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鸽腺病毒的鉴别与防治
作者：李浩&
来源：原创&
&&分类：养鸽感悟
&发布时间： 18:21:43 &
　　腺病毒(adenovirus)是一种没有包膜的直径为70～90 nm的颗粒，由252个壳粒呈廿面体排列构成。每个壳粒的直径为7～9 nm。衣壳里是线状双链DNA分子，约含35 000 bp，两端各有长约100 bp的反向重复序列。由于每条DNA链的5，端同相对分子质量为55X103Da的蛋白质分子共价结合，可以出现双链DNA的环状结构。人体腺病毒已知有33种，分别命名为adl～ad33，研究得最详细是ad2。腺病毒基因组转录产生mRNA，已知的转录单位至少有5个：正I区位于病毒基因组左侧，可再分成正工A和正工月，与细胞转化有关；正Ⅱ区编码DNA结合蛋白，参与病毒的复制；丘Ⅲ区编码出现在宿主细胞表面的一种糖蛋白；正Ⅳ区位于ad2基因组右端，受正Ⅱ区编码的DNA结合蛋白质调控；第5个转录单位在病毒感染中期合成ad2蛋白质Ⅳ。
　　腺病毒对啮齿类动物有致癌能力，或能转化体外培养的啮齿类动物细胞。使细胞转化只需要腺病毒基因组的一部分，这些基因位于基因组的左端，约占整个基因组的7％～10％。尽管腺病毒分布很广，但对人体不出现致癌性。人体细胞是一类允许细胞(permissive cell)，即这类细胞允许感染入侵的病毒在细胞内复制增殖，最后细胞裂解死亡而释放出大量子代病毒。在体外培养的多种人体肿瘤细胞中均未查出腺病毒颗粒，但在人的1号染色体上有adl2的整合位点，这意味着人体细胞对于腺病毒也可能是非允许细胞，即这类细胞在病毒感染后，病毒不能在细胞内复制增殖，但可整合在受感染细胞的基因组内。这些细胞被病毒转化，表型发生改变，且可在体外无限期地培养传代。
　　腺病毒是一种无外壳的双链DNA病毒，基因组长约36kb，衣壳（capsid）呈规则的20面体结构，直径约80-110nm。衣壳含有240个六联体（hexon）、12个五联体（penton）及12根纤毛（fiber），除此之外还有其他一些小蛋白，如VI、VIII、IX、IIIa和IVa2等。六联体是形成病毒衣壳20个三角形面的主要蛋白，12个顶端是5个五联体亚单位和3个纤毛蛋白构成的复合物，12根纤毛以五联体蛋白为基底由衣壳表面伸出，纤毛顶端形成头节区（knob）。五联体和纤毛的头节区可与细胞表面的病毒受体结合，在病毒感染细胞过程中起着非常重要的作用。腺病毒的基因组以线性的双链DNA形式存在，由蛋白VII和一种称为mu的小蛋白紧密地环绕在其周围，起到类组蛋白样的作用。另一种蛋白V将这种DNA-蛋白复合物连接起来，并通过蛋白VI与病毒衣壳连接在一起。在两条链的5′端各以共价键结合着一个被称为DNA末端蛋白（pTP）复合物（DNA-TPC）的特化的结构，与腺病毒复制密切相关。腺病毒基因组的两端各有一段100bp的反向末端重复序列（ITR），是复制的起始位点。在左端ITR的3′侧有一段长约300bp的包装信号（ψ）介导腺病毒基因组包装入病毒衣壳。对腺病毒而言，只有包括两端的ITR和包装信号（ψ）的约0.5kb的序列是顺式作用元件，也就是说必须由腺病毒载体自身携带，而其他的30余种蛋白都可以通过辅助病毒（或细胞）反式补足。
　　腺病毒载体的优点：
　　1. 宿主范围广, 对人致病性低
　　腺病毒载体系统可广泛用于人类及非人类蛋白的表达。腺病毒可感染一系列哺乳动物细胞，因此在大多哺乳动物细胞和组织中均可用来表达重组蛋白。特别需要指出的是：腺病毒具有嗜上皮细胞性，而人类的大多数的肿瘤就是上皮细胞来源的。另外，腺病毒的复制基因和致病基因均已相当清楚，在人群中早已流行（70-80%成人体内都有腺病毒的中和抗体存在）。人类感染野生型腺病毒后仅产生轻微的自限性症状，且病毒唑治疗有效。
　　2. 在增殖和非增殖细胞中感染和表达基因
　　逆转录病毒只能感染增殖性细胞，因此DNA转染不能在非增殖细胞中进行，而必须使细胞处于持续培养状态。腺病毒则能感染几乎所有的细胞类型，除了一些抗腺病毒感染的淋巴瘤细胞。腺病毒是研究原代非增殖细胞基因表达的最佳系统，它可以使转化细胞和原代细胞中得到的结果直接进行对比。
　　3. 能有效进行增殖，滴度高
　　腺病毒系统可产生VP/ml，浓缩后可达1013VP/ml，这一特点使它非常适用于基因治疗。
　　4. 与人类基因同源
　　腺病毒载体系统一般应用人类病毒作为载体，以人类细胞作为宿主，因此为人类蛋白进行准确的翻译后加工和适当的折叠提供了一个理想的环境。大多数人类蛋白都可达到高水平表达并且具有完全的功能。
　　5. 不整合到染色体中，无插入致突变性
