QuickCUT酶是根据什么酶作用的基本原理是什么达到不同的酶采用相同的缓冲液的

点击联系发帖人 时间：2020-12-23 11:44
酶作用的基本原理是什么
□ 活性测定用底物：λ DNA
□ 甲基化嘚影响：根据识别序列后续碱基的不同有时受CG methylase影响。
□ Star活性：高甘油浓度、Mn2+存在、低离子强度条件下识别序列会发生变化。如果在反應液中添加Spermine (0.2 mM左右)活性降低20～30%，但可以抑制30～50%的Star活性
1) 不建议进行1 hr以上酶切，易导致星活性
2) 使用QuickCut限制酶进行双酶切或多酶切反应时，加叺限制酶的总体积不能超过反应体系的1/10量；如果各酶的反应温度不同建议按低温到高温的顺序加入相应的QuickCut限制酶进行分步酶切反应。
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