesinduodenalcontentsshowedthat
theactivityoftotalproteasein allgroupswerenosignificant.
Supplementationwith0.5%AANdecreasedthactivityofchymotrypsinby
28.25%(P<0.01),25.48%(P<0.01),31.80%(P<0.01),ascomparedwith
control,T1and2,respectively.Supplementationwith0.25%AANdecreased
theactivityofchymotrypsinb 24.16%(P<0.01),21.24%(P<0.05),27.92
%(P<0.01)ascomparedwithcontrol,T1andT2,respectively.Asforthe
activityoftrypsin.theadditionof0.5%AANdecreaseditby27.32%
(P<0.05),25.83%(P<0.05),24.08%(P<O.05),ascomparedwithcontrol,
T1andT2.respectively.TheadditionofO.25%AANdecreaseditby27.57%
(P<0.01),26.09%(P<0.05),24.38%(P0.05),28.89%(P0.05),ascomparedwithcontrol,
T1andT2.respectively.AndthisvalueinT4wasdecreasedby10.22%
(P>0.05),18.09%(P0.05),ascomparedwithcontrol,T1
andT2,respectively.
Serumbiochemicalpar metersanalysisindicatedthatheactivityof
glutamic-oxaloaceticrGOT) ransaminaseinT1washigher13.45%
(P<0.05),16.66%(P0.05)血ancontrol,T3,T4,
respectively.theactivityofGOTinT2washigher16.21%(P<0.05),16.66
%(P<0.05).13.76%(P<0.05)thancontrol,T3,T4,respectively.Therewas
nosignificantdifferencebetweenT1a dT2.Theactivityofglutamic—pyruvic
—— 翌兰堂丝塑墨.
transaminase(GPT)washigher43.52%(P<0.01),19.07%(P<0.05),32,37
%(P<O.01)and45.76%(P<0.01)thancontrol,T2,T3andT4;theactivitvof
GPTinT2wasalsohigher20.53%(P0.05)and22.4I
%(P<0.05)thancontr01.T3and4.Therewerenosignificantdifferencesi
fivegroups.Incontrasttocontrol,T2,T3andT4,theactivityofamylasein
T1wasincreasedby21.94%(P<0.05),9.52%(P0.05),10.23%(P<0.05),respectively.IncontrasttoT3andT4,the
activityofamylaseincontrolwasdecreasedhy12.61%(P<0.05).9.61%
(P<0.05),respectively.Theconcentrationoftotalprotein(TP)inT4was
lower9.78%(P<0.05)and8.96%(P<0.05)thanthainT2andT3.
respectively..Theconcentrationof lbumininT2andT3werehigher1O.85%
(P<0.05)and9.45%(P<0.05)thanthainT1。respectively.Incontrastto
T2.theconcentrationofuricacidinT4wasincreasedby40.17%
(P<0.05),andtherew renosignificantdifferencesi thotherg oups.The
levelsofglucoseinT3andT4weredecreasedby17.22%(P<0.05)and18.57
%(P<0.05),ascomparedwithcontrol,respectively,anddecreasedby12.60
%(P<0.05)and14.02%(P<0.05),ascomparedwithT1,respectively.In
contrasttocontrolandT1,thel velofuricacidinT2wasdecreasedby10.10
%(P0.05),respectively.There ultsofcholesterolshowed
thatthelevelsofcontr01.T1andT2werelower24.58%(P<0.01),25.60
%(P<0.01),18.81%(P<0.01)thanT3,respectiVely,andw relower20.7
%(P<0.01)。21.78%(P<O.01)and14.64%(P<0.01)thanT4,respectively.The
concentrationof riglyceridesinTlwas creasedby15.75%(P0.05),15.75%(P<0.05),13.71%(P0.05),10.24%(P>0.05),8.04%(P>0.05)as
comparedwithcontrol,T3and4,respectively.
Theresultsoflevelsoftraceelementsinserumindicatedthatthelevels
ofCu.FeandZninseruminallgroupshadnosignificantdifferences.The
———————————————————堕兰兰丝丝苎
additonof0.5%AANincreasedthlevelsofCu,FeandZninserum.as
comparedwithcontrol,littly.
TheresultsoftheconcentrationofflatoxinBl inserum,liver,kidneyand
breastmusclewereasfollows.IncontrasttoT1,theconcentrationofnatoxin
B1in liverincontrol,T2,T3andT4weredecreasedbv42.31%
(P>0.05),69.23%(P<0.05),84.62%(P<0.01)and88.46%(P0.05)and80.00%(P>0.05).ascomparedwith
control,respectively,anddecreasedby50%(P>0.05)and62.5%(P>0.05).as
comparedwithT2,respectively.IncontrasttoT1,theconcentrationof
aflatoxinBl nkidneyincontrol,T2,T3and4weredecreasedby26.32%
(P<0.05),56.14%(P<0.01),71.93%(P<0.01)and70.18%(P<0.01)
respectively.Incontrasttocontrol,theconcentrationofflatoxinBI inkidney
inT2,T3andT4wered creasedby40.48%(P<0.05),61.9%(P<0.01),59.52
%(P<0.01).respectively.TheconcentrationofaflatoxinB1inseruminT3
andT4werelower66.94%(P<0.01)and49.59%(P<0.01)thanT1.
respectively.andwerelower60.40%(P0.05)than
control,respectively,andwerelower61.90%(P<0.01)and41.90%(P<0.05)
thanT2,respectively.TheconcentrationofflatoxinBlinbreastmuscleinT3
wasdecreasedby40.54%(P<0.05),48.84%(P<0.01)and56%(P< .01),as
comparedwithcontrol,T1 andT2,respectively.Theconcentrationof
aflatoxinB1inbreastmuscleinT4wasdecreasedby64.86%(P<0.01).69.77
%(P<0.01)and74.00%(P<0.01),aseomparedwithcontrol,T1andT2,
respectively.
Theresultsofthisstudyimplicatedasfollows.AANcouldsignificantly
reducethetoxicityofaflatoxinBlo Cherryduck,andimprovedthgrowth
performance.Moreover.theefficacyofO.5%AANwasthemostbest.Feeding
aflatoxinB1一contaminated etswithAANcouldalleviatethepathological
changesofliver,kidney,spleen,heartandpancreas,anddecreasetheswelling
硕士学位论文
degreeoftheseorgans.AANdecreasedth levelsofGOTandGPTin
serum,andi creasedtheconcentrationofTP,ALB,CHLandTG3in
serum.whichindicatedthatAANcouldsignificantlyamelioratethefunction
ofviscerao gans.AANdepressedthresiduaof flatoxinB1 viscera.In
summary,addingAANresultedinalmostto alprotectionagainsttheffects
causedbyaflatoxinB1.
Keywords:aflatoxinBl,AAN,bentonite,CherryValleyducks,
growthperformance,digestiveenzyme,internalorgan,pathological}

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