　　逆转录病毒可随机整合到宿主染色体，导致基因失活或激活癌基因。而腺病毒则除了卵细胞以外几乎在所有已知细胞中都不整合到染色体中，因此不会干扰其它的宿主基因。在卵细胞中整合单拷贝病毒则是产生具有特定特征的转基因动物的一个较好的系统。
　　6. 能在悬浮培养液中扩增
　　293细胞可以适应悬浮培养，这一调整可使病毒大量扩增。大量事实证明悬浮293细胞可在1～20L的生物反应器中表达重组蛋白。
　　7. 能同时表达多个基因
　　这是第一个可以在同一细胞株或组织中用来设计表达多个基因的表达系统。最简单的方法是将含有两个基因的双表达盒插入腺病毒转移载体中，或者用不同的重组病毒共转染目的细胞株来分别表达一个蛋白。测定不同重组病毒的MOI比值可正确估计各重组蛋白的相对共表达情况。
　　正是由于具有以上一些优点，腺病毒被极其广泛地应用于体外基因转导、体内接种疫苗、和基因治疗等各个领域。
　　分类及致病性
　　分类及自上个世纪50年代发现并成功分离腺病毒以来，已陆续发现了100余个血清型，其中人腺病毒有47种，分为A、B、C、D、E和F六个亚群（subgroup）。基因治疗常用的人的2型及5型腺病毒在血清学分类上均属C亚群，在DNA序列上有95%的同源性。二者的增殖能力非常强，滴度通常可以达到109pfu (plaque forming unit)/ml，其在单个细胞中的基因组拷贝数可达104（约占细胞总DNA的10%）。病毒颗粒比较稳定，通过CsCl梯度离心可以达到pfu/ml，满足动物实验的要求。
　　2型和5型腺病毒的致病性主要表现为可以导致儿童上呼吸道感染。在感染的最初几天，由于病毒大量复制和释放，会出现中度发热、浑身酸痛、乏力、咽痛等症状。但这些症状通常是比较短暂而轻微的，在以后的几天里，会随着中和抗体的产生而逐渐消失。虽然可以说高滴度和高免疫原性是腺病毒的主要特点，但也是相对的，如8型腺病毒（主要感染小肠和结膜组织）可以在扁桃体等淋巴组织中潜伏下来。在C亚群的其他一些腺病毒中也可以见到同样的现象，这是因为病毒的E3区编码的功能可使其逃避宿主的免疫打击。这似乎有助于理解为何腺病毒载体在造血系细胞中的基因转导效率明显低于其他组织、细胞。
　　腺病毒的生活周期
　　腺病毒的生活周期可以分为两个截然不同却又不能割裂开来的两个阶段。第一阶段包括腺病毒颗粒粘附和进入宿主细胞，将基因组释放到宿主细胞核中，以及有选择性地转录和翻译早期基因。在这个阶段，细胞为病毒基因组复制和腺病毒晚期基因表达并最终释放成熟的感染颗粒，即第二阶段，作好了准备。第一阶段将在6~8个小时内完成，第二阶段则更快，只需4~6个小时。
　　粘附和进入细胞
　　腺病毒感染细胞的过程是从腺病毒纤毛的头节区粘附到细胞表面的特异性受体开始的。因为人腺病毒主要与柯萨奇B病毒共用一种受体，因此这种受体被称为柯萨奇/腺病毒受体即CAR（coxsackie/adenovirus receptor）。接下来病毒纤毛基底部五邻体表面的三肽RGD与细胞表面的αvβ3和αvβ5整合素结合，通过内吞作用将腺病毒内化到细胞中并进入溶酶体。在溶酶体的酸性环境下，腺病毒衣壳的构象将发生变化，被从溶酶体中释放出来，躲过溶媒体的消化作用。最后，腺病毒颗粒转位到细胞核，通过核孔将病毒DNA释放到细胞核内。相对于脂质体转染，腺病毒基因组进入细胞核是一个非常高效的过程，一般可以达到40%，前者虽然进入胞质的效率与后者相当，而DNA进入细胞核的效率却只有前者的1/1000。
　　转录与复制：
　　一旦病毒基因组进入细胞核，就将进行一系列的复杂而有序的逐级放大的剪切和转录过程。一般的，以病毒DNA开始复制为分界线，按转录时间的先后，将腺病毒基因大致区分为早期（E1~4）和晚期转录单位（L1~5）。各种腺病毒基因又可以进一步地分为更小的转录单位，如E1区可以进一步分为E1A和E1B，每个转录单位都至少有一个独特的启动子。腺病毒基因组进入细胞核后，细胞转录因子首先与E1A区上游的增强子结合，表达E1A蛋白，该蛋白的作用是调节细胞代谢，使病毒DNA更易于在细胞中复制。E1A蛋白还可以激活其他早期基因（E1B、E2A、E2B、E3和E4）的启动子，其中E2B驱动另外三个与病毒复制有关的早期基因转录单位末端蛋白前体（pTP, precursor terminal protein）、单链DNA结合蛋白（ssDBP, single-stranded DNA binding proteins）以及DNA聚合酶（DNA pol, DNA polymerase）的表达，这三个基因的表达产物紧密地结合成一个复合物，与至少三种细胞蛋白相互作用，启动病毒基因组的复制。
　　一般而言，DNA的复制是由RNA启动的，而在腺病毒却是所谓的蛋白启动（protein-priming）。如前所述，腺病毒双链DNA的每条单链的5′端有pTP蛋白结合，pTP通过其Ser-OH与DNA 5′端的dCMP 5′磷酸之间形成磷酸二脂键。腺病毒的DNA复制首先是以5′端结合有pTP的dCMP作为引物，以3′端的末端反向重复序列（ITR）为模板，进行链置换（strand displacement）合成，置换出的单链分子可以自我退火环化，形成锅柄样环形分子，然后这种环形分子再以相同的机制合成出子代双链DNA分子。
　　病毒基因组复制通常在感染后数小时开始，同时早期基因的转录和翻译被关闭，晚期基因开始表达。大部分的晚期基因的转录是以一个共同的主要晚期启动子（MLP, Major Late Promoter）调控的。实际上，MLP的活性与病毒基因组复制密切相关，有研究表明一旦腺病毒基因组开始复制MLP的活性将明显增强，对此我们将另外行文详述。晚期基因主要编码腺病毒的结构蛋白。病毒结构蛋白在细胞核内聚集形成病毒衣壳，病毒的基因组被包装进去，形成有感染能力的病毒颗粒，并最终裂解宿主细胞被释放出去，完成腺病毒的生活周期。腺病毒有明显的种属特异性，人的野生型5型腺病毒（wtAd
　　5）感染其他的非人类细胞（如鼠类细胞）后可以表达早期基因，基因组也可有一定程度的复制并能够形成一些不成熟的病毒颗粒，却不能形成成熟的病毒颗粒，也不能二次感染其他细胞。
　　腺病毒基因产物的主要功能
　　E1区基因表达产物
　　可以进一步分为E1A和E1B。E1A主要由两种成分构成，分别为289R（或13S）和243R（或12S）。这些E1A蛋白的主要功能是调节细胞代谢，使细胞对病毒复制更易感E1B19K与细胞Bcl-2基因的表达产物同源，可以通过灭活和清除Bax家族成员来防止细胞发生凋亡或坏死。E1B55K基因产物可以下调p53基因的转录水平，当然这种调节功能不是绝对的，其他一些腺病毒基因（如E4 orf6）也参与了这一过程。另外，E1B55K基因产物还与病毒复制、病毒晚期mRNA的转录以及病毒RNA的转运有关。
　　E2区基因表达产物
　　可分为E2A和E2B。其中，E2A即DNA结合蛋白（DBP，DNA Binding Protein）；E2B主要产物有两种，分别是末端蛋白前体（pTP）和病毒DNA聚合酶（pol）。三种蛋白与至少三种细胞内的因子相互作用，启动腺病毒DNA复制以及病毒晚期基因的转录和翻译过程。
　　E3区基因表达产物
　　主要功能是破坏宿主的免疫防御机制，而与病毒基因组的复制无关。E3基因的产物之一11.6Kd，由于可以在病毒感染的晚期裂解细胞并释放病毒颗粒而被称为腺病毒死亡蛋白（ADP，adenovirus death protein）。gp 19K蛋白可以在内质网上与MHC I类分子的重链结合阻止其转运到细胞表面，并且可以延缓MHC I的表达。RID α&β以及14.7Kd可以抑制由TNF诱发的细胞凋亡，促进Fas降解，下调TNF受体水平。
　　E4区基因表达产物
　　E4区的基因产物通常被称为orf 1~6/7，主要与病毒信使RNA的代谢有关。还有促进病毒DNA复制以及关闭宿主蛋白合成的功能。研究发现，一些E4产物可以与DNA激活的蛋白激酶结合，防止病毒DNA发生串联。由于该激酶可以激活p53基因，因此可以认为一些E4区基因产物可以抑制细胞凋亡。许多E1B和E4基因产物都与拮抗E1A蛋白功能有关。比如，E4 orf4抑制E1A对E2F启动子的激活；E4 orf3VA RNA使一些由腺病毒转录的非翻译RNA，与腺病毒抵抗宿主细胞免疫有关。
腺病毒的治疗方案
腺病毒的治疗方案
欧吐大多数是腺病毒造成的。有可能是腺病毒与沙门氏一并感染。腺病毒通常与沙门氏一并感染
治疗方案：
1、病鸽隔离，全棚消毒。
2、不给病鸽喂食，因为鸽子患有腺病毒时一吃饲料就会呕吐，所以一般的鸽子只一两天不喂食，就能消除呕吐症状。鸽子会慢慢产生抗体。
3、用氟派酸粉剂（此药一般各地兽医站有卖，剂量参照鸡用量）兑水给鸽子全天饮用，每天早晚各给鸽子塞一粒敌菌净和VC。待症状好转后（粪便成形、精神转好）停药，并给鸽子用制菌粉拌食给鸽子吃。
4、等到两天后再喂食，给食玉米30%、稻谷或大麦70%，此喂食方法有助于病鸽粪便成形。
5、市售鸽用广谱抗病毒活性药物主要是病毒唑利巴韦林），由于病毒唑能抑制病毒合成酶，从而达到阻止病毒的复制作用，病毒唑对于腺病毒也较为敏感，每次使用剂量仅需８滴，加上左右眼各１滴，同时滴鼻，每天１次，连续使用５天，这样它就足以将９５％以上停留在鼻、咽、食道、嗉囊等黏膜上的病毒杀灭，达到明显避免发病、减轻发病症状，并有效地降低死亡率。(注意是用注射用利巴韦林,方法不是喝水,是滴鼻)
感染过腺病毒的鸽子通常会产生很好的抗体保护，在短时间内不会再重复感染，但仍要注意是否完全复原，如肾脏及肠管的功能有否因其他并发症或处理不当而影响恢复。本病尚无疫苗，平时须做好健康维护，勿让鸽子过度疲劳，注意鸽舍通风，干燥及定期消毒。
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百科词条： （最后修订于 0:42:40）[共234字]摘要：腺病毒群adeno－associatedvirus缩写AAV。亦称腺附属病毒（adeno－satellitevirus，ASV）。属细小病毒属，是最小型的病毒之一，病毒质粒直径18—25毫微米，其中含有分子量为1.5×106的单链DNA。是由艾奇逊等（R．W．Atc－hison）于1965年从猴，以后又从人的腺病毒材料中分离到的。单独存在时不具有自我增殖能力，所以在增殖过程中必须和辅助性病毒——腺病毒共同存在才行。从血清学方面现可分为四种，但有关其病原性尚不明瞭。......&&&
相关文献：)的治疗关节炎药物破坏的，该药物能够激活一种名为骨疽肿瘤α(TNF-α)的分子。　　最近，该公司公布了他们联手企业外的研究者通过一系列调查研究所得出的最新测试结果。这项新测试排除了由于基因治疗导入腺病毒群并使之在病人体内大量繁殖的可能性。尽管在体内其他组织发现了携带病菌的DNA，但其含量非常低。　　来自伊利诺斯州芝加哥大学的内科医师KyleHogarth说：“从我们所掌握的知识来看，基因治疗并没有分别为15.21%、14.53%和6.43%，其高三学生多在校外租房居住；17、18、19和20岁学生罹患率分别为32.33%、30.02%、17.78%和5.31%；易点高中教师发病1人，高中周围群众发病4人，医生发病2人，其他学校学生发病41人；全部病例男女发病比为2.3∶1。3．2时间分布3月6日出现首发病例，19日病例数大幅增加。4月7日学生放假，20日发病降至0，之后断续发病至28日。日中华急诊医学杂志2005Vol.14No.12P.（武汉）为了观察KGFR腺病毒表达载体在脂多糖(LPS)致A549细胞损伤模型中转基因表达KGFR的情况及其促使A549细胞对抗LPS损伤的效果，为基因治疗急性肺损伤探索有效途径。研究者KGFR腺病毒表达载体感染LPS致伤前后的A549细胞，通过形态学观察转基因作用对LPS致伤前后A549细胞的影响，并本报广东讯腺病毒（ADV）是可导致人类呼吸系统感染的DNA病毒。腺病毒感染好发于儿童。最近，广州中山大学附属第二医院儿科李静等在一项分析124例因腺病毒感染住院患儿的临床资料时发现，儿童腺病毒感染病情较以往报道的病例有减轻的趋势，而临床表现却更趋向多样化，故对发热患儿应做腺病毒病原学检测，以提高此病的确诊率。　　腺病毒是儿童呼吸道感染的一种常见病原体，主要通过呼吸道、胃肠道和眼结膜等途径传播；临近期，中科院武汉病毒所石正丽研究员领导的科研团队采用第二代高通量测序技术，对蝙蝠腺病毒BtAdV-TJM感染蝙蝠细胞系的转录谱做了系统的分析，提供了一套完整的蝙蝠腺病毒复制过程中病毒基因表达的动态分布。结果发表在2013年第1期JournalofVirology上。腺病毒广泛存在于脊椎动物包括人和非人类灵长动物，能引起人呼吸道和肠道疾病。由于其良好的免疫原性，腺病毒被开发为疫苗和基因治疗的载体。概述肠腺病毒是婴幼儿腹泻的重要病原体。属于普通腺病毒的40、41血清型，外形与普通腺病毒相同，为直径70～80nm的双链DNA病毒，主要侵犯婴幼儿，通过人与人的接触传播，也可经粪—口途径及呼吸道传播。本病无明显季节性，夏秋季略多。可呈暴发流行。临床表现为较重的腹泻，稀水样便，每日3～30次不等。常有呼吸道症状。如咽炎、鼻炎、咳嗽等，发热及呕吐较轻，可有不同程度的脱水征。病程8～12天。多数患儿病据新华社讯美国科研人员发现，一种常见病毒能使成人干细胞变胖，从而成为导致某些人肥胖的“元凶”。　　路易斯安那州立大学彭宁顿生物医学研究中心科研人员说，腺病毒－36不仅是一种能使呼吸系统和眼睛感染的常见病毒，还是能导致某些人肥胖的“胖病毒”。　　科研人员从吸脂手术后胖人的脂肪组织里抽取成人干细胞样本。然后，再把其中一半干细胞暴露在腺病毒－36下。一周过后，大多数感染了腺病毒－36的干细胞长成了肥胖日中国医药报许多人都知道，肥胖是由饮食习惯、神经、内分泌、药物、遗传、先天疾病等因素造成的，却不知道病毒感染也是导致肥胖的因素之一。新近，有科学研究证实，腺病毒(Ad-36)感染可致人肥胖。2007年美国化学学会(ACS)在波士顿举行的年会上，Pennington生物医学研究中心发布了这一研究成果。由此，“感染性肥胖”成为了目前的一个新兴概念。　　上世纪80年代，动物学家发现许多人都知道，肥胖是由饮食习惯、神经、内分泌、药物、遗传、先天疾病等因素造成的，却不知道病毒感染也是导致肥胖的因素之一。新近，有科学研究证实，腺病毒(Ad-36)感染可致人肥胖。2007年美国化学学会(ACS)在波士顿举行的年会上，Pennington生物医学研究中心发布了这一研究成果。由此，“感染性肥胖”成为了目前的一个新兴概念。　　上世纪80年代，动物学家发现，感染了禽流感病毒的鸡不仅没有瘦第三节　腺病毒　　腺病毒（Adenovirus）是一群分布十分广泛的DNA病毒。能引起人类呼吸道、胃肠道、泌尿系及眼的疾病。少数对动物有致癌作用。　　一、生物学性状　　腺病毒颗粒直径60～90nm，没有囊膜，20面体立体对称，衣壳由252个克微粒组成，其中240个壳微粒是六邻体(Hexon)，具有组特异性α抗原。位于20面体顶端的12个克微粒是五邻体(Penton)。每个五邻体由基底和伸出表面的日健康报新近的科学研究表明，腺病毒感染可致肥胖。在波士顿举行的美国化学学会年会上，Pennington生物医学研究中心发布了上述研究成果。　　目前许多人已知道肥胖是由不良生活方式、神经和内分泌等因素造成的，却不知道病毒感染也是肥胖的因素之一。　　早在上世纪80年代，动物学家发现感染了禽流感病毒的鸡不仅没有消瘦，反而体重增加了。这一现象使科学家第一次意识到，肥胖可能与病毒感染有日（医业网）研究结果显示，甚至在有免疫能力的儿童中，呼吸道感染腺病毒时伴发血尿的也相当常见。但多数病人血尿是良性的。澳大利亚悉尼儿童医院的两名研究人员艾伦（C.W.Allen）和阿历克山大（StephenI.Alexander）在发表于3月《儿童期疾病文献》（ArchDisChild-306）上的报告中指出，腺病毒感染曾被报告引起了免疫低下儿童的急性出血日中华老年医学杂志2006Vol.25No.6P.455-45811（上海）为了研究血管生成素相关蛋白2重组腺病毒(Ad.ARP2)体外的转染效率、产物表达和其表达产物对血管内皮细胞分化的作用。研究者体外培养扩增ICR小鼠心脏冠状动脉毛细血管内皮细胞(CMECs)，通过免疫荧光染色评价人腺病毒转染CMECs的转染效率；应用Westernblot和ELISA方法检测ARP2在细日中华中医药杂志2006Vol.21No.11P.658-6608（厦门）为了探讨清肺口服液含药血清对腺病毒3I、7b感染的人胚肺成纤维细胞Fas、FasL表达的影响。研究者将细胞分为正常细胞组、病毒对照组、空白血清组、利巴韦林组和含药血清组，除正常细胞组外，其余4组均以3I、7b型腺病毒分别攻击，并分别加入相应药物至各组细胞中；用流式细胞仪检测比较各组细胞Fas、FasL蛋复制缺陷型鼠IL-3重组腺病毒的构建和鉴定免疫学杂志1999年第4期第15卷基础免疫学作者：刘林罗成基袁良平粟永平单位：刘林（第三军医大学新桥医院血液科重庆400037）；罗成基袁良平粟永平（第三军医大学复合伤研究所）关键词：白细胞介素3腺病毒载体基因治疗摘要构建以CMV启动子控制鼠IL-3基因表达的复制缺陷型腺病毒（AdCMVIL-3）。将含全部编码序列的鼠IL-3cDNA克隆于腺病毒穿梭质粒日中华肿瘤杂志2006Vol.28No.1P.13-1628（北京）为了探讨复制缺损型腺病毒载体(Ad)介导异种AFP修饰的树突状细胞(DCs)诱发抗肝癌免疫、打破肿瘤免疫耐受的效果。研究者从HepG2和Hepa1-6细胞中克隆人和小鼠AFP，插入Ad中作者：622-6242（广州）为了探讨野生型p53基因联合阿霉素对肺癌化疗药物敏感性的影响及导入外源性野生型p53基因对肺癌原发性耐药的影响。研究者以携带野生型P53基因的复制缺陷型腺病毒(p...作者：日ArchDisChild-3064腺病毒感染曾被报告引起了免疫低下儿童的急性出血性膀胱炎，对免疫系统正常的儿童血尿被认为是一种罕见临床表现。研究人员回顾性地分析了送到他们医院急诊科后被诊断为腺病毒感染的儿童的资料，43人采集了尿样，其中8人被发现有血尿（18.6%）。没人有泌尿系症状，血尿也没引起临床症状。6人的血尿显微镜下才可见，2人肉眼可见。2名肉《中华传染病杂志》2007年第25卷第8期中国研究者构建了表达HCV非结构蛋白3（NS3）的重组腺病毒RAd／NS3，探讨其免疫小鼠后诱导机体产生特异性免疫应答的能力。研究者通过PCR扩增编码NS3蛋白（329～935位氨基酸）的基因片段，定向克隆至重组腺病毒AdEasy-1系统的穿梭质粒pAdTrack-CMV上，与腺病毒基因组质粒pAdEasy-1共转化BJ5183菌，利用细菌内同源重组获得美国Kataram等报告,在体外,腺病毒介导的黑色素瘤分化相关基因-7(Ad。mda-7)整合了RGD功能域(Ad。RGD。mda-7)或RGD和Pk7功能域(Ad。作者：com）4月9日消息，该项研究目的是研究腺病毒介导的HBsAg基因修饰树突状细胞（DC）体外诱导对HepG2．2．15肝癌细胞特异性的细胞毒效应。方法采用将HBsAg基因亚克隆到pIND和pShuttle载体中，构建重组载体pShuttle-S。将用PI-SceI和I-CeuI双酶切后所获得的HBsAg基因片段与线性化的腺病毒载体pAdeno-X连接，构成腺病毒表达载...作者：【摘要】目的应用细菌内同源重组高效制备p53基因重组腺病毒。方法设计引物扩增p53基因，在上下游引物分别引入Xhol和HindⅢ酶切位点，将p53基因亚克隆连接到经相同酶切的pshuttle-cmv转移质粒上，转化DH5α筛选卡那霉素抗性菌落构建重组腺病毒转移质粒pshuttle-cmv-p53用Pmel酶切线性化采用两步法进行同源重组：先将腺病毒骨架质料pAdEasy-1转化氯化钙法制备的BJ007年29卷6期-405-410页医学空间（）2月4日消息，目的构建表达融合基因TGF-βⅡ型受体（TβR—Ⅱ）胞外区及活化T细胞表达和分泌的调节因子（RANTES）重组腺病毒载体，并观察其抗肿瘤作用。方法RT—PCR扩增小鼠TβR—Ⅱ胞外区和RANTES基因，重叠PCR扩增融合基因TβR-Ⅱ胞外区·RANTES。采用adMaxadenovirusvectorcreat日中华耳鼻咽喉头颈外科杂志2006Vol.41No.3P.176-1809（重庆）为了获取人嗜酸粒细胞亲合素(Eotaxin)N端突变体(Met/Eotaxin)重组腺病毒，探讨其在小鼠变应性鼻炎中的作用。研究者从人外周血单个核细胞总RNA中克隆人400bp的Eotaxin基因,通过N端点突变获取Met/Eotaxin基因，构建pAdtrack-CMV-Met/Eotaxin上海瑞金医院消化科结合10多年的超声内镜检查经验，完成一例超声内镜（EUS）引导基因重组人5型腺病毒植入治疗一例晚期胰腺癌患者。后期疗效观察证明了该治疗具有缩小肿瘤体积、破坏肿瘤新生血管的作用，从而有望为晚期胰腺癌患者提供一种新的治疗手段。据了解，超过80％的胰腺癌患者在明确诊断后已是晚期，丧失了手术时机，即使接受放化疗的治疗效果也极其有限。针对这部分被医学“放弃”的患者，瑞金医院消化科主任医生关键词：人类腺病毒；遗传性疾病；基因疗法　　人类腺病毒（Adenouirus,Ad）是一群分布广泛的呼吸道病毒，A:60～90nM，无包膜，20面体立体对称型。分为大约47个血清群，其中Ad2、Ad4、Ad5和Ad7在疫苗和基因转移载体研究方面，应用最普遍。腺病毒粒子衣由252个壳粒组成，几何排列成240个非顶角六邻体和12个五邻体。基因组为双股DNA，呈线性，长度大约36kb。腺病毒的转录区分日中华传染病杂志2006Vol.24No.1P.3-611（上海）为了以血清学方法证实2004年江苏省苏北地区中小学生腺病毒3型急性呼吸道感染的暴发流行。研究者应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测患者急性期IgM抗体、恢复期IgG抗体；应用中和试验方法检测患者急性期、恢复期血清和未患病学生对照血清的中和抗体，并应用SPSS11.0软件对试验数据进行统计分析。结果患者急性期Ig日《中华肿瘤杂志》-期-728-732页医学空间（）4月9日消息，该项研究目的是研究腺病毒介导的HBsAg基因修饰树突状细胞（DC）体外诱导对HepG2．2．15肝癌细胞特异性的细胞毒效应。方法采用将HBsAg基因亚克隆到pIND和pShuttle载体中，构建重组载体pShuttle-S。将用PI-SceI和I-CeuI双酶切后所获的保护作用。研究者按肺移植供肺获取和保存方法，对家兔的肺进行获取、保存，然后采用体外循环装置，建立体外肺缺血再灌注损伤模型。共分为3组，分别在手术前48h从耳背静脉注入生理盐水、含标记基因Laz的腺病毒载体(Ad/LacZ)、重组人bcl-2正义腺病毒载体(Ad/s-bcl-2)。结果Ad/s-bcl-2可使肺组织中bcl-2Mrna表达增加，使肺组织中超氧化物歧化酶(SOD)含量升高，丙二醛(日中华外科杂志2005Vol.43No.15P.（哈尔滨）为了探讨野生型p53基因通过重组腺病毒转染至结直肠癌细胞后对放射治疗(放疗)的增敏作用。研究者将含野生型p53基因的重组腺病毒转染SW480结直肠癌细胞后，采用4、6Gy对其进行放疗。并通过噻唑蓝比色法检测生长抑制率、末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记检测细胞凋亡水平、免疫组化检测增殖细日中华整形外科杂志2006Vol.22No.1P.59-628（上海）为了探讨BMP7腺病毒转染对骨髓基质干细胞(BMSCs)的体外、体内成骨功能的影响。研究者用重组骨形成蛋白7腺病毒(adenovirusbonemorphogeneticprotein7，Adeno-BMP7)转染(M.O.1=100)70%～80%融合时的第二代的羊骨髓基质干细胞，3d后分别进行免疫印迹(腺病毒介导人B7-1基因对肝癌细胞免疫原性的影响免疫学杂志2001年第1期第17卷基础免疫学作者：王征旭何振平　吴祖泽单位：王征旭何振平（第三军医大学西南医院肝胆外科，重庆　400038）；吴祖泽（军事医学科学院放射医学研究所百环生物医学研究中心，北京　100850）关键词：肝细胞肝癌；腺病毒多基因；B7-1；基因治疗；免疫原性　　摘　要：目的　研究同时含人p53、GM-CSF、B7-1、IL-通过美国政府资助的100万美元经费，罗彻斯特大学（UniversityofRochester）微生物学和免疫学副教授BaekKim率领的研究小组最近获得了一种新型的治癌腺病毒（adenovirus）载体，能够帮助胰腺癌患者自身产生消灭癌细胞的免疫分子或免疫细胞，避免了有副作用的化疗。研制增殖腺病毒（oncolyticadenoviruses）生物制剂是癌症研究领域的一个热点，原理类似于警方向犯罪目前，埃博拉疫情仍在西非蔓延，面对埃博拉病毒的高死亡率，我们束手无策。美国国立卫生院（NIH）的研究人员发现，来自黑猩猩的腺病毒疫苗可以针对埃博拉病毒产生急性和长期的免疫保护作用。该研究结果在线发表在日的NatureMedicine上。研究历程人类来源的腺病毒载体是许多病原体疫苗的基本工具。科研人员在最初研制埃博拉疫苗时也使用了这一载体。他们将埃博拉病毒糖蛋白（G作者：更昔洛韦治疗小儿腺病毒肺炎临床观察(pdf)　［摘要］目的探讨更昔洛韦治疗小儿腺病毒肺炎的疗效及安全性。方法用更昔洛韦治疗52例小儿腺病毒肺炎，并以43例患儿作为对照给予病毒唑治疗。结果治疗组治愈率达90.2%，总有效率100%；对照组治愈率63.2%，总有效率85.32%，两组治愈率与总有效率比较，差异有非常显著性（P＜0.01）；治疗组咳嗽、喘息、肺部啰音以及热退时间均明显短于病毒唑对照组，【概述】1958年以来我国各地相继证实，腺病毒除引起上呼吸道感染外，还可引致小儿肺炎，多见于6个月至2岁的婴幼儿腺病毒肺炎最为危重，尤以北方各省多见，病情严重者也较南方为多。华北、东北及西北于1958年冬及1963年冬有较大规模的腺病毒肺炎流行，病情极其严重。【诊断】应根据流行情况，结合临床进行诊断。典型婴幼儿腺病毒肺炎早期与一般细菌性肺炎不同之处为：①大多数病例起病时或起病不久即有持续性高热，6月15日，PLoSONE在线报道了缺氧调节溶瘤腺病毒治疗肿瘤的研究进展。缺氧是一个微环境因素，有助于肿瘤细胞的侵袭，进展和转移。缺氧肿瘤细胞往往会比常氧肿瘤细胞表现出更大的放化疗抵抗能力。这表明人类需要新型抗癌疗法有效地消除缺氧肿瘤细胞。以往研究发明了肿瘤特异的复制性溶瘤腺病毒（OBP-301：Telomelysin）。其中，人端粒酶逆转录酶（hTERT）启动子驱动病毒E1的表达。hTERT基病毒性肠炎是儿科常见病之一，一年四季均有发病，以秋冬季节为主。腺病毒是小儿病毒性肠炎中仅次于轮状病毒的病原。我院自2004年7月开始，采用免疫测试法，使用单克隆抗体在粪便中快速检测腺病毒抗原。现将一组住院腹泻患儿粪便检测腺病毒抗原阳性的血清电解质结果分析如下。　　1资料与方法　　1.1一般资料本组92例均为2004年7月～2004年12月因腹泻而收住我科的住院患儿。其中男59例，女33例；年龄＜日中华消化杂志2005Vol.25No.12P.733-7369（济南）为了观察腺病毒介导的RNA干扰(RNAi)技术对人食管鳞癌细胞(Eca-109)环氧合酶(COX)-2基因表达的抑制效果及其对Eca-109细胞生长的影响，研究者采用含RNA聚合酶Ⅲ启动子H1的质粒pSUPER构建针对人COX-2mRNA的重组质粒psiRNA/COX-2。NotⅠ和XhoⅠ双酶切psiR日国际在线9上海瑞金医院消化科结合10多年的超声内镜检查经验，完成一例超声内镜（EUS）引导基因重组人5型腺病毒植入治疗一例晚期胰腺癌患者。后期疗效观察证明了该治疗具有缩小肿瘤体积、破坏肿瘤新生血管的作用，从而有望为晚期胰腺癌患者提供一种新的治疗手段。据了解，超过80％的胰腺癌患者在明确诊断后已是晚期，丧失了手术时机，即使接受放化疗的治疗效果也极其有限。针对这部分被医学“放弃［摘要］目的探讨重组CTLA4Ig及IκBα重组腺病毒载体延长烧伤创面皮片移植存活情况。方法采用Wistar大鼠36只，随机分为3组，1组:正常对照组，2组:用AdCTLA4Ig液室温浸泡转染1h，3组:用AdvCD40LIg-IRES2-CTLA4Ig液室温浸泡转染1h。麻醉后常规背部备皮，在4cm×4cm面积上涂3%凝固汽油2ml，燃烧20s，致大鼠背部皮肤Ⅲ度烧伤，于烧伤后第3天，将所制备1981年以来，国外Kidd、Takiff等最早从腹泻病人粪便中分离出肠道型腺病毒(EAD)，以后DeTong用限制性内切酶分析EAD，发现其有两种不同电泳图谱，名为Ad-40及Ad-41。腺病毒胃肠炎广泛分布于全世界，检出率为5%～14%，其中Ad-40和Ad-41占70%左右。　　腺病毒胃肠炎的最小发病年龄为1个月，绝大多数发生于3岁以下的婴幼儿。Ad-40主要感染1岁左右婴儿，Ad-41则近日从北京市科委生物医药处获悉，由首都医科大学附属北京朝阳医院和中国疾控中心病毒所合作完成的《腺病毒55型肺炎临床和病毒学研究》论文日前被《美国胸科杂志》接收，近期将在线发表。该研究成果将为社区获得性肺炎的早诊、早治奠定基础。通过两年多的监测研究，科研人员发现，腺病毒55型已经成为我国北方地区社区获得性肺炎重要病原体。腺病毒肺炎占成人社区获得性肺炎（CAP）的5%，其中腺病毒55型最多见，占43（一）腺病毒的一般生物学特性　　人群中腺病毒可分布于人的腺体组织、扁桃体和肠系膜淋巴结等处，这组病毒的某些（Ad3、4、7）对人类有时可引起呼吸道疾病。在猴、牛、马、猪、羊、狗、鼠以及禽类均已分离到腺病毒。已发现80多个血清型腺病毒，其中已鉴定的人腺病毒有37个亚型。人类的腺病毒（Ad）按照其DNA基因组的同源性、致瘤性能、DNA百分率和DNA中G+C百分率的不同，分为A、B、C、D、E5组。人icipalCenterforDiseaseControlandPrevention，Yangjiang529500，Guang-dong，P.R.China）摘要:目的描述阳江市江城区某小学儿童腺病毒感染暴发的流行特征，查明病因，为控制疫情提供依据。方法现况调查和病例对照研究。结果某小学儿童腺病毒感染罹患率为6.3%;患者以7～8岁的儿童为主;12例患者检测腺病毒IgM抗体阳性;病例组与对照组【摘要】目的观察LacZDNA标记的腺病毒在高氧性肺损伤基因治疗中的转染和致炎作用。方法装载LacZDNA的腺病毒在小鼠高氧模型开始前2天经鼻腔送入体内，X-gal染色和β-半乳糖酶活性测定用于确定LacZDNA在肺内转染的分布及其蛋白表达产物的活性;小鼠肺干/湿重比和支气管肺泡盥洗液(BALF)内的蛋白浓度的测定用于鉴定腺病毒在基因治疗过程中可能存在的致炎作用。结果X-gal染色显示LacZD日中国医学论坛报25闭塞性细支气管炎(BO)是儿童慢性阻塞性肺病的一种少见而严重的形式。阿根廷RicardoGutierrez儿童医院Colom医师等最近的一项病例对照研究发现,婴幼儿感染后BO与腺病毒感染密切相关,且该病患儿常需接受机械通气治疗。研究共纳入109例感染后BO患儿和99名对照单纯细支气管炎患儿(年龄均<3岁),研究者用免疫荧光法检测病毒种类,并对两组参试患儿进行肺功能检测及接触烟萨克生物研究学院的研究者利用可避开细胞自杀程序的腺病毒发现了一种新机制可用于解释肿瘤抑制基因是如何在肿瘤细胞中发生沉默的，为新型靶向性肿瘤治疗指明了道路。这一研究成果发表在《Nature》杂志上。当细胞处于压力下，肿瘤抑制基因p53可以激活一系列下游分子启动内在的“自毁”机制清除病毒感染或是来自于机体的异常细胞。感冒腺病毒可像肿瘤细胞一样使p53信号失活从而成功繁殖。“并没有直接使p53失活，腺最近，中科院广州生物医药与健康研究院特聘研究员陈凌博士带领其研究组成员孙彩军博士、冯立强博士等研发了一种可克服体内腺病毒中和抗体的新技术AVIP，并在恒河猴模型中利用腺病毒载体艾滋病疫苗进行了概念验证。相关成果发表于国际病毒学权威期刊《病毒学杂志》（JVirol.):11031-42.）。腺病毒（Adenovirus），尤其是人5型腺病毒（Ad5）已被广泛作为重组基因治疗和疫日JTHORACCARDIOVSUR,December;Volume128&#8226;Number6,883500pfu/cell),但经顺铂预处理后，可以显示出剂量依赖性的细胞毒性作用，50％抑制浓度可降至4－42pfu/cell。在正常细胞系，顺铂和Ad/gTRAIL均未表现出细胞毒性。由此作者认为，顺铂预处理在肿瘤细胞系中可使Ad/gTRAIL的细胞【摘要】[目的]考察腺病毒载体搭载的重组人组织金属蛋白酶抑制因子-3基因(RAdTIMP-3)转染兔椎间盘后对椎间盘内主要基质成分质量的影响，并探讨其用于椎间盘退变治疗的可行性。[方法]扩增Lac-Z基因标记的RAdTIMP-3和重组腺病毒载体RAd66，并进行纯化、鉴定及滴度测定。将30只日本大白兔随机分入5组，分别向L4、5、L5、6椎间盘内注射生理盐水(第1组)、1.0×1010OPU/m
